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TIM-3、LAG-3和BTLA介导的血液肿瘤免疫耐受及其逆转研究 被引量:6
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作者 陈少华 查显丰 李扬秋 《中国实验血液学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2016年第5期1594-1597,共4页
近年来认为肿瘤免疫抑制最为重要的原因,是免疫细胞异常表达一些T细胞免疫抑制受体所介导的T细胞功能耗竭,与肿瘤的发生发展密切相关,而阻断这些免疫负调控受体通路可以使T细胞部分或全部恢复功能。本文就近年来新近发现的T细胞免疫抑... 近年来认为肿瘤免疫抑制最为重要的原因,是免疫细胞异常表达一些T细胞免疫抑制受体所介导的T细胞功能耗竭,与肿瘤的发生发展密切相关,而阻断这些免疫负调控受体通路可以使T细胞部分或全部恢复功能。本文就近年来新近发现的T细胞免疫抑制受体T细胞免疫球蛋白黏蛋白分子3(TIM-3)、淋巴细胞活化基因-3(LAG3)和B和T淋巴细胞弱化子(BTLA)在血液肿瘤介导T细胞免疫耐受中的作用及其靶向治疗研究进展作一综述,旨在为血液肿瘤的免疫靶向治疗提供新的思路。 展开更多
关键词 血液肿瘤 细胞免疫球蛋白黏蛋白分子3 淋巴细胞活化基因-3 B和T淋巴细胞弱化子 靶向治疗
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T细胞介导炎症与血液肿瘤发生相关性研究进展 被引量:3
2
作者 李扬秋 杨力建 陈少华 《暨南大学学报(自然科学与医学版)》 CAS CSCD 北大核心 2012年第2期111-115,共5页
慢性炎症是肿瘤发生过程中一个重要因素,越来越多的研究显示T细胞介导炎症与多种肿瘤发生密切相关。本文主要综述近期有关T细胞介导炎症与血液肿瘤发生的相关性及其分子机制的新进展。
关键词 T细胞 慢性炎症 自身免疫性疾病 血液肿瘤 肿瘤发生
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三氧化二砷诱导Raji细胞凋亡过程中端粒酶活性和hTERT、bcl-2基因表达的研究 被引量:9
3
作者 何冬梅 张洹 +1 位作者 刘革修 余卫 《中国病理生理杂志》 CAS CSCD 北大核心 2005年第7期1422-1423,1430,共3页
目的:研究三氧化二砷(As2O3)诱导Raji细胞凋亡并初步探讨端粒酶活性、人类端粒酶逆转录酶(hTERT)基因及bcl-2基因表达之间的关系。方法:通过姬姆萨染色来观察细胞的凋亡;以RT-PCR分析bcl-2、hTERT基因的mRNA表达水平;利用半定量多聚酶... 目的:研究三氧化二砷(As2O3)诱导Raji细胞凋亡并初步探讨端粒酶活性、人类端粒酶逆转录酶(hTERT)基因及bcl-2基因表达之间的关系。方法:通过姬姆萨染色来观察细胞的凋亡;以RT-PCR分析bcl-2、hTERT基因的mRNA表达水平;利用半定量多聚酶链反应-酶联免疫反应(PCR-ELISA)方法检测As2O3处理Raji细胞前后端粒酶活性的改变。结果:2μmol/LAs2O3能诱导Raji细胞凋亡,2μmol/LAs2O3作用于Raji细胞8h、12h、24hhTERTmRNA相对表达量分别与对照组比较有显著差异(P<0.05),12h、24hbcl-2mRNA相对表达量分别与对照组比较有显著差异。2μmol/LAs2O3作用48h后,Raji细胞中端粒酶活性即出现下降,作用72h、96h,端粒酶的活性明显受到抑制,吸光度分别为0.829、0.328、0.291,分别与空白对照组比较有显著差异(P<0.05)。结论:As2O3诱导Raji细胞凋亡过程中,端粒酶活性下调与hTERT、bcl-2基因mRNA表达下降有关。 展开更多
关键词 三氧化二砷 RAJI细胞 端粒 末端转移酶 HTERT基因 BCL-2基因 细胞凋亡
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体外诱导小鼠胎肝间充质干细胞向胰岛B样细胞分化的研究 被引量:12
4
作者 余卫 张洹 何冬梅 《第二军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2004年第8期827-830,共4页
