远志皂苷元对新生大鼠皮质神经元的营养作用 被引量：13

1

作者 皮婷 薛小燕 +3 位作者 林炼峰 苏钜年 程欣 罗焕敏 《中国药理学与毒理学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2011年第1期40-44,共5页

目的研究远志皂苷元(senegenin)对新生大鼠皮质神经元的神经营养作用。方法原代培养新生24 h内SD大鼠皮质神经元,采用0.4%B27+DMEM/F12培养基制备营养缺乏模型。远志皂苷元0.5,1和2μmol.L-1及阳性对照组碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)10... 目的研究远志皂苷元(senegenin)对新生大鼠皮质神经元的神经营养作用。方法原代培养新生24 h内SD大鼠皮质神经元,采用0.4%B27+DMEM/F12培养基制备营养缺乏模型。远志皂苷元0.5,1和2μmol.L-1及阳性对照组碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)10μg.L-1。倒置显微镜下观察各组皮质神经元的形态及平均突起生长情况;免疫荧光染色法观察远志皂苷元的营养作用,检测神经元平均突起长度;另外在营养缺乏培养条件下,通过MTT法检测神经元的存活情况。结果分别加入药物作用3d后,远志皂苷元0.5,1及2μmol.L-1均可以促进神经元突起生长,从溶媒对照组(152±46)μm分别增加至186±51,188±34及(193±43)μm,其中远志皂苷元2μmol.L-1最为显著(P<0.01),稍弱于bFGF组(203±40)μm。营养缺乏培养条件下细胞存活率显著下降,从正常培养条件下(100.0±5.4)%降至(90.8±4.6)%(P<0.01)。远志皂苷元0.5,1及2μmol.L-1可明显改善营养缺乏引起的细胞死亡,细胞存活率分别为(109.7±3.2)%,(111.3±1.6)%及(112.9±4.8)%,且有一定的浓度依赖性(r=0.784,P<0.01)。结论远志皂苷元可以促进神经元的存活,并可促进皮质神经元突起生长,具有神经营养作用。 展开更多

关键词 远志皂苷元 皮质神经元 神经营养因子 突起生长

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丹参酮ⅡA对低分化鼻咽癌细胞氯通道的激活作用 被引量：8

2

作者 李媛 刘善文 +6 位作者 李华荣 马文波 潘廷才 朱林燕 叶文才 王立伟 陈丽新 《中国药理学通报》 CAS CSCD 北大核心 2011年第9期1205-1209,共5页

目的研究丹参酮ⅡA对低分化鼻咽癌细胞(CNE-2Z)氯通道的激活作用并分析该通道的生理学和药理学特性。方法采用膜片钳全细胞记录技术记录丹参酮ⅡA激活的CNE-2Z细胞氯电流,细胞外高张刺激或灌流氯离子通道阻断剂,观察并分析电流的特性。... 目的研究丹参酮ⅡA对低分化鼻咽癌细胞(CNE-2Z)氯通道的激活作用并分析该通道的生理学和药理学特性。方法采用膜片钳全细胞记录技术记录丹参酮ⅡA激活的CNE-2Z细胞氯电流,细胞外高张刺激或灌流氯离子通道阻断剂,观察并分析电流的特性。结果细胞外灌流1nmol.L-1的丹参酮ⅡA激活CNE-2Z细胞产生一个具有明显外向优势的电流,该电流没有明显的电压依赖性和时间依赖性的失活,电流的翻转电位为(-5.9±0.2)mV,接近氯离子平衡电位。渗透性容积缩小可以完全抑制该电流,氯通道阻断剂NPPB可以部分抑制该电流。结论丹参酮ⅡA激活鼻咽癌细胞膜上的氯通道,诱导氯电流,该电流具有容积敏感性。 展开更多

关键词 中药药理 丹参酮ⅡA 氯通道 鼻咽肿瘤 氯通道阻 断剂 膜片钳技术

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黄芪甲苷拮抗马兜铃酸Ⅰ所致的急性肾小管损伤 被引量：17

3

作者 马莲顺 肖植涛 +7 位作者 叶杰成 刘梅 郑广娟 李楚天 陆伟标 陈德臻 杨海峰 朱林燕 《中国病理生理杂志》 CAS CSCD 北大核心 2012年第11期1966-1970,共5页

