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人外周血单核细胞体外诱导树突状细胞的形态学观察与功能研究
被引量：
3
1
作者
史毓杰
江振友
董军
《实用医学杂志》
CAS
2005年第4期361-363,共3页
目的:探讨从人外周血单核细胞体外培养扩增的树突状细胞(dendriticcell,DC)形态学特征及其活性。方法:人外周血常规分离单个核细胞,粘附6h后去除悬浮细胞,以细胞因子粒细胞-巨噬细胞集落刺激因子(GM-CSF)、白细胞介素-4(IL-4)进行诱导培...
目的:探讨从人外周血单核细胞体外培养扩增的树突状细胞(dendriticcell,DC)形态学特征及其活性。方法:人外周血常规分离单个核细胞,粘附6h后去除悬浮细胞,以细胞因子粒细胞-巨噬细胞集落刺激因子(GM-CSF)、白细胞介素-4(IL-4)进行诱导培养7d,并进行形态学特征,细胞表型和淋巴细胞刺激能力鉴定。结果:培养1周即可得到大量DC,形态学观察可见细胞形态不规则,细胞表面大量突起,为典型的DC特征,免疫组化和间接免疫荧光显示CD1a阳性表达率达80%～95%,并能刺激同种淋巴细胞增殖反应。结论:人外周血单核细胞可经GM-CSF、IL-4诱导培养成DC,具有典型的树突状细胞的形态学特征及抗原呈递能力。
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关键词
人外周血单核细胞
树突状细胞
形态学观察
DC
GM-CSF
IL-4
体外诱导
能力
结论
培养
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职称材料
佛波酯诱导THP-1细胞分化条件的优化及自噬模型的建立
被引量：
5
2
作者
陈亮
孙毅凡
+4 位作者
陈涛
李海成
江振友
周琳
钟球
《中国防痨杂志》
CAS
2013年第12期997-1002,共6页
目的 探讨佛波酯（phorbol 12-myristate 13-acetate, PMA）诱导THP-1细胞（人类单核/巨噬细胞）分化的最优条件，建立相关自噬模型，为基于细胞自噬模型的研究奠定实验基础。 方法 采用PMA诱导THP-1细胞分化成巨噬细胞；用表达融合蛋白...
目的 探讨佛波酯（phorbol 12-myristate 13-acetate, PMA）诱导THP-1细胞（人类单核/巨噬细胞）分化的最优条件，建立相关自噬模型，为基于细胞自噬模型的研究奠定实验基础。 方法 采用PMA诱导THP-1细胞分化成巨噬细胞；用表达融合蛋白pcDNA3.1-YFP-LC3质粒转染THP-1细胞，YFP为黄绿色荧光蛋白，以示踪自噬体的形成。采用倒置显微镜观察不同浓度（0、10、20、50、100、200 ng/ml）、不同时间（0、24、48、60 h）PMA分化细胞形态学变化；采用荧光显微镜示踪不同条件下LC3点聚集的增强；实时荧光定量聚合酶链式反应（reverse transcription-quantitative polymerase chain reaction ，RT-qPCR）检测自噬相关基因mRNA的表达。采用SPSS 17.0软件进行统计分析。mRNA相对含量2-ΔΔCt用“x±s”表示。经比较Ct值法分析基因表达差异。Earle’s balanced salts solution（EBSS，又称饥饿培养基），诱导细胞自噬相关基因mRNA表达量变化的比较采用t检验分析，以P0.05为差异有统计学意义。 结果 PMA浓度为100 ng/ml、诱导时间为24～48 h时，THP-1细胞分化成巨噬细胞的形态学状态较理想。饥饿培养基EBSS处理分化的THP-1细胞，能增加自噬体YFP-LC3点聚集，其自噬相关基因LC3、Atg5、Atg7、Beclin1的mRNA表达水平显著增加 （2-ΔΔCt均值分别为1.35±0.16、1.18±0.39、1.44±0.12、1.08±0.09，t值分别为4.00、2.90、5.16、3.57，P值均＜0.05）。 结论 PMA在浓度为100 ng/ml、24～48 h时诱导THP-1分化为巨噬细胞状态较理想；成功构建了THP-1源性细胞自噬模型。
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关键词
白血病
单核细胞
急性
细胞系
肿瘤
十四酰佛波乙酯
自噬
模型
生物学
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职称材料
题名
人外周血单核细胞体外诱导树突状细胞的形态学观察与功能研究
被引量：
3
1
作者
史毓杰
江振友
董军
机构
暨南大学
微生物
与免疫
学
教研室
暨南大学
病理生理
教研室
出处
《实用医学杂志》
CAS
2005年第4期361-363,共3页
文摘