目的:体外分离和定向诱导小鼠胎肝间充质干细胞向胰岛B样细胞分化。方法:无菌条件下从正常C57BL/6J胎鼠肝中分离出间充质干细胞,体外培养传3代后用高浓度葡萄糖培养基以及碱性纤维生长因子(basic fihroblast growth factor,bFGF)和尼... 目的:体外分离和定向诱导小鼠胎肝间充质干细胞向胰岛B样细胞分化。方法:无菌条件下从正常C57BL/6J胎鼠肝中分离出间充质干细胞,体外培养传3代后用高浓度葡萄糖培养基以及碱性纤维生长因子(basic fihroblast growth factor,bFGF)和尼克酰胺诱导分化,观察胎肝间充质干细胞诱导前后形态变化;用RT-PCR检测细胞诱导前后胰十二指肠同源异型基因盒1(pancreatic duodenal homeobox-1,PDX-1)、胰岛素原1(proinsulin-1,INS-1)、葡萄糖转运子2(glucose transporter-2,GLUT-2)表达情况;胰岛素免疫细胞化学染色鉴定诱导后细胞胰岛素的表达;在形成胰岛样细胞簇后,用双硫腙做胰岛B细胞特异性染色。结果:RT-PCR显示诱导5 d后PDX-1、INS-1、GLUT-2均有表达,而诱导前的细胞则没有检测到表达;胰岛素免疫细胞化学表明细胞簇内的细胞胰岛素染色强阳性;细胞簇双硫腙染色阳性(每个T-25培养瓶有80-120个)。结论:从胎肝中分离出的间充质干细胞在体外可以定向诱导分化为胰岛B样细胞。 展开更多
关键词 间充质干细胞 胎肝 胰岛B样细胞 细胞分化
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体外诱导人骨髓间充质干细胞向胰岛β样细胞分化的研究 被引量:9
5
作者 陆琰 张洹 迟作华 《暨南大学学报(自然科学与医学版)》 CAS CSCD 北大核心 2005年第6期729-733,共5页
目的:探讨体外诱导人骨髓间充质干细胞(MSCs)向胰岛β样细胞分化。方法:在无菌条件下从正常成人骨髓中分离间充质干细胞,体外培养传3代后用表皮生长因子(epidermal growthfactor,EGF)、β-巯基乙醇和高糖培养基诱导MSCs向胰岛β样细胞... 目的:探讨体外诱导人骨髓间充质干细胞(MSCs)向胰岛β样细胞分化。方法:在无菌条件下从正常成人骨髓中分离间充质干细胞,体外培养传3代后用表皮生长因子(epidermal growthfactor,EGF)、β-巯基乙醇和高糖培养基诱导MSCs向胰岛β样细胞分化。观察MSCs在诱导前后的形态变化;用胰岛素免疫细胞化学染色检测胰岛素的表达;用双硫腙染色鉴定胰岛β样细胞。结果:未经诱导的MSCs在培养体系中呈贴壁生长,长梭形,经诱导分化后,细胞逐渐变圆,并聚集成团;胰岛素免疫细胞化学表明细胞团内的细胞呈胰岛素染色强阳性反应;双硫腙染色阳性。结论:人骨髓间充质干细胞可在体外被定向诱导分化为胰岛β样细胞。 展开更多
关键词 骨髓 间充质干细胞 胰岛 糖尿病 分化
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盐霉素增强长春新碱诱导急性T淋巴细胞白血病Jurkat细胞株凋亡研究 被引量:5
6
作者 刘平平 朱锦灿 +2 位作者 刘革修 税朝祥 李小梅 《中国实验血液学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2015年第3期653-657,共5页
目的:本文旨在研究长春新碱(vincristine,VCR)与盐霉素(salinomycin,Sal)联合作用对急性T淋巴细胞白血病jurkat细胞株增殖、凋亡的影响及其可能的机制。方法:CCK-8法检测细胞增殖情况;流式细胞术检测各实验组细胞凋亡率;Western blot检... 目的:本文旨在研究长春新碱(vincristine,VCR)与盐霉素(salinomycin,Sal)联合作用对急性T淋巴细胞白血病jurkat细胞株增殖、凋亡的影响及其可能的机制。方法:CCK-8法检测细胞增殖情况;流式细胞术检测各实验组细胞凋亡率;Western blot检测凋亡相关蛋白BCL-2、caspase-3和caspase-8表达水平。结果:VCR、Sal单独及联合处理Jurkat细胞株均显示出明显的增殖抑制作用,两药联合使用的增殖抑制作用更显著(P<0.05),具有协同作用。联合用药组BCL-2蛋白水平较VCR和Sal单独处理组明显减少,而caspase-3和caspase-8水平明显增高;VCR和Sal联合用药组细胞凋亡率较VCR和Sal单独处理组明显提高(P<0.05)。结论:长春新碱联合盐霉素作用于Jurkat细胞具有协同抑制增殖及诱导凋亡的作用。 展开更多