目的:观察黄芪甲苷对马兜铃酸Ⅰ所致的急性肾小管损伤的影响。方法:(1)体外实验:四甲基偶氮唑盐(MTT)法观察黄芪甲苷对马兜铃酸Ⅰ所致人近曲小管上皮细胞(HK-2)存活率降低的拮抗作用;(2)动物体内实验:马兜铃酸Ⅰ腹腔注射6 d建立昆明小... 目的:观察黄芪甲苷对马兜铃酸Ⅰ所致的急性肾小管损伤的影响。方法:(1)体外实验:四甲基偶氮唑盐(MTT)法观察黄芪甲苷对马兜铃酸Ⅰ所致人近曲小管上皮细胞(HK-2)存活率降低的拮抗作用;(2)动物体内实验:马兜铃酸Ⅰ腹腔注射6 d建立昆明小鼠急性肾损伤模型,同时用50 mg.kg-1.d-1黄芪甲苷灌胃进行干预治疗。7 d后检测尿蛋白、尿γ-谷氨酰转移酶(γ-GT)、血清肌酐(SCr)、血尿素氮(BUN)水平的变化和肾脏组织形态学变化。结果:(1)黄芪甲苷能增加马兜铃酸Ⅰ处理的HK-2细胞存活率,并呈剂量依赖趋势;(2)黄芪甲苷干预组小鼠尿蛋白、尿γ-GT、SCr、和BUN的水平均低于马兜铃酸肾损伤组;近曲小管坏死和裸基底膜面积也较马兜铃酸肾损伤组明显改善。结论:黄芪甲苷可以拮抗马兜铃酸Ⅰ诱导的急性肾小管损伤。 展开更多

关键词 马兜铃酸Ⅰ 黄芪甲苷 急性肾损伤 小鼠

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DSF-Cu通过影响线粒体功能和细胞骨架诱导鼻咽癌CNE-2Z细胞凋亡 被引量：7

4

作者 杨亚萍 汪亚帷 +7 位作者 李梦佳 张可凡 孙晓雪 梁志红 陈丽新 王立伟 杨海峰 朱林燕 《中国药理学通报》 CAS CSCD 北大核心 2016年第9期1208-1217,共10页

目的探测双硫仑(disulfiram,DSF)螯合氯化铜(DSF-Cu)通过影响线粒体功能和细胞骨架诱导人低分化鼻咽癌CNE-2Z细胞凋亡。方法采用流式细胞术检测细胞周期、凋亡率、活性氧(reactive oxygen species,ROS)的生成以及线粒体膜电位(mitochond... 目的探测双硫仑(disulfiram,DSF)螯合氯化铜(DSF-Cu)通过影响线粒体功能和细胞骨架诱导人低分化鼻咽癌CNE-2Z细胞凋亡。方法采用流式细胞术检测细胞周期、凋亡率、活性氧(reactive oxygen species,ROS)的生成以及线粒体膜电位(mitochondrial membrane potential,MMP)的改变。AFM探测细胞表面形貌和超微结构、细胞高度、宽度及粗糙度的变化。激光扫描共聚焦显微镜(laser scanning confocal microscope,LSCM)观察细胞骨架F-actin的分布和重组。结果细胞周期检测显示DSF-Cu将CNE-2Z细胞周期阻滞于G2/M期。Annexin-V/PI检测细胞凋亡显示随药物浓度增加,与对照组相比,实验组早凋率和晚凋率、坏死率细胞均明显增加。进一步检测凋亡相关信号发现DSF-Cu可促进CNE-2Z细胞内活性氧水平的增加及诱导MMP下降。AFM成像表明,与对照组相比,随着药物浓度增大,细胞逐渐变小,胞质浓缩,高度增加,膜表面粗糙度降低,变得平整光滑;细胞伪足由对照组的丰富密集,逐渐变短、萎缩,甚至完全破坏。LSCM进一步观察发现DSF-Cu引起F-actin荧光强度减弱,结构重排,严重影响微丝的功能。结论 DSF-Cu可诱导CNE-2Z细胞依赖线粒体的凋亡途径,利用AFM在单细胞水平上分析DSF-Cu对细胞膜的毒性作用,为鼻咽癌的治疗提供新的思路。 展开更多

关键词 双硫仑 原子力显微镜 细胞骨架 活性氧 凋亡 鼻咽癌 线粒体膜电位

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儿童膀胱副神经节瘤1例 被引量：7

5

作者 杨海峰 朱林燕 +4 位作者 王智园 石灵春 李伟平 李楚天 何青莲 《临床与实验病理学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2010年第1期117-118,共2页