目的:探讨从人外周血单核细胞体外培养扩增的树突状细胞(dendriticcell,DC)形态学特征及其活性。方法:人外周血常规分离单个核细胞,粘附6h后去除悬浮细胞,以细胞因子粒细胞-巨噬细胞集落刺激因子(GM-CSF)、白细胞介素-4(IL-4)进行诱导培养7d,并进行形态学特征,细胞表型和淋巴细胞刺激能力鉴定。结果:培养1周即可得到大量DC,形态学观察可见细胞形态不规则,细胞表面大量突起,为典型的DC特征,免疫组化和间接免疫荧光显示CD1a阳性表达率达80%～95%,并能刺激同种淋巴细胞增殖反应。结论:人外周血单核细胞可经GM-CSF、IL-4诱导培养成DC,具有典型的树突状细胞的形态学特征及抗原呈递能力。
关键词
人外周血单核细胞
树突状细胞
形态学观察
DC
GM-CSF
IL-4
体外诱导
能力
结论
培养
Keywords
Monocytes Dendritic cells Granulocyte marcrophage clolony stimulating factor Interleuk in 4
分类号
R392 [医药卫生—免疫学]
R730 [医药卫生—肿瘤]
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职称材料
题名
佛波酯诱导THP-1细胞分化条件的优化及自噬模型的建立
被引量：
5
2
作者
陈亮
孙毅凡
陈涛
李海成
江振友
周琳
钟球
机构
广东省结核病控制中心门诊部
暨南大学微生物与免疫教研室
广东省结核病控制中心参比实验室
广东省结核病控制中心主任办
出处
《中国防痨杂志》
CAS
2013年第12期997-1002,共6页
基金
广东省自然科学基金(WSTJJ20120319130623198210011211)
"十二五"国家科技重大专项(2012ZX10004903)
广东省"十二五"医学重点实验室
文摘
目的 探讨佛波酯（phorbol 12-myristate 13-acetate, PMA）诱导THP-1细胞（人类单核/巨噬细胞）分化的最优条件，建立相关自噬模型，为基于细胞自噬模型的研究奠定实验基础。 方法 采用PMA诱导THP-1细胞分化成巨噬细胞；用表达融合蛋白pcDNA3.1-YFP-LC3质粒转染THP-1细胞，YFP为黄绿色荧光蛋白，以示踪自噬体的形成。采用倒置显微镜观察不同浓度（0、10、20、50、100、200 ng/ml）、不同时间（0、24、48、60 h）PMA分化细胞形态学变化；采用荧光显微镜示踪不同条件下LC3点聚集的增强；实时荧光定量聚合酶链式反应（reverse transcription-quantitative polymerase chain reaction ，RT-qPCR）检测自噬相关基因mRNA的表达。采用SPSS 17.0软件进行统计分析。mRNA相对含量2-ΔΔCt用“x±s”表示。经比较Ct值法分析基因表达差异。Earle’s balanced salts solution（EBSS，又称饥饿培养基），诱导细胞自噬相关基因mRNA表达量变化的比较采用t检验分析，以P0.05为差异有统计学意义。 结果 PMA浓度为100 ng/ml、诱导时间为24～48 h时，THP-1细胞分化成巨噬细胞的形态学状态较理想。饥饿培养基EBSS处理分化的THP-1细胞，能增加自噬体YFP-LC3点聚集，其自噬相关基因LC3、Atg5、Atg7、Beclin1的mRNA表达水平显著增加 （2-ΔΔCt均值分别为1.35±0.16、1.18±0.39、1.44±0.12、1.08±0.09，t值分别为4.00、2.90、5.16、3.57，P值均＜0.05）。 结论 PMA在浓度为100 ng/ml、24～48 h时诱导THP-1分化为巨噬细胞状态较理想；成功构建了THP-1源性细胞自噬模型。
关键词
白血病
单核细胞
急性
细胞系
肿瘤
十四酰佛波乙酯
自噬
模型
生物学
Keywords
Leukemia, monocytic, acute
Cell line, tumor
Tetradecanoylphorbol acetate
Autolahagy
Models, biological
分类号
R329 [医药卫生—人体解剖和组织胚胎学]
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职称材料
题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
人外周血单核细胞体外诱导树突状细胞的形态学观察与功能研究
史毓杰
江振友
董军
《实用医学杂志》
CAS
2005
3
在线阅读
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职称材料
2
佛波酯诱导THP-1细胞分化条件的优化及自噬模型的建立
陈亮
孙毅凡
陈涛
李海成
江振友
周琳
钟球
《中国防痨杂志》
CAS
2013
5
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职称材料
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