关键词 长春新碱 盐霉素 急性T细胞白血病 JURKAT细胞株 细胞凋亡
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三氧化二砷抑制肝癌细胞端粒酶活性的实验研究 被引量:9
7
作者 任玮玮 李弘 张洹 《暨南大学学报(自然科学与医学版)》 CAS CSCD 2004年第6期681-685,共5页
 目的:观察三氧化二砷对肝癌细胞株BEL-7402和SMMC-7721端粒酶活性的影响。方法:应用端粒酶多聚酶联反应-酶联免疫测定(PCR-ELISA)方法,检测三氧化二砷作用后,肝癌细胞系BEL-7402和SMMC-7721细胞端粒酶活性的变化并比较两种细胞端粒酶...  目的:观察三氧化二砷对肝癌细胞株BEL-7402和SMMC-7721端粒酶活性的影响。方法:应用端粒酶多聚酶联反应-酶联免疫测定(PCR-ELISA)方法,检测三氧化二砷作用后,肝癌细胞系BEL-7402和SMMC-7721细胞端粒酶活性的变化并比较两种细胞端粒酶对三氧化二砷敏感性的差异。结果:0 25~2 00μmol/L三氧化二砷(24~96h)可抑制肝癌细胞系BEL-7402的端粒酶活性,抑制作用与时间、剂量呈依赖性关系;0 25~0 50μmol/L三氧化二砷对SMMC-7721细胞端粒酶活性没有影响(96h以内),1 00~2 00μmol/L三氧化二砷可抑制SMMC-7721细胞端粒酶活性(48~96h),有时间、剂量依赖关系。结论:三氧化二砷可以抑制肝癌细胞系BEL-7402和SMMC-7721细胞端粒酶的活性;BEL-7402细胞端粒酶对三氧化二砷的敏感性较SMMC-7721细胞端粒酶高。 展开更多
关键词 三氧化二砷 肝癌细胞 端粒酶 敏感性
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慢性苯中毒患者外周血TCR Vδ亚家族T细胞分布和克隆性研究 被引量:4
8
作者 李萡 李扬秋 +4 位作者 陈少华 杨力建 余卫 刘薇薇 陈嘉榆 《细胞与分子免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2008年第6期612-614,共3页
目的:了解慢性苯中毒患者外周血T细胞的TCRVδ基因谱系及其克隆性增殖情况。方法:利用RT-PCR方法扩增10例慢性苯中毒患者外周血单个核细胞中8个TCR Vδ基因的互补决定区3(CDR3),PCR产物进一步经荧光标记和基因扫描分析CDR3长度而确... 目的:了解慢性苯中毒患者外周血T细胞的TCRVδ基因谱系及其克隆性增殖情况。方法:利用RT-PCR方法扩增10例慢性苯中毒患者外周血单个核细胞中8个TCR Vδ基因的互补决定区3(CDR3),PCR产物进一步经荧光标记和基因扫描分析CDR3长度而确定T细胞的克隆性。结果:8例健康人平均表达(6.63±0.52)个Vδ亚家族,外周血中未检测到Vδ4和Vδ5亚家族,慢性苯中毒患者工人表达(1.10±0.57)个Vδ亚家族(1例重度苯中毒工人8个Vδ亚家族均未表达),外周血中未检测到Vδ1、Vδ3、Vδ4和Vδ8亚家族,与健康人比较有显著性差异(P〈0.01)。6例慢性苯中毒患者存在1-2个Vδα亚家族T细胞出现克隆性增殖。结论:慢性苯中毒患者外周血出现TCR Vδ亚家族倾斜性分布和克隆性增殖T细胞,这可能是苯中毒后所引起的机体特异性免疫反应。 展开更多
关键词 TCR Vδ基因 克隆性T细胞
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长链非编码RNA在肿瘤中的研究进展 被引量:4
9
作者 何冬梅 吴红 +1 位作者 高杨军 胡小毛 《暨南大学学报(自然科学与医学版)》 CAS CSCD 北大核心 2012年第2期121-126,共6页