关键词 膀胱肿瘤 副神经节瘤 儿童 嗜铬细胞瘤 病例报道

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茶氨酸对小鼠学习记忆能力的影响 被引量：32

6

作者 林雪玲 程朝辉 +1 位作者 黄才欢 李炎 《食品科学》 EI CAS CSCD 北大核心 2004年第5期171-173,共3页

采用跳台法及复杂水迷宫法,观察茶氨酸对小鼠学习记忆能力的影响。结果表明,一定剂量的茶氨酸可缩短正常小鼠在复杂水迷宫内抵达终点的时间,减少错误次数;可延长记忆获得障碍小鼠在跳台中首次错误的出现时间,减少错误次数。结论:茶氨酸... 采用跳台法及复杂水迷宫法,观察茶氨酸对小鼠学习记忆能力的影响。结果表明,一定剂量的茶氨酸可缩短正常小鼠在复杂水迷宫内抵达终点的时间,减少错误次数;可延长记忆获得障碍小鼠在跳台中首次错误的出现时间,减少错误次数。结论:茶氨酸具有提高学习和记忆能力的功能。 展开更多

关键词 跳台法 复杂水迷宫法 茶氨酸 学习记忆能力 动物实验 保健功能

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大黄素甲醚对体外新生大鼠皮质神经元的营养作用 被引量：8

7

作者 苏钜年 赖永长 +3 位作者 皮婷 薛小燕 林炼峰 罗焕敏 《中成药》 CAS CSCD 北大核心 2011年第10期1790-1793,共4页

目的研究大黄素甲醚对新生大鼠皮质神经元的神经营养作用。方法体外以0.4%B27+DMEM/F12培养出生24h内的大鼠皮层神经元。采用NSE免疫细胞化学染色法进行神经元鉴定。分为溶媒对照组,大黄素甲醚(0.5、1、2、4μmol/L)组和碱性成纤维细胞... 目的研究大黄素甲醚对新生大鼠皮质神经元的神经营养作用。方法体外以0.4%B27+DMEM/F12培养出生24h内的大鼠皮层神经元。采用NSE免疫细胞化学染色法进行神经元鉴定。分为溶媒对照组,大黄素甲醚(0.5、1、2、4μmol/L)组和碱性成纤维细胞生长因子bFGF(10 ng/mL)组。显微镜观察各组皮质神经元的形态,利用软件统计神经元平均突起长度;MTT法检测神经元的存活情况;RT-PCR检测MAP-2表达量。加入Trk受体抑制剂或腺苷受体抑制剂单独作用或与大黄素甲醚相互作用,检测突起长度变化。结果与溶媒对照组相比,培养3d后的大黄素甲醚1、2、4μmol/L剂量组均可延长神经元的存活时间,促进神经元突起生长,增加MAP-2 mRNA的表达量。加入Trk受体抑制剂能抑制大黄素甲醚对神经元的影响,而加入腺苷受体抑制剂则无影响。结论大黄素甲醚对新生大鼠皮层神经元具有神经营养作用。 展开更多

关键词 大黄素甲醚 皮质神经元 神经营养 突起生长

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ClC-3 siRNA抑制鼻咽癌细胞调节性容积回缩 被引量：4

8

作者 叶东 张海峰 +2 位作者 朱林燕 王立伟 陈丽新 《南方医科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2011年第2期216-220,共5页

目的用siRNA沉默ClC-3氯通道,探讨ClC-3氯通道在鼻咽癌CNE-2Z细胞调节性容积回缩(regulatory volumedecrease,RVD)中的作用。方法使用终浓度100 nmol/L的ClC-3 siRNA转染鼻咽癌CNE-2Z细胞,流式细胞术检测siRNA的转染率,Western blottin... 目的用siRNA沉默ClC-3氯通道,探讨ClC-3氯通道在鼻咽癌CNE-2Z细胞调节性容积回缩(regulatory volumedecrease,RVD)中的作用。方法使用终浓度100 nmol/L的ClC-3 siRNA转染鼻咽癌CNE-2Z细胞,流式细胞术检测siRNA的转染率,Western blotting检测ClC-3蛋白表达,活细胞图像系统分析对照组和ClC-3 siRNA组细胞在低渗(160mOsm/L)刺激时的容积调节能力。结果 ClC-3 siRNA转染率为(63.8±3.8)%(n=3,P<0.01),与对照组相比,ClC-3氯通道蛋白的表达减少(60.9±4.0)%(n=3,P<0.01)。对照组细胞的RVD为(42.6±2.8)%(n=20),ClC-3 siRNA组细胞在低渗液中的最大容积与对照组没有显著性差异,但RVD仅为(10.5±4.8)%,RVD抑制率达75.4%(P<0.01)。结论 ClC-3 siRNA成功转染鼻咽癌CNE-2Z细胞,特异性抑制ClC-3蛋白表达,显著降低细胞RVD能力,提示ClC-3氯通道在鼻咽癌细胞调节性容积回缩中起重要作用。 展开更多

