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亲和层析纯化重组人源性抗HBsAg Fab抗体
被引量：
5
1
作者
邓宁
陈文吟
+2 位作者
向军俭
饶桂荣
唐勇
《细胞与分子免疫学杂志》
CAS
CSCD
北大核心
2004年第5期575-577,共3页
目的 :纯化酵母发酵产生的重组人源性抗HBsAgFab抗体 ,建立稳定、适于生产应用的纯化工艺。方法 :以原核表达的重组人源性抗HBsscFv免疫BALB/c小鼠 ,经杂交瘤技术制备大量分泌mAb的杂交瘤细胞株 14F7。将该细胞株注入小鼠腹腔制备mAb腹...
目的 :纯化酵母发酵产生的重组人源性抗HBsAgFab抗体 ,建立稳定、适于生产应用的纯化工艺。方法 :以原核表达的重组人源性抗HBsscFv免疫BALB/c小鼠 ,经杂交瘤技术制备大量分泌mAb的杂交瘤细胞株 14F7。将该细胞株注入小鼠腹腔制备mAb腹水 ,经辛酸沉淀纯化后 ,制备亲和层析柱 ,纯化酵母发酵产生的重组人源性抗HBsAgFab抗体。结果 :用抗scFvmAb亲和层析柱纯化的重组人源性抗HBsAgFab的纯度可达 95 %以上 ,回收率可达 70 %～ 85 %。结论 :人源性抗HBsscFv制备mAb作为亲和层析的介质 ,可有效地从酵母发酵上清中纯化重组人源性抗HBsAgFab,适用于大规模生产重组人源性抗HBsAgFab。
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关键词
HBSAG
重组Fab
抗scFv单克隆抗体
亲和层析
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职称材料
重组人源抗HBsAg Fab的糖基化分析
被引量：
3
2
作者
邓宁
向军俭
+2 位作者
唐勇
王宏
粟宽源
《细胞与分子免疫学杂志》
CAS
CSCD
北大核心
2005年第5期658-660,共3页
目的:分析重组人源抗HBsAgFab的糖基化。方法:应用PAS糖染色法和经酶切糖苷酶H去糖基后,用MALDI-TOF-MS质谱仪对重组人源抗HBsAgFab的糖基化进行分析。结果:PAS染色法的结果显示,毕赤酵母(Pichiapastoris)表达的重组人源抗HBsAgFab呈淡...
目的:分析重组人源抗HBsAgFab的糖基化。方法:应用PAS糖染色法和经酶切糖苷酶H去糖基后,用MALDI-TOF-MS质谱仪对重组人源抗HBsAgFab的糖基化进行分析。结果:PAS染色法的结果显示,毕赤酵母(Pichiapastoris)表达的重组人源抗HBsAgFab呈淡红色。用质谱仪测定P.pastoris表达的经内切糖苷酶H去糖基后的重组人源抗HBsAgFab的相对分子质量(Mr),从50678.49降低到49245,相差1433.49(约相当于少了8个甘露糖基)。结论:P.pastoris表达的重组人源抗HBsAgFab,为一种具有生物活性的低糖基化的蛋白,为深入研究其性质及功能奠定了基础。
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关键词
HBSAG
FAB
糖基化
毕赤酵母
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职称材料
题名
亲和层析纯化重组人源性抗HBsAg Fab抗体
被引量：
5
1
作者
邓宁
陈文吟
向军俭
饶桂荣
唐勇
机构
暨南大学生命科学技术学院分子免疫学与抗体工程实验室
解放军第
出处
《细胞与分子免疫学杂志》
CAS
CSCD
北大核心
2004年第5期575-577,共3页
基金
广州市科技局重点项目资助 (No .2 0 0 3J1 C0 1 71 )
国家自然科学基金项目资助 (No .40 3760 30 )
文摘
目的 :纯化酵母发酵产生的重组人源性抗HBsAgFab抗体 ,建立稳定、适于生产应用的纯化工艺。方法 :以原核表达的重组人源性抗HBsscFv免疫BALB/c小鼠 ,经杂交瘤技术制备大量分泌mAb的杂交瘤细胞株 14F7。将该细胞株注入小鼠腹腔制备mAb腹水 ,经辛酸沉淀纯化后 ,制备亲和层析柱 ,纯化酵母发酵产生的重组人源性抗HBsAgFab抗体。结果 :用抗scFvmAb亲和层析柱纯化的重组人源性抗HBsAgFab的纯度可达 95 %以上 ,回收率可达 70 %～ 85 %。结论 :人源性抗HBsscFv制备mAb作为亲和层析的介质 ,可有效地从酵母发酵上清中纯化重组人源性抗HBsAgFab,适用于大规模生产重组人源性抗HBsAgFab。
关键词
HBSAG
重组Fab
抗scFv单克隆抗体
亲和层析
Keywords
HBsAg
recombinant Fab
scFv monoclonal antibody
affinity chromatography
分类号
R392.11 [医药卫生—免疫学]
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职称材料
题名
重组人源抗HBsAg Fab的糖基化分析
被引量：
3
2
作者
邓宁
向军俭
唐勇
王宏
粟宽源
机构
暨南大学生命科学技术学院分子免疫学与抗体工程实验室
解放军第
出处
《细胞与分子免疫学杂志》
CAS
CSCD
北大核心
2005年第5期658-660,共3页
基金
国家自然科学基金项目(No.30471607)
广州市科技计划重点项目(No.2003J1-C0171)
文摘
目的:分析重组人源抗HBsAgFab的糖基化。方法:应用PAS糖染色法和经酶切糖苷酶H去糖基后,用MALDI-TOF-MS质谱仪对重组人源抗HBsAgFab的糖基化进行分析。结果:PAS染色法的结果显示,毕赤酵母(Pichiapastoris)表达的重组人源抗HBsAgFab呈淡红色。用质谱仪测定P.pastoris表达的经内切糖苷酶H去糖基后的重组人源抗HBsAgFab的相对分子质量(Mr),从50678.49降低到49245,相差1433.49(约相当于少了8个甘露糖基)。结论:P.pastoris表达的重组人源抗HBsAgFab,为一种具有生物活性的低糖基化的蛋白,为深入研究其性质及功能奠定了基础。
关键词
HBSAG
FAB
糖基化
毕赤酵母
分类号
Q786 [生物学—分子生物学]
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职称材料
题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
亲和层析纯化重组人源性抗HBsAg Fab抗体
邓宁
陈文吟
向军俭
饶桂荣
唐勇
《细胞与分子免疫学杂志》
CAS
CSCD
北大核心
2004
5
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职称材料
2
重组人源抗HBsAg Fab的糖基化分析
邓宁
向军俭
唐勇
王宏
粟宽源
《细胞与分子免疫学杂志》
CAS
CSCD
北大核心
2005
3
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职称材料
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参考文献
引证文献
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