长链非编码RNA(lncRNA)是一类转录本长度超过200 nt(核苷酸)的非编码RNA分子,可在遗传水平、转录水平和转录后水平调控基因的表达,广泛参与机体的生理和病理过程,在恶性肿瘤的发生和发展中起着重要作用。本文简单综述了几个与肿瘤密切... 长链非编码RNA(lncRNA)是一类转录本长度超过200 nt(核苷酸)的非编码RNA分子,可在遗传水平、转录水平和转录后水平调控基因的表达,广泛参与机体的生理和病理过程,在恶性肿瘤的发生和发展中起着重要作用。本文简单综述了几个与肿瘤密切相关的长链非编码RNA的研究进展。 展开更多
关键词 长链非编码RNA 基因表达 基因调控 肿瘤
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体外诱导小鼠胎肝间充质细胞向神经元样细胞分化的研究 被引量:4
10
作者 刘平平 张洹 刘革修 《第二军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2003年第9期950-953,共4页
目的 :探讨胎肝间充质细胞在体外向神经元样细胞分化的潜能。 方法 :无菌条件下获取胎龄 1 4 .5d的胎肝细胞 ,DMEM/HEPES/F1 2 (2 0 %FCS)培养得到贴壁细胞并传代 ,第 5代细胞经 β 巯基乙醇 (β mercaptoethanol,β ME)与全反式维甲酸 ... 目的 :探讨胎肝间充质细胞在体外向神经元样细胞分化的潜能。 方法 :无菌条件下获取胎龄 1 4 .5d的胎肝细胞 ,DMEM/HEPES/F1 2 (2 0 %FCS)培养得到贴壁细胞并传代 ,第 5代细胞经 β 巯基乙醇 (β mercaptoethanol,β ME)与全反式维甲酸 (all trans rentinoicacid ,ATRA)程序化诱导处理后 5h、5d ,用免疫细胞化学鉴定神经元抗原表达 ,同时用半定量RT PCR检测神经元相关基因mRNA表达情况。 结果 :胎肝间充质细胞经 β ME、ATRA诱导处理后 ,约 80 %细胞呈现典型的神经元样的形态表型。免疫细胞化学显示诱导分化后的细胞表达神经元特异蛋白如神经元核特异性抗原 (neuron specificnuclearpro tein ,NeuN)、神经元特异性管蛋白Ⅲ型 (neuronc specifictubulinⅢ ,TuJ 1 )、神经丝蛋白中链 (neurofilament M ,NF M )及神经元特异性烯醇化酶 (neuron specificenolase ,NSE) ,但是无成熟神经元微管相关蛋白Tau(microtubule associatedproteintau ,Tau 1 )、微管相关蛋白 2 (microtubule associatedprotein 2 ,MAP 2 )表达。半定量RT PCR结果显示诱导分化后的细胞酪氨酸羟化酶 (tyrosinehydroxylase ,TH)mRNA有表达 ,脑因子 1基因 (brainfactor 1 ,BF 1 )、脑因子 3基因 (brain 3,Brn 3)、神经丝蛋白轻链基因 展开更多
关键词 体外诱导 小鼠 胎肝间充质细胞 神经元样细胞 细胞分化
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Bcl-2反义核酸增强HL-60、K562细胞对柔红霉素敏感性的研究 被引量:4
11
作者 雷小勇 张洹 何冬梅 《中国病理生理杂志》 CAS CSCD 北大核心 2003年第2期194-197,T002,共5页
目的 :研究bcl- 2反义寡核苷酸作用后 ,白血病细胞株HL60、K562细胞对柔红霉素 (DNR)敏感性的影响。方法 :MTT法测HL60、K562细胞中DNR的半数抑制率 (IC50 ) ;免疫荧光标记观测细胞Bcl - 2蛋白水平 ;用Hoechest332 58和碘化丙锭双染色... 目的 :研究bcl- 2反义寡核苷酸作用后 ,白血病细胞株HL60、K562细胞对柔红霉素 (DNR)敏感性的影响。方法 :MTT法测HL60、K562细胞中DNR的半数抑制率 (IC50 ) ;免疫荧光标记观测细胞Bcl - 2蛋白水平 ;用Hoechest332 58和碘化丙锭双染色法及流式细胞仪检测细胞凋亡。结果 :靶向bcl- 2mRNA蛋白编码区反义寡核苷酸(AS-ODN1 )和靶向翻译起始区的反义寡核苷酸 (AS -ODN2 )分别与DNR联合作用于HL60细胞后DNR的IC50值分别为 0 .1 2 4± 0 0 1 1、0 1 4 9± 0 0 1 2 ,分别与不加寡核苷酸组DNR的IC50值 (0 1 73± 0 0 2 1 )或无义寡核苷酸联用DNR的IC50值 (0 1 80± 0 0 2 3)相比有显著差异 ,P <0 0 5。