关键词 ClC-3氯通道 SIRNA 鼻咽癌细胞 细胞容积

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红花注射液对脂多糖诱导的兔弥散性血管内凝血的作用 被引量：3

9

作者 朱玮玮 李梦佳 +4 位作者 马莲顺 刘梅 林熙 朱林燕 肖飞 《中国病理生理杂志》 CAS CSCD 北大核心 2013年第8期1481-1486,共6页

目的:研究红花注射液对脂多糖(LPS)诱导的兔弥散性血管内凝血(DIC)的作用。方法:兔耳缘静脉持续滴注LPS建立兔DIC模型。采用全自动凝血分析仪检测活化部分凝血活酶时间(APTT)和凝血酶原时间(PT);凝固法测定纤维蛋白原含量;全自动血细胞... 目的:研究红花注射液对脂多糖(LPS)诱导的兔弥散性血管内凝血(DIC)的作用。方法:兔耳缘静脉持续滴注LPS建立兔DIC模型。采用全自动凝血分析仪检测活化部分凝血活酶时间(APTT)和凝血酶原时间(PT);凝固法测定纤维蛋白原含量;全自动血细胞分析仪进行血小板计数;发色底物法测定蛋白C及抗凝血酶Ⅲ的活性;全自动血浆分析仪测定丙氨酸氨基转移酶(ALT)和血尿素氮(BUN);ELISA法检测血浆纤维蛋白(原)降解产物(FDP)和肿瘤坏死因子α(TNF-α)含量。结果:DIC模型组APTT和PT进行性延长,ALT活性和BUN含量显著升高,蛋白C和抗凝血酶Ⅲ的活性显著降低,血小板计数进行性减少,血浆FDP和TNF-α含量显著升高。给予红花注射液后,DIC模型兔APTT和PT的延长明显缩短,血小板计数、纤维蛋白原含量、蛋白C及抗凝血酶Ⅲ活性均明显恢复,血浆ALT、BUN、FDP和TNF-α水平均明显降低。结论:红花注射液对LPS诱导的兔DIC有较好的拮抗作用。 展开更多

关键词 红花注射液 脂多糖类 肝素 弥散性血管内凝血 血小板

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冰片对鼻咽癌细胞容积敏感性氯通道的激活作用 被引量：3

10

作者 孟龙 王海波 +8 位作者 邓志钦 汪源 伍嘉宝 赖周毅 吕瑞玲 孙晓雪 朱林燕 陈丽新 王立伟 《中国药理学通报》 CAS CSCD 北大核心 2014年第12期1671-1676,共6页

目的探讨冰片对低分化鼻咽癌(CNE-2Z)细胞氯通道的激活作用及对细胞容积的影响。方法采用全细胞膜片钳技术记录冰片激活CNE-2Z细胞膜电流,分析其电流特性;用活细胞图像法观察并测量冰片对细胞体积的影响。结果细胞外灌流冰片(20μmol
... 目的探讨冰片对低分化鼻咽癌(CNE-2Z)细胞氯通道的激活作用及对细胞容积的影响。方法采用全细胞膜片钳技术记录冰片激活CNE-2Z细胞膜电流,分析其电流特性;用活细胞图像法观察并测量冰片对细胞体积的影响。结果细胞外灌流冰片(20μmol·L-1)诱导CNE-2Z细胞膜氯通道开放,产生氯电流,该电流有明显外向优势,无电压及时间依赖性失活,其翻转电位接近氯离子平衡电位,该电流可被氯通道阻断剂tamoxifen抑制,细胞外灌流47%高渗溶液完全抑制该电流。细胞外灌流冰片30 min,细胞体积缩小约9.4%,该作用可被tamoxifen完全抑制。结论冰片可以激活低分化鼻咽癌细胞容积敏感性氯通道,导致细胞体积缩小,氯通道在冰片引起细胞体积缩小中起着重要作用。 展开更多

关键词 冰片 氯通道 氯通道阻断剂 癌细胞 膜片钳技术 细胞体积

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大黄素阻抑人乳腺癌MCF-7细胞增殖和细胞周期进程 被引量：6

