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EGFL8基因沉默对肝癌细胞侵袭转移能力的影响 被引量:6
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作者 谭国钳 黄彪 +1 位作者 吴帆 陈为佳 《实用医学杂志》 CAS 北大核心 2020年第4期440-444,450,共6页
目的观察EGFL8基因沉默对Hep3B人肝癌细胞系侵袭迁移能力的影响。方法采用实时定量PCR方法检测EGFL8基因在Hep3B、SMMC-7721和HCCLM3这3种具有不同转移潜能的肝癌细胞系中的表达水平。采用慢病毒介导的小干扰RNA(Small interfering RNA;... 目的观察EGFL8基因沉默对Hep3B人肝癌细胞系侵袭迁移能力的影响。方法采用实时定量PCR方法检测EGFL8基因在Hep3B、SMMC-7721和HCCLM3这3种具有不同转移潜能的肝癌细胞系中的表达水平。采用慢病毒介导的小干扰RNA(Small interfering RNA;siRNA)方法构建了EGFL8基因沉默的Hep3B细胞系,实验分为shEGFL8组(实验组)和shCtrl组(对照组),以实时定量PCR法检测了EGFL8基因的沉默效率,并以划痕愈合和Transwell小室侵袭实验观察EGFL8基因沉默对Hep3B细胞系侵袭迁移能力的影响。结果EGFL8基因表达水平在低转移潜能的Hep3B肝癌细胞系中最高(0.002106±0.000782),在中等转移潜能的SMMC-7721细胞系中次之(0.0006028±0.00003128),在高转移潜能的HCCLM3细胞系中最低(0.0002613±0.000019)。shEGFL8组中的EGFL8表达水平明显低于shCtrl组(0.233±0.007比1.013±0.118,t=6.582,P=0.0028)。Transwell小室侵袭实验结果显示,shEGFL8组Hep3B细胞穿过聚碳酸酯膜的平均细胞数明显高于shCtrl组(105.3±6.983 vs.52.33±4.256,t=6.48,P=0.0029)。划痕愈合实验中,shEGFL8组Hep3B细胞的迁移率明显高于shCtrl组(24 h迁移率:10.67%±1.20%vs.5.67%±0.33%,t=4.009,P=0.016;(72 h迁移率:22.67%±1.20%vs.12.67%±1.20%,t=5.883,P=0.004)。结论EGFL8基因下调与肝癌细胞系的转移潜能相关,EGFL8基因沉默可显著增强Hep3B肝癌细胞系的侵袭迁移能力,提示EGFL8是一个肝癌转移抑制基因。 展开更多
关键词 肝细胞癌 EGFL8 侵袭转移 慢病毒 小干扰RNA
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Mus81基因沉默对Hep3B人肝癌细胞系增殖和凋亡的影响 被引量:4
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作者 张芳雍 谭国钳 +1 位作者 曾裕文 吴帆 《实用医学杂志》 CAS 北大核心 2020年第23期3189-3193,共5页
目的研究甲磺酸盐及紫外线敏感性81号基因(methyl methanesulfonate and UV sensitive gene clone 81,Mus81)沉默对Hep3B人肝癌细胞系增殖和凋亡的影响。方法采用慢病毒介导的小干扰RNA技术沉默Mus81基因的表达并以实时荧光定量聚合酶... 目的研究甲磺酸盐及紫外线敏感性81号基因(methyl methanesulfonate and UV sensitive gene clone 81,Mus81)沉默对Hep3B人肝癌细胞系增殖和凋亡的影响。方法采用慢病毒介导的小干扰RNA技术沉默Mus81基因的表达并以实时荧光定量聚合酶链反应(qRT⁃PCR)检测Mus81基因的沉默效率。噻唑蓝(MTT)法绘制细胞生长曲线,平板克隆实验、碘化丙锭(PI)染色法和膜联蛋白V(Annexin V)⁃APC染色法分别检测Mus81沉默对Hep3B细胞系增殖、细胞周期及凋亡的影响。结果慢病毒感染效率高于80%,Mus81基因干扰效率为76.42%(P<0.001)。MTT生长曲线和平板克隆实验的结果显示,Mus81沉默的Hep3B细胞系的生长速度明显下降(P<0.001),增殖能力也明显减弱[细胞克隆数:(2±1)比(54±3),P<0.001]。Annexin V⁃APC和PI染色检测显示Mus81沉默Hep3B细胞系的凋亡率明显升高[(20.87±0.82)%vs.(0.69±0.09)%,P<0.001]并出现G1期细胞比例轻微降低[(33.77±1.61)%vs.(42.06±0.40)%,P<0.05]。结论Mus81基因沉默可明显抑制人肝癌细胞系Hep3B的生长增殖并促进其凋亡。 展开更多
关键词 甲磺酸盐及紫外线敏感性81号基因 肝细胞癌 增殖 凋亡 小干扰RNA
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