AS -ODN1和AS -ODN2分别与DNR联合作用于K562细胞后DNR的IC50值分别为 0 0 78± 0 0 0 7、0 0 79± 0 0 0 8,分别与不加寡核苷酸组DNR的IC50值 (0 1 0 6± 0 0 1 1 )或无义寡核苷酸联用DNR的IC50值 (0 1 0 7± 0 0 1 2 )相比有显著差异 ,P <0 0 5。AS -ODN1和AS -ODN2分别与DNR同时作用于HL60或K562细胞后抑制Bcl- 2蛋白表达及诱导细胞凋亡率分别与单用DNR或无义寡核苷酸联用DNR相比有显著差异 ,P <0 0 5。与AS -ODN2比较 ,AS -ODN1提高HL60细胞对DNR的敏感性作用要强些 (P <0 0 5)。结论 :靶? 展开更多
关键词 Bcl-2 反义寡核苷酸类 HL-60细胞 K562细胞 柔红霉素 药物敏感性
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PPP2R5C转录本在正常人和血液肿瘤病人中的分布情况 被引量:3
12
作者 陈宇 郑海涛 +4 位作者 陈少华 杨力建 李萡 卢育洪 李扬秋 《暨南大学学报(自然科学与医学版)》 CAS CSCD 北大核心 2010年第6期550-554,共5页
目的:建立分析不同PPP2R5C转录本检测方法,分析正常人和血液肿瘤病人中5种PPP2R5C基因转录本的表达特点。方法:根据PPP2R5C基因的结构特点,设计4对引物,利用RT-PCR方法分析9例正常人、7例T细胞-非霍奇金淋巴瘤(T-NHL)、11例B细胞-急性... 目的:建立分析不同PPP2R5C转录本检测方法,分析正常人和血液肿瘤病人中5种PPP2R5C基因转录本的表达特点。方法:根据PPP2R5C基因的结构特点,设计4对引物,利用RT-PCR方法分析9例正常人、7例T细胞-非霍奇金淋巴瘤(T-NHL)、11例B细胞-急性淋巴细胞白血病(B-ALL)和8例急性髓细胞白血病(AML)病人外周血单个核细胞(PBMC)中PPP2R5C基因的表达情况。结果:所设计的4对引物,均可在样本中扩增到预期PCR产物,其中第1对引物可扩增两个不同大小PCR产物(包含12+13+14外显子的大片段及仅含12+14外显子的小片段),而另3对对引物所扩增的产物分别为10+11+12+12 a外显子,Ⅲ+2外显子和Ⅳ+2外显子的基因片段,所有PCR产物均通过核苷酸序列分析证实。结果显示所有样本均表达全部PPP2R5C转录本。结论:初步建立区分不同PPP2R5C转录本的方法,各转录本在正常人和不同血液肿瘤病人中的分布情况基本一致。 展开更多
关键词 PPP2R5C基因 转录本 聚合酶链式反应 血液肿瘤
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骨髓增生异常综合征患者血清蛋白质组学特征研究 被引量:4
13
作者 钟立业 刘天浩 +6 位作者 李扬秋 耿素霞 陆泽生 翁建宇 吴穗晶 罗成伟 杜欣 《实用医学杂志》 CAS 北大核心 2009年第21期3586-3588,共3页
目的:利用铜螯合磁珠(magnetic beads-based immobilized metal affinity capture Cu)分离低峰度蛋白,以基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱(matrix-assisted laser desorption/ionization time-of-flight mass spectrometry,MALDI-TOF-... 目的:利用铜螯合磁珠(magnetic beads-based immobilized metal affinity capture Cu)分离低峰度蛋白,以基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱(matrix-assisted laser desorption/ionization time-of-flight mass spectrometry,MALDI-TOF-MS)技术分别检测骨髓增生异常综合征(myelodysplastic syndromes,MDS)患者和正常人血清蛋白质肽链的质量指纹谱,探索用于MDS辅助诊断的客观方法。