11

作者 李梦佳 马莲顺 +5 位作者 杨亚萍 朱玮玮 陈丽新 王立伟 朱林燕 杨海峰 《中国病理生理杂志》 CAS CSCD 北大核心 2013年第8期1417-1421,共5页

目的:探讨大黄素抗人乳腺癌MCF-7细胞增殖及其相关机制。方法:采用MTT法检测大黄素对MCF-7细胞的增殖抑制作用;流式细胞术分析周期分布和凋亡情况;原子力显微镜(AFM)观察细胞膜表面超微结构的变化。结果:大黄素呈剂量依赖性地抑制MCF-7... 目的:探讨大黄素抗人乳腺癌MCF-7细胞增殖及其相关机制。方法:采用MTT法检测大黄素对MCF-7细胞的增殖抑制作用;流式细胞术分析周期分布和凋亡情况;原子力显微镜(AFM)观察细胞膜表面超微结构的变化。结果:大黄素呈剂量依赖性地抑制MCF-7细胞的增殖;大黄素能使MCF-7细胞阻滞在G0/G1期;Annexin V/PI双染法结果表明,大黄素对MCF-7细胞没有明显的促凋亡作用。AFM观察细胞膜超微结构,结果显示对照组细胞核区饱满,膜表面平坦光滑;大黄素作用48 h可致细胞核区坍塌萎缩,细胞表面颗粒密集,膜表面的平均粗糙度(Ra)和均方粗糙度(Rq)与对照组相比均有显著增加(P<0.05)。结论:大黄素通过阻断MCF-7细胞的细胞周期进程及影响细胞膜超微结构而发挥抗肿瘤作用。 展开更多

关键词 大黄素 MCF-7细胞 细胞增殖 细胞周期 原子力显微镜

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钩吻总碱对肝癌细胞氯通道的激活作用 被引量：3

12

作者 王海波 孙晓雪 +6 位作者 邓志钦 吕瑞玲 赖周毅 孟龙 朱林燕 陈丽新 王立伟 《中国药理学通报》 CAS CSCD 北大核心 2015年第11期1529-1535,共7页

目的探讨钩吻总碱对肝癌(HepG_2)细胞氯通道的激活作用及对细胞容积的影响。方法活细胞图像法观察记录钩吻总碱作用后HepG_2细胞容积的变化;全细胞膜片钳技术记录钩吻总碱对HepG_2细胞膜电流的作用,通过细胞外灌流高渗液,氯通道阻断剂ta... 目的探讨钩吻总碱对肝癌(HepG_2)细胞氯通道的激活作用及对细胞容积的影响。方法活细胞图像法观察记录钩吻总碱作用后HepG_2细胞容积的变化;全细胞膜片钳技术记录钩吻总碱对HepG_2细胞膜电流的作用,通过细胞外灌流高渗液,氯通道阻断剂tamoxifen和5-硝基-2-(3-苯丙胺)苯甲酸(NPPB)研究电流的生理学及药理学特性。结果细胞外灌流钩吻总碱50min,细胞体积减小(12.48±2.2)%(P<0.01),该现象可被氯通道阻断剂tamoxifen抑制。膜片钳结果显示,细胞外灌流钩吻总碱(2μmol·L^(-1))可激活HepG_2细胞膜氯电流,该电流有明显外向优势,无电压及时间依赖性失活,其翻转电位为(-3.21±0.67)mV,接近氯离子平衡电位(-0.9mV),可被氯通道阻断剂tamoxifen和NPPB抑制,细胞外灌流47%高渗溶液亦可明显抑制该电流。结论钩吻总碱可引起肝癌HepG_2细胞体积缩小,诱导凋亡性容积缩小(AVD)发生,该作用可被氯通道阻断剂明显抑制,提示氯通道可能为钩吻总碱抗癌作用的靶点之一。 展开更多

关键词 钩吻总碱 肝癌细胞 凋亡性容积缩小 膜片钳技术 氯通道 氯通道阻断剂

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氯通道在藤黄酸诱导低分化鼻咽癌细胞凋亡中的作用 被引量：3

13

作者 柏志全 李华荣 +5 位作者 张海峰 刘善文 朱林燕 叶文才 陈丽新 王立伟 《南方医科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2011年第8期1304-1308,共5页

