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中华鳖对温和气单胞菌体液免疫应答规律的研究 被引量:13
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作者 沈锦玉 张志育 +2 位作者 钱冬 刘问 尹文林 《水生生物学报》 CAS CSCD 北大核心 2003年第1期27-30,共4页
从健康中华鳖血清中提取抗体并用Sephadex及DEAE 5 2进行了纯化 ,再免疫新西兰白兔制备兔抗鳖抗体的抗血清 ,纯化后以辣根过氧化物酶 (HRP)标记酶标复合物 ,方阵滴定法确定酶标复合物的最适稀释度为 1/ 32 0 0。用温和气单胞菌TL970 42 ... 从健康中华鳖血清中提取抗体并用Sephadex及DEAE 5 2进行了纯化 ,再免疫新西兰白兔制备兔抗鳖抗体的抗血清 ,纯化后以辣根过氧化物酶 (HRP)标记酶标复合物 ,方阵滴定法确定酶标复合物的最适稀释度为 1/ 32 0 0。用温和气单胞菌TL970 42 4株制成铝胶佐剂灭活苗免疫健康中华鳖 ,经一次免疫和二次免疫后 ,分别在不同时间采集血清 ,用ELISA法测定血清抗体变化规律 ,结果表明中华鳖对该菌苗产生良好的体液免疫应答 ,免疫后 2 0d抗体水平达到高峰 ,在测定期间内二次免疫组的抗体水平高于一次免疫组 ,表明中华鳖存在着二次免疫应答 ,但与哺乳类相比 ,中华鳖的二次应答则相对较弱。免疫后 90d对一次免疫组的鳖进行了攻毒试验 ,10d后免疫鳖 10 0 %存活 ,而非免疫对照组鳖则 10 0 %死亡 ,表明温和气单胞菌TL970 42 4株灭活苗免疫效果良好。 展开更多
关键词 灭活苗 中华鳖 温和气单胞菌 体液免疫应答规律
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抗阿莫西林单克隆抗体的制备、纯化与鉴定 被引量:2
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作者 王金花 刘晨 +1 位作者 卢晓宇 云环 《细胞与分子免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2009年第8期743-744,共2页
目的:制备抗阿莫西林小鼠单克隆抗体(mAb),并初步鉴定其特性,为快速检测动物原性食品中残留的阿莫西林提供基础。方法:将小分子的阿莫西林交联在大分子载体牛血清白蛋白(BSA)和匙孔嘁血蓝蛋白(KLH)上,KLH交联物用于免疫BALB/c小鼠,采用... 目的:制备抗阿莫西林小鼠单克隆抗体(mAb),并初步鉴定其特性,为快速检测动物原性食品中残留的阿莫西林提供基础。方法:将小分子的阿莫西林交联在大分子载体牛血清白蛋白(BSA)和匙孔嘁血蓝蛋白(KLH)上,KLH交联物用于免疫BALB/c小鼠,采用B细胞杂交瘤技术,通过融合,筛选制备抗阿莫西林mAb,并通过ELISA方法测定抗体亲和力,检测单抗与氨苄西林和头孢唑啉的交叉反应。结果:通过ELISA筛选出5株可以稳定分泌特异性抗体的杂交瘤细胞株,其亚型4株为IgG1/κ,1株为IgG2a/κ。亲和力在2.1×109~4.7×109。这5株mAb与氨苄西林的交叉反应为100%,与头孢唑啉没有交叉反应。结论:获得5株特异性好、亲和力高、能稳定分泌抗阿莫西林抗体的杂交瘤细胞株,同时因为与氨苄西林的交叉反应为100%,这使得进一步研发动物源性食品中阿莫西林和氨苄西林残留的免疫检测技术和产品成为可能。 展开更多
关键词 阿莫西林 杂交瘤 单克隆抗体
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酶联免疫法检测PAF受体RNA的聚合酶链反应产物
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作者 姚新生 孙万邦 +1 位作者 蒋汉文 邹桂平 《中国免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2003年第6期415-417,共3页
目的 :建立PCR ELISA法检测PAF受体RNA。方法 :提取 2 0例银屑病病人和 2 0例正常对照组血液单个核细胞标本中的总RNA ,用双标记的PAF R(Biotion与Digoxin标记 )及 β actin(Biotin与Fluorescein标记 )引物进行PT PCR ,用ELISA检测PCR产... 目的 :建立PCR ELISA法检测PAF受体RNA。方法 :提取 2 0例银屑病病人和 2 0例正常对照组血液单个核细胞标本中的总RNA ,用双标记的PAF R(Biotion与Digoxin标记 )及 β actin(Biotin与Fluorescein标记 )引物进行PT PCR ,用ELISA检测PCR产物 ,用传统的琼脂糖凝胶电泳对照。结果 :ELISA法和琼脂糖凝胶电泳法对 β actin检测结果均为阳性 ;ELISA法检测PAF R ,2 0例病人标本均为阳性 ,2 0例对照组 16例阳性 ;琼脂糖凝胶电泳法检测PAF R ,2 0例病人标本 18例阳性 ,2 0例对照组 16例阳性。结论 :PCR ELISA引物双标记法检测PAF R操作简单 ,有较高的敏感性。 展开更多
关键词 酶联免疫法 检测 PAF受体 RNA 聚合酶链反应 银屑病
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