方法:收集16例MDS患者(MDS组)和10例正常人(正常对照组)的血清蛋白标本,应用铜螯合磁珠进行蛋白分离,通过MALDI-TOF-MS测定标本的蛋白质谱图,对比分析差异蛋白峰,并建立诊断模型。结果:分子质量1.02~10.25ku范围内共检测到信噪比>3的峰146个,经统计分析,MDS组和正常对照组之间差异明显,有显著性差异峰12个(P<0.05),利用快速分类算法建立诊断模型,模型的识别准确率和交叉验证敏感性分别达93.27%和89.94%。各亚型对比分析,各组间区域交叉,组间差异不明显;根据临床分型,将难治性贫血伴幼稚细胞增多型(RAEB型)与其他类型MDS比较,发现RAEB型患者血清中有1个差异低表达蛋白峰,分子质量约1466.57,经鉴定为纤维蛋白原N端片段。结论:MALDI-TOF-MS技术平台可用于寻找MDS相关的血清蛋白质标志物,其蛋白质谱诊断模型可以区分MDS与正常人,有助于MDS的临床辅助诊断。RAEB型患者与其他类型的MDS中存在差异表达蛋白,提示进展型MDS与其他类型MDS有异质性。 展开更多
关键词 骨髓增生异常综合征 蛋白质组学 血清 质谱
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胎肝Sca-1^+细胞治疗STZ诱导小鼠糖尿病的实验研究 被引量:3
14
作者 林晨 张洹 +3 位作者 廖继东 赵欣 姜铧 余卫 《暨南大学学报(自然科学与医学版)》 CAS CSCD 北大核心 2005年第2期156-161,共6页
目的:探讨小鼠胎肝组织中的干细胞抗原1阳性的细胞(Sca - 1+细胞)治疗链脲佐菌素(STZ)诱导糖尿病鼠的潜能。方法:取14 5d的C5 7BL/6J小鼠胎肝,制作细胞悬液,用单克隆免疫磁珠细胞分离技术分离Sca - 1+细胞,将2×10 5个雄性小鼠Sca ... 目的:探讨小鼠胎肝组织中的干细胞抗原1阳性的细胞(Sca - 1+细胞)治疗链脲佐菌素(STZ)诱导糖尿病鼠的潜能。方法:取14 5d的C5 7BL/6J小鼠胎肝,制作细胞悬液,用单克隆免疫磁珠细胞分离技术分离Sca - 1+细胞,将2×10 5个雄性小鼠Sca - 1+细胞输注到STZ诱导的C5 7BL/6J雌性小鼠体内,以后每7d定时测定小鼠血糖,第38d处死受体小鼠取胰腺组织固定、切片,免疫组化观察胰腺组织中胰岛素阳性的β细胞变化。结果:小鼠胎肝Sca 1+细胞能够有效抑制STZ诱导小鼠血糖的持续升高,明显降低糖尿病鼠的死亡率。受体小鼠胰岛细胞结构清楚,其中可见表达胰岛素的β细胞,荧光原位杂交显示小鼠胰岛内有Y染色体阳性杂交点。结论:小鼠胎肝Sca - 展开更多
关键词 干细胞 链脲佐菌素 糖尿病
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CML细胞和K562细胞诱导TCR Vβ亚家族T细胞克隆性增殖和杀伤性的研究 被引量:2
15
作者 张玉平 李扬秋 +3 位作者 陈少华 杨力建 罗更新 张学利 《中国肿瘤临床》 CAS CSCD 北大核心 2003年第4期234-238,共5页
了解CML细胞和K562细胞体外诱导CML细胞特异性T细胞的TCRVβ亚家族利用、克隆性增殖和杀伤性情况。方法:采用混合淋巴细胞/白血病细胞培养法(MLTC)体外将CML细胞和K562细胞与脐血和成人外周血MNC混合培养和扩增,运用RT-PCR-基因扫描技... 了解CML细胞和K562细胞体外诱导CML细胞特异性T细胞的TCRVβ亚家族利用、克隆性增殖和杀伤性情况。方法:采用混合淋巴细胞/白血病细胞培养法(MLTC)体外将CML细胞和K562细胞与脐血和成人外周血MNC混合培养和扩增,运用RT-PCR-基因扫描技术分析其TCRVβ亚家族的利用和克隆性特点,以及应用间接荧光单抗标记技术和LDH法分析诱导增殖的T细胞免疫表型和杀伤性。结果:CML细胞和K562细胞可以诱导出呈寡克隆或寡克隆趋势生长的Vβ亚家族T细胞,并具有识别和杀伤CML细胞的功能。结论:CML细胞和K562细胞可在体外诱导出异体CML细胞特异性CTL,该CTL可能为优势表达的Vβ亚家族克隆性T细胞。 展开更多
关键词 慢性粒细胞白血病 T细胞受体 VΒ亚家族 克隆性 基因扫描