目的探讨氯离子通道在藤黄酸诱导低分化鼻咽癌CNE-2Z细胞凋亡过程中的作用。方法采用MTT比色法检测细胞增殖,Hoechst 33342染色法分析细胞凋亡,全细胞膜片钳技术记录氯电流。结果藤黄酸明显抑制CNE-2Z细胞增殖,其抑制作用呈时间和浓度... 目的探讨氯离子通道在藤黄酸诱导低分化鼻咽癌CNE-2Z细胞凋亡过程中的作用。方法采用MTT比色法检测细胞增殖,Hoechst 33342染色法分析细胞凋亡,全细胞膜片钳技术记录氯电流。结果藤黄酸明显抑制CNE-2Z细胞增殖,其抑制作用呈时间和浓度依赖性,IC50为3.1μmol/L;8μmol/L藤黄酸诱导细胞凋亡作用可被氯离子通道阻断剂NPPB和Tamoxifen抑制。藤黄酸诱发CNE-2Z细胞产生一个有明显外向优势的氯电流,可被NPPB明显抑制。结论藤黄酸可能通过激活氯离子通道而诱导CNE-2Z细胞凋亡和抑制细胞增殖,提示氯通道参与藤黄酸诱导的细胞凋亡。 展开更多

关键词 藤黄酸 鼻咽癌 细胞凋亡 氯离子通道 膜片钳技术

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清开灵注射液对LPS诱导的兔弥散性血管内凝血的作用 被引量：4

14

作者 孙浩 王珣 +1 位作者 柳佳利 林熙 《中国病理生理杂志》 CAS CSCD 北大核心 2012年第5期895-900,共6页

目的:研究清开灵注射液对脂多糖(LPS)诱导的兔弥散性血管内凝血(DIC)的作用。方法:采用耳缘静脉持续滴注LPS的方法建立兔弥散性血管内凝血模型,观察各组动物24 h内各时点生存率;采用全自动凝血分析仪检测活化部分凝血活酶时间(APTT)和... 目的:研究清开灵注射液对脂多糖(LPS)诱导的兔弥散性血管内凝血(DIC)的作用。方法:采用耳缘静脉持续滴注LPS的方法建立兔弥散性血管内凝血模型,观察各组动物24 h内各时点生存率;采用全自动凝血分析仪检测活化部分凝血活酶时间(APTT)和凝血酶原时间(PT);凝固法测定纤维蛋白原含量;全自动血细胞分析仪进行血小板计数;全自动血浆分析仪测定丙氨酸氨基转移酶(ALT)以及血尿素氮(BUN);发色底物法测定蛋白C及抗凝血酶Ⅲ的活性;ELISA法检测血浆肿瘤坏死因子α(TNF-α)含量。结果:兔静脉持续滴注LPS后,APTT和PT显著延长,ALT和BUN显著升高,蛋白C和抗凝血酶Ⅲ的活性明显降低,血小板计数显著减少,血浆TNF-α含量显著升高。给予清开灵注射液后,APTT和PT的延长明显缩短,血小板计数、纤维蛋白原含量、蛋白C及抗凝血酶Ⅲ活性均明显恢复;ALT、BUN以及血浆TNF-α含量明显降低。结论:清开灵注射液对LPS所诱导的兔弥散性血管内凝血有良好的拮抗作用。 展开更多

关键词 清开灵注射液 脂多糖类 弥散性血管内凝血 肿瘤坏死因子

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五步蛇毒纤溶组分FⅨcaⅠ的分离纯化和生物活性的测定 被引量：3

15

作者 杨亚萍 刘涛 +1 位作者 陈家树 林熙 《中国药理学通报》 CAS CSCD 北大核心 2011年第11期1550-1555,共6页

目的从五步蛇(安徽产)毒分离纯化一种具有纤溶活性的组分FⅨcaⅠ,并研究其理化性质和生物活性。方法应用DEAE-Sephadex A-50阴离子交换层析、Sephadex G-75凝胶层析、Chelating Sepharose Fast Flow金属离子螯合亲和层析和Sephadex G-5... 目的从五步蛇(安徽产)毒分离纯化一种具有纤溶活性的组分FⅨcaⅠ,并研究其理化性质和生物活性。方法应用DEAE-Sephadex A-50阴离子交换层析、Sephadex G-75凝胶层析、Chelating Sepharose Fast Flow金属离子螯合亲和层析和Sephadex G-50凝胶层析四步分离纯化目的组分FⅨcaⅠ;纤维蛋白平板法和SDS-PAGE测定FⅨcaⅠ的生物活性;通过小鼠皮下注射不同剂量的FⅨcaⅠ,测量皮下出血斑的面积并求出最小出血剂量。结果从五步蛇毒分离纯化的FⅨcaⅠ组分为单体蛋白,相对分子量23 ku,等电点为4.8。FⅨcaⅠ可降解纤维蛋白和纤维蛋白原,优先降解α链,呈时效、量效关系。蛇毒纤溶酶FⅨcaⅠ最小出血剂量为54.9μg,为非出血性蛇毒纤溶酶。结论从五步蛇(安徽产)毒分离纯化的FⅨcaⅠ是一种分子量较小,比较稳定,纤溶活性强,可直接降解纤维蛋白且非出血性的新蛇毒纤溶酶。 展开更多

