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题名光滑念珠菌磷酸吡哆醇氧化酶的定向进化改造
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作者
王美玲
陈宇娴
郑晓音
卢蓓丝
杨欣伟
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机构
工业微生物发酵技术国家地方联合工程研究中心/福建师范大学生命科学学院
晋江市实验中学
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出处
《福建农业科技》
2024年第12期1-6,共6页
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基金
福建省自然科学基金面上项目(2021J01170)。
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文摘
磷酸吡哆醇氧化酶(pyridoxine 5'-phosphate oxidase,PdxH)是磷酸吡哆醛(Pyridoxal-5'-phosphate,PLP)生物合成途径的限速酶,是影响PLP高效合成的关键。以来源于光滑念珠菌Nakaseomyces bracarensis中的PdxH(NbPdxH)为研究对象,通过定向进化和高通量筛选对NbPdxH进行改造,以提高酶的催化活性。结果表明:通过筛选成功获得1株催化效率提高的突变株pRB1s-NbpdxHM8/BW25113,使得PLP产量达到5.3 g·L^(−1),PNP转化率为71%,与原始菌株相比提高了27%。通过结构分析,推测NbPdxHM8活性位点附近的电荷发生改变,进而提高酶与底物的结合效率。研究结果为PLP的高效合成提供了新的思路。
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关键词
磷酸吡哆醛
磷酸吡哆醇氧化酶
定向进化
高通量筛选
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Keywords
PLP
PdxH
Directed evolution
High-throughput screening
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分类号
R446.5
[医药卫生—诊断学]
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