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RAEB型骨髓增生异常综合征患者血清蛋白质组学研究 被引量:3
16
作者 钟立业 刘天浩 +6 位作者 李扬秋 耿素霞 陆泽生 翁建宇 吴穗晶 罗成伟 杜欣 《南方医科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2009年第9期1799-1801,1805,共4页
目的利用蛋白质组学方法,寻找与RAEB(refractory anemia with excess blasts in transformation)型骨髓增生异常综合征(MDS)相关的特异性血清蛋白质标志物。方法应用双向电泳分别分离RAEB型MDS、急性髓性白血病及正常人的血清蛋白,通过... 目的利用蛋白质组学方法,寻找与RAEB(refractory anemia with excess blasts in transformation)型骨髓增生异常综合征(MDS)相关的特异性血清蛋白质标志物。方法应用双向电泳分别分离RAEB型MDS、急性髓性白血病及正常人的血清蛋白,通过对3组图谱进行比较分析,识别差异反应的蛋白质点,根据差异反应蛋白质点位置在平行胶上找出匹配的蛋白质点,并通过基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱对差异蛋白质点进行鉴定,通过数据库搜索鉴定出差异反应的蛋白质。结果以MDS组为参照,经过胶图分析得到7个差异蛋白质点,质谱鉴定提示4种蛋白有统计学意义,包括二肽基肽酶(dipeptidyl peptidase,DPP/CD26)、DNA聚合酶、未命名蛋白2044和类白蛋白物质。结论以2-DE为基础的血清蛋白质组学方法可用于筛选与MDS相关的蛋白质标志物;DPP在RAEB型MDS中的异常高表达提示DPP/CD26可能与进展类型的MDS相关。 展开更多
关键词 骨髓增生异常综合征 血清蛋白质组学 二肽基肽酶
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胎肝间充质干细胞治疗实验性糖尿病小鼠的研究 被引量:3
17
作者 余卫 何冬梅 张洹 《暨南大学学报(自然科学与医学版)》 CAS CSCD 北大核心 2007年第6期558-561,共4页
目的:研究胎肝间充质干细胞向胰岛β样细胞分化和治疗1型糖尿病的可行性。方法:用贴壁筛选法从正常C57BL/6j胎鼠(孕11.5~15.5d)肝脏中分离出胎肝间充质干细胞,用高浓度葡萄糖、碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)和尼克酰胺体外... 目的:研究胎肝间充质干细胞向胰岛β样细胞分化和治疗1型糖尿病的可行性。方法:用贴壁筛选法从正常C57BL/6j胎鼠(孕11.5~15.5d)肝脏中分离出胎肝间充质干细胞,用高浓度葡萄糖、碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)和尼克酰胺体外诱导胎肝间充质干细胞向胰岛B样细胞分化;制作1型糖尿病小鼠模型,并将诱导后的细胞移植到1型糖尿病小鼠肾被膜下,连续6周观察血糖变化;用组织学分析移植细胞体内的发育。结果:胎肝间充质干细胞来源的胰岛β样细胞移植到糖尿病小鼠肾被膜下后,具有一定的降低血糖的作用,经过6周以后,接近正常水平;取出移植物,小鼠高血糖重新出现,并很快死亡;移植物作免疫组织化学染色,可以观察到肾被膜下区含有大量胰岛素阳性细胞。结论:胎肝间充质干细胞有望成为1型糖尿病胰岛移植的种子细胞。 展开更多
关键词 胎肝 间充质干细胞 分化 STZ-糖尿病
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血管内皮生长因子基因反义核酸体外抑制K562细胞生长及机理研究 被引量:4
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作者 费嘉 张洹 韩忠朝 《中国病理生理杂志》 CAS CSCD 北大核心 2004年第10期1769-1772,共4页