关键词 五步蛇 FⅨcaⅠ 蛇毒 纤溶活性 纯化 金属蛋白酶

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沉默ClC-3氯通道基因对HeLa细胞周期分布的影响 被引量：3

16

作者 叶东 邢德刚 +2 位作者 曾志 陈丽新 王立伟 《中国病理生理杂志》 CAS CSCD 北大核心 2017年第2期257-262,共6页

目的:探讨沉默HeLa细胞的ClC-3氯通道基因后细胞周期分布的变化及其作用机制。方法:依照siRNA设计原则构建沉默ClC-3基因的ClC-3 siRNA并转染HeLa细胞;实验分为空白对照组(control组)、转染试剂对照组(Lipo组)、阴性对照组(negative si... 目的:探讨沉默HeLa细胞的ClC-3氯通道基因后细胞周期分布的变化及其作用机制。方法:依照siRNA设计原则构建沉默ClC-3基因的ClC-3 siRNA并转染HeLa细胞;实验分为空白对照组(control组)、转染试剂对照组(Lipo组)、阴性对照组(negative siRNA组)和ClC-3 siRNA组。采用real-time PCR检测ClC-3 siRNA的沉默效率;流式细胞术检测细胞周期分布情况;Western blot检测ClC-3蛋白及相关细胞周期蛋白(cyclin)D1、细胞周期蛋白依赖激酶(cyclin-dependent kinase,CDK)4、CDK6、P21和P27等表达。结果:CIC-3 siRNA成功沉默HeLa细胞的ClC-3基因。和其它组相比,ClC-3 siRNA组的细胞周期被阻抑在G_0/G_1期。CIC-3 siRNA组的cyclin D1、CDK4和CDK6蛋白表达水平明显下降,P21和P27蛋白表达水平明显上升。结论:沉默HeLa细胞ClC-3氯通道基因可影响cyclin D1、CDK4、CDK6、P21和27蛋白的表达水平胆抑HeLa细胞周期停滞在G_0/G_1期。 展开更多

关键词 ClC-3氯通道 HELA细胞 细胞周期 细胞周期蛋白依赖激酶 P21 P27

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ClC-3氯通道蛋白磷酸化及其功能的研究进展 被引量：3

17

作者 柏志全 李华荣 +3 位作者 张海峰 朱林燕 王立伟 陈丽新 《中国病理生理杂志》 CAS CSCD 北大核心 2011年第8期1647-1651,共5页

细胞容积调节广泛参与细胞的各种生理病理过程，如上皮细胞物质转运、物质代谢、细胞兴奋性、激素释放、细胞迁移、细胞增殖及细胞坏死凋亡等。

关键词 ClC-3氯通道 磷酸化 信号转导通路

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氯通道在阿霉素诱导鼻咽癌细胞凋亡中的作用 被引量：2

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作者 刘梅 罗海 +8 位作者 林嘉伟 魏燕 李媛 刘善文 孟龙 邹丽莉 朱林燕 王立伟 陈丽新 《中国药理学通报》 CAS CSCD 北大核心 2015年第9期1249-1253,共5页

目的研究氯离子通道在阿霉素诱导的低分化鼻咽癌CNE-2Z细胞凋亡及凋亡性容积减小中的作用。方法采用全细胞膜片钳技术记录氯电流,流式细胞术检测细胞凋亡,活细胞图像分析法检测细胞容积变化。结果 (1)阿霉素诱导CNE-2Z细胞凋亡;(2)阿霉... 目的研究氯离子通道在阿霉素诱导的低分化鼻咽癌CNE-2Z细胞凋亡及凋亡性容积减小中的作用。方法采用全细胞膜片钳技术记录氯电流,流式细胞术检测细胞凋亡,活细胞图像分析法检测细胞容积变化。结果 (1)阿霉素诱导CNE-2Z细胞凋亡;(2)阿霉素诱导CNE-2Z细胞发生凋亡性容积减小,细胞外灌流阿霉素2 h,细胞容积减小约10%;(3)阿霉素可激活氯通道,产生一个有较明显外向优势的氯电流;(4)氯通道阻断剂5-nitro-2-(3-phenylpropylamino)-benzoate(NPPB)明显抑制阿霉素诱导的凋亡性容积减小、细胞凋亡和氯电流。结论阿霉素可通过激活氯通道而诱导细胞凋亡,氯通道在阿霉素诱导的鼻咽癌细胞凋亡中发挥重要作用。 展开更多

