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白血病细胞源外泌体的作用研究进展
被引量：
4
1
作者
张娟娟
李瑞玮
+2 位作者
贺继刚
欧阳红梅
撒亚莲
《中国病理生理杂志》
CAS
CSCD
北大核心
2017年第12期2287-2292,共6页
白血病（leukemia）是一类造血干/祖细胞恶性克隆性疾病。外泌体是活细胞分泌到胞外的一种纳米级的微囊泡,是细胞间对话的信息和物质载体^（[1]）。外泌体携带亲本细胞来源的蛋白质、核酸（mRNA、microRNA和DNA等）及脂质等生物信息分子...
白血病（leukemia）是一类造血干/祖细胞恶性克隆性疾病。外泌体是活细胞分泌到胞外的一种纳米级的微囊泡,是细胞间对话的信息和物质载体^（[1]）。外泌体携带亲本细胞来源的蛋白质、核酸（mRNA、microRNA和DNA等）及脂质等生物信息分子,可近距离和/或经体液流动远距离、特异性调控靶细胞的生理和病理活动^（[2-3]）。靶细胞摄取外泌体的途径主要有网格蛋白介导的内吞途径、
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关键词
白血病细胞
外泌体
生物学功能
分子机制
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职称材料
构建基于CRISPR/Cas9技术敲除ALOX5的质粒
2
作者
梅芬
李瑞玮
+4 位作者
张娟娟
左荣霞
邹云莲
沈涛
撒亚莲
《生物技术通报》
CAS
CSCD
北大核心
2020年第3期110-114,共5页
旨在利用CRISPR/Cas9技术构建敲除花生四烯5-脂氧合酶基因(Arachidonate 5-lipoxygenase gene,ALOX5)的重组质粒。设计合成3对靶向敲除ALOX5第六外显子的sgRNA,将其分别插入到CRISPR/Cas9质粒骨架pX458载体中,转化感受态大肠杆菌DH5α...
旨在利用CRISPR/Cas9技术构建敲除花生四烯5-脂氧合酶基因(Arachidonate 5-lipoxygenase gene,ALOX5)的重组质粒。设计合成3对靶向敲除ALOX5第六外显子的sgRNA,将其分别插入到CRISPR/Cas9质粒骨架pX458载体中,转化感受态大肠杆菌DH5α后挑取克隆,通过测序评估重组质粒是否构建成功。将构建好的重组质粒转染293T细胞,在荧光显微镜下观察转染效果,挑取转染成功的细胞,用试剂盒提取转染细胞基因组DNA,PCR扩增含敲除位点的DNA片段,用测序技术获得核苷酸序列,用DNAStar软件分析转染细胞中ALOX5基因敲除情况。测序结果表明2对双链sgRNA寡核苷酸已插入质粒,且序列正确,靶向ALOX5基因的重组质粒pX458-sgRNAs-ALOX5构建成功。其在293T细胞中的转染效率约为50%,用一代测序法未检测到sgRNAs的切割效果。初步表明利用CRISPR/Cas9技术成功构建靶向ALOX5基因的重组质粒pX458-sgRNAs-ALOX5。
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关键词
ALOX5
CRISPR/Cas9
基因敲除
构建
质粒
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职称材料
题名
白血病细胞源外泌体的作用研究进展
被引量：
4
1
作者
张娟娟
李瑞玮
贺继刚
欧阳红梅
撒亚莲
机构
昆明理工大学附属医院云南省第一人民医院临床基础医学研究所云南省出生缺陷与遗传病研究重点实验室
云南省第一人民医院
心脏大血管外科
云南省第一人民医院
临床
检验中心
出处
《中国病理生理杂志》
CAS
CSCD
北大核心
2017年第12期2287-2292,共6页
基金
国家自然科学基金资助项目(No.31460298
No.81460073)
+2 种基金
云南省科技厅-昆明医科大学联合专项应用基础研究项目(No.2014FB092
No.2014FB099)
云南省卫生厅内设机构资助项目(No.2017NS228)
文摘
白血病（leukemia）是一类造血干/祖细胞恶性克隆性疾病。外泌体是活细胞分泌到胞外的一种纳米级的微囊泡,是细胞间对话的信息和物质载体^（[1]）。外泌体携带亲本细胞来源的蛋白质、核酸（mRNA、microRNA和DNA等）及脂质等生物信息分子,可近距离和/或经体液流动远距离、特异性调控靶细胞的生理和病理活动^（[2-3]）。靶细胞摄取外泌体的途径主要有网格蛋白介导的内吞途径、
关键词
白血病细胞
外泌体
生物学功能
分子机制
Keywords
Leukemia cells
Exosomes
Biological functions
Molecular mechanism
分类号
R0 [医药卫生]
R363 [医药卫生—病理学]
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职称材料
题名
构建基于CRISPR/Cas9技术敲除ALOX5的质粒
2
作者
梅芬
李瑞玮
张娟娟
左荣霞
邹云莲
沈涛
撒亚莲
机构
昆明理工大学附属医院云南省第一人民医院临床基础医学研究所云南省出生缺陷与遗传病研究重点实验室
云南省
临床
病毒学
重点
实验室
华中科技
大学
同济
医学
院生殖
医学
中心(武汉同济生殖
医学
专科
医院
)
云南省
第三
人民医院
生殖
遗传
科
出处
《生物技术通报》
CAS
CSCD
北大核心
2020年第3期110-114,共5页
基金
国家自然科学基金项目(31460298)
云南省卫生厅内设机构资助项目(2016NS225)
云南省科技厅-昆医联合专项(2015FB102)
文摘
旨在利用CRISPR/Cas9技术构建敲除花生四烯5-脂氧合酶基因(Arachidonate 5-lipoxygenase gene,ALOX5)的重组质粒。设计合成3对靶向敲除ALOX5第六外显子的sgRNA,将其分别插入到CRISPR/Cas9质粒骨架pX458载体中,转化感受态大肠杆菌DH5α后挑取克隆,通过测序评估重组质粒是否构建成功。将构建好的重组质粒转染293T细胞,在荧光显微镜下观察转染效果,挑取转染成功的细胞,用试剂盒提取转染细胞基因组DNA,PCR扩增含敲除位点的DNA片段,用测序技术获得核苷酸序列,用DNAStar软件分析转染细胞中ALOX5基因敲除情况。测序结果表明2对双链sgRNA寡核苷酸已插入质粒,且序列正确,靶向ALOX5基因的重组质粒pX458-sgRNAs-ALOX5构建成功。其在293T细胞中的转染效率约为50%,用一代测序法未检测到sgRNAs的切割效果。初步表明利用CRISPR/Cas9技术成功构建靶向ALOX5基因的重组质粒pX458-sgRNAs-ALOX5。
关键词
ALOX5
CRISPR/Cas9
基因敲除
构建
质粒
Keywords
ALOX5
CRISPR/Cas9
gene knock out
construction
plasmids
分类号
R733.7 [医药卫生—肿瘤]
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职称材料
题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
白血病细胞源外泌体的作用研究进展
张娟娟
李瑞玮
贺继刚
欧阳红梅
撒亚莲
《中国病理生理杂志》
CAS
CSCD
北大核心
2017
4
在线阅读
下载PDF
职称材料
2
构建基于CRISPR/Cas9技术敲除ALOX5的质粒
梅芬
李瑞玮
张娟娟
左荣霞
邹云莲
沈涛
撒亚莲
《生物技术通报》
CAS
CSCD
北大核心
2020
0
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职称材料
已选择
0
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