目的 :探讨血管内皮生长因子 (VEGF)反义核酸抑制K5 6 2细胞生长的机理 ;以及反义药物的量效和时效关系 ,揭示VEGF基因新的功能。方法 :用反义核酸X7,2 0 -mer,全硫代修饰 ;以脂质体介导进行转染 ,细胞培养72h ,用MTT法计算细胞生长抑制... 目的 :探讨血管内皮生长因子 (VEGF)反义核酸抑制K5 6 2细胞生长的机理 ;以及反义药物的量效和时效关系 ,揭示VEGF基因新的功能。方法 :用反义核酸X7,2 0 -mer,全硫代修饰 ;以脂质体介导进行转染 ,细胞培养72h ,用MTT法计算细胞生长抑制率 ,采用台盼蓝拒染法每 2 4h观察细胞存活情况并计数 ,用Giemsa染色观测细胞形态学改变 ,用流式细胞仪检测细胞凋亡百分数。结果 :反义药物对K5 6 2细胞生长有明显抑制作用 ,呈剂量依赖关系 ,并且下调VEGF蛋白的表达 ,反义药物对K5 6 2细胞的凋亡无影响。结论 :VEGF反义药物抑制K5 6 2细胞生长的机理是抑制细胞增殖 ,而不是促进细胞凋亡 ,内源性VEGF蛋白具有促进K5 6 展开更多
关键词 血管内皮生长因子 K562细胞 寡核苷酸类 反义 细胞凋亡
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MicroRNA在白血病中的研究新进展 被引量:2
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作者 何冬梅 吴红 +1 位作者 高杨军 胡小毛 《暨南大学学报(自然科学与医学版)》 CAS CSCD 北大核心 2011年第4期362-368,共7页
微小RNA(microRNA,miRNA)是在真核生物中发现的一类内源性非编码RNA,其长度为21~25个核苷酸大小。miRNA在基因表达调控中发挥了重要作用。miRNA不仅在白血病中存在明显的表达失调,而且与白血病的诊断和预后有关。本文着重综述了白血病... 微小RNA(microRNA,miRNA)是在真核生物中发现的一类内源性非编码RNA,其长度为21~25个核苷酸大小。miRNA在基因表达调控中发挥了重要作用。miRNA不仅在白血病中存在明显的表达失调,而且与白血病的诊断和预后有关。本文着重综述了白血病中急性髓系白血病(AML),急性淋巴细胞性白血病(ALL)和慢性淋巴细胞性白血病(CLL)相关的miRNA的研究新进展。 展开更多
关键词 MIRNA 基因表达 基因调控 白血病
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非霍奇金淋巴瘤中hTERT、P53、PCNA免疫组织化学研究 被引量:2
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作者 何冬梅 张洹 +1 位作者 谭广销 刘革修 《暨南大学学报(自然科学与医学版)》 CAS CSCD 北大核心 2005年第4期465-469,共5页
目的:探讨人类端粒酶逆转录酶(hTERT)、P53、增殖细胞核抗原(PCNA)在非霍奇金淋巴瘤(NHL)组织及正常淋巴组织中的表达及其相互关系。方法:取自手术切除经病理证实为NHL组织标本35例,采用免疫组化法检测hTERT、P53、PCNA的表达,并取正常... 目的:探讨人类端粒酶逆转录酶(hTERT)、P53、增殖细胞核抗原(PCNA)在非霍奇金淋巴瘤(NHL)组织及正常淋巴组织中的表达及其相互关系。方法:取自手术切除经病理证实为NHL组织标本35例,采用免疫组化法检测hTERT、P53、PCNA的表达,并取正常淋巴结组织15例作对照。结果:NHL组织中hTERT、P53、PCNA阳性率分别为71%(25/35)、43%(15/35)和86%(30/35)。正常淋巴结组织依次为27%(4/15)、0%(0/15)和32%(6/15),NHL组hTERT、P53、PCNA阳性率明显高于正常淋巴结组(P<0.05)。NHL组hTERT、P53、PCNA在恶性程度高的组织中表达分别为100%、69%、100%,在恶性程度低的组织中分别为68%、21%、74%,P<0.05。35例NHL组织hTERT与PCNA两者表达一致者(均阳性)25例,两基因表达有相关性,P<0.05。结论:hTERT、P53、PCNA的表达率在非霍奇金淋巴瘤组织中显著高于正常淋巴结组织,并与病理分级之间有正相关性,hTERT与PCNA表达呈正相关。 展开更多
关键词 非霍奇金淋巴瘤 端粒酶逆转录酶 P53 增殖细胞核抗原
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