关键词 阿霉素 鼻咽肿瘤 氯通道 膜片钳技术 凋亡 凋亡性容积减小

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乙醇激活的鼻咽癌细胞氯电流的分子机制 被引量：2

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作者 林娜 左婉红 +5 位作者 赖周毅 伍嘉宝 陈美苑 汪源 陈丽新 王立伟 《中国病理生理杂志》 CAS CSCD 北大核心 2014年第7期1179-1183,共5页

目的：研究乙醇对低分化鼻咽癌CNE-2Z细胞氯通道的影响并探讨其分子机制。方法：MTT检测乙醇对细胞生长的影响；全细胞膜片钳技术记录乙醇对氯电流的影响；应用氯通道阻断剂分析该电流的特性；siR-NA干扰技术分析乙醇敏感氯通道的分子... 目的：研究乙醇对低分化鼻咽癌CNE-2Z细胞氯通道的影响并探讨其分子机制。方法：MTT检测乙醇对细胞生长的影响；全细胞膜片钳技术记录乙醇对氯电流的影响；应用氯通道阻断剂分析该电流的特性；siR-NA干扰技术分析乙醇敏感氯通道的分子本质。结果：在等渗灌流液中记录到微弱的背景氯电流，随灌流液中乙醇浓度（0．17～170 mmol/L）的升高，所激活的氯电流呈倒U型曲线状，17 mmol/L的乙醇激活电流达到峰值，电流呈较明显的外向优势，能被高渗液及氯通道阻断剂5-nitro-2-（3-phenylpropylamino）benzoic acid（NPPB）所阻断；干扰ClC-3氯通道基因表达后乙醇激活的氯电流明显减小。结论：乙醇可能通过激活CNE-2Z细胞的ClC-3氯通道，诱导氯电流的产生。 展开更多

关键词 乙醇 鼻咽肿瘤 氯通道 膜片钳术

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细胞外低渗诱导大鼠胚胎心肌细胞H9c2容积激活性氯电流和调节性细胞容积回缩 被引量：2

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作者 刘振锋 厉冰雪 +6 位作者 滕双凤 罗海 林娜 黄维渊 朱林燕 王立伟 陈丽新 《中国病理生理杂志》 CAS CSCD 北大核心 2012年第8期1399-1404,共6页

目的:研究细胞外低渗诱导的大鼠胚胎心肌细胞(H9c2)容积激活性氯电流和调节性容积回缩(regulatory volume decrease,RVD)。方法:采用全细胞膜片钳技术记录低渗激活的H9c2细胞氯电流并分析电流特性;用实时活细胞影像系统拍摄细胞图像,测... 目的:研究细胞外低渗诱导的大鼠胚胎心肌细胞(H9c2)容积激活性氯电流和调节性容积回缩(regulatory volume decrease,RVD)。方法:采用全细胞膜片钳技术记录低渗激活的H9c2细胞氯电流并分析电流特性;用实时活细胞影像系统拍摄细胞图像,测量细胞容积,探讨氯通道在H9c2细胞调节性容积回缩(RVD)过程中的作用。结果:等渗灌流下,可在H9c2细胞记录到一个较小的背景电流。47%低渗液灌流可迅速诱发一个具有外向优势的电流,该电流无明显时间依赖性失活和电压依赖性失活;在+80 mV和-80 mV电压钳制下,细胞的平均电流密度分别为(47.77±3.80)pA/pF和(-33.36±2.80)pA/pF;翻转电位为(-9.02±0.61)mV,接近氯离子的平衡电位(-0.9 mV)。高渗灌流液可以完全抑制该电流。此外,该电流可被氯通道阻断剂他莫昔芬、5-硝基-2-(3-苯丙胺)苯甲酸(NPPB)和ATP不同程度抑制。同时,细胞外灌流47%低渗液可诱发H9c2细胞产生RVD,100μmol/L的NPPB几乎完全抑制低渗诱发的RVD。结论:细胞外低渗刺激可以诱导H9c2细胞容积激活性氯电流和RVD。容积激活性氯通道在H9c2细胞RVD中起重要作用。 展开更多

关键词 H9C2细胞 氯通道 膜片钳术 容积调节

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