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用于通路(Gateway)克隆技术的植物表达载体研究进展 被引量：6
1
作者 肖素勤 孙振 +1 位作者 轩秀霞 陈丽梅 《植物科学学报》 CAS CSCD 北大核心 2012年第5期528-544,共17页
通路(Gateway)克隆技术是根据λ噬菌体基因组和大肠杆菌基因组之间的位点专一性重组分子机制开发的一套分子克隆新技术。利用该技术LR反应构建目的基因的表达载体时不需要经过酶切和连接等繁琐而又费时的过程,因此,可以节省很多时间。... 通路(Gateway)克隆技术是根据λ噬菌体基因组和大肠杆菌基因组之间的位点专一性重组分子机制开发的一套分子克隆新技术。利用该技术LR反应构建目的基因的表达载体时不需要经过酶切和连接等繁琐而又费时的过程,因此,可以节省很多时间。为了扩大Gateway技术在植物基因工程领域的应用,最近有很多研究机构和研究小组开发了能用于组成型或诱导型表达目的基因、基因沉默、启动子分析、蛋白质亚细胞定位、蛋白质/蛋白质相互作用、多个DNA片段的模块化组装和DNA组片段功能验证等研究用的植物表达载体。该文对这些技术的研究进展进行了综述。 展开更多
关键词 通路克隆技术 植物表达载体 载体结构 LR反应 重组位点
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洋桔梗离体快繁技术研究 被引量：7
2
作者 龚明霞 陈小凤 +3 位作者 陈丽梅 罗坤 李昆志 方锋学 《安徽农业科学》 CAS 北大核心 2008年第29期12582-12584,12586,共4页
[目的]建立洋桔梗高效的快速繁殖体系,为工厂化生产提供可行的操作程序。[方法]以国外进口的洋桔梗F1代种子(品种名称为Polestar yellow)无菌苗的叶片为外植体,对不定芽的诱导、单芽增殖、无菌苗生根等进行了研究。[结果]结果表明:6-BA... [目的]建立洋桔梗高效的快速繁殖体系,为工厂化生产提供可行的操作程序。[方法]以国外进口的洋桔梗F1代种子(品种名称为Polestar yellow)无菌苗的叶片为外植体,对不定芽的诱导、单芽增殖、无菌苗生根等进行了研究。[结果]结果表明:6-BA和IBA组合对洋桔梗叶片不定芽的诱导效果较6-BA和NAA组合好,叶片最佳的分化培养基为MS+6-BA0.6 mg/L+IBA0.04 mg/L,1个月内正常芽平均分化数为8.3;最佳的单芽增殖培养基为MS+6-BA0.8 mg/L+NAA0.04 mg/L,1个月内正常芽的增殖倍数为7.4;无菌苗在含有IBA0.25 mg/L的1/2 MS培养基上,生根率、平均每苗的根数均最大。[结论]该结果为洋桔梗的工厂化生产奠定了基础。 展开更多
关键词 洋桔梗 种子 叶片 离体培养
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微生物甲醛脱氢酶的研究进展 被引量：4
3
作者 张婧 年洪娟 陈丽梅 《生物技术通报》 CAS CSCD 北大核心 2010年第3期50-53,57,共5页
甲醛脱氢酶(FADH)属于中等锌链醇脱氢酶家族中的一员,存在于绝大多数原核生物以及所有的真核生物中,是微生物中主要用于甲醛解毒的酶。近年来一些研究确定甲醛脱氢酶还具有S-亚硝基谷胱甘肽还原酶(GSNOR)的活性,用于调节内源性NO的动态... 甲醛脱氢酶(FADH)属于中等锌链醇脱氢酶家族中的一员,存在于绝大多数原核生物以及所有的真核生物中,是微生物中主要用于甲醛解毒的酶。近年来一些研究确定甲醛脱氢酶还具有S-亚硝基谷胱甘肽还原酶(GSNOR)的活性,用于调节内源性NO的动态平衡。对微生物甲醛脱氢酶的结构,生理生化特性,基因克隆以及在环保上的应用方面进行综述。 展开更多
关键词 微生物 甲醛脱氢酶 甲醛解毒 S-亚硝基谷胱甘肽还原酶 NO调节
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重组呼吸道合胞病毒G蛋白基因工程菌的发酵条件研究
4
作者 李光 井申荣 +3 位作者 岳婷婷 季秀玲 林连兵 魏云林 《第三军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2008年第22期2152-2154,共3页
目的研究呼吸道合胞病毒(respiratory syncytial virus,RSV)G蛋白基因工程菌的发酵工艺。方法通过摇瓶培养初步确定工程菌的最适生长条件和表达条件,以此为基础在发酵罐中比较、筛选影响菌体生长和目的蛋白表达率的各种条件,对发酵工艺... 目的研究呼吸道合胞病毒(respiratory syncytial virus,RSV)G蛋白基因工程菌的发酵工艺。方法通过摇瓶培养初步确定工程菌的最适生长条件和表达条件,以此为基础在发酵罐中比较、筛选影响菌体生长和目的蛋白表达率的各种条件,对发酵工艺进行改良优化。结果确定了RSVG蛋白基因工程菌发酵罐培养的各项条件的最佳组合:在LB+葡萄糖的培养基中,搅拌速度为200r/min,培养温度为37℃,pH值为7.0,诱导时温度为25℃,IPTG浓度为0.01mmol/L,优化后工程菌菌体的产量可以达到39.20g/L,目的蛋白表达率平均为18.1%。结论建立了稳定高效的重组RSVG工程菌发酵工艺。 展开更多
关键词 呼吸道合胞病毒 G蛋白 发酵
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洋桔梗基因工程研究进展
5
作者 游览 严金平 陈丽梅 《安徽农业科学》 CAS 北大核心 2010年第10期4984-4986,5016,共4页
对近10年来国内外洋桔梗遗传工程方面的研究进展进行了综述,提出了洋桔梗转基因过程中存在的问题,并就其应用前景进行了展望。
关键词 洋桔梗 遗传转化 转基因 花型 花香
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谷氨酰胺合成酶植物基因工程应用研究进展 被引量：3
6
作者 潘丽峰 李昆志 陈丽梅 《广东农业科学》 CAS CSCD 2007年第1期106-109,共4页
简要概述了通过植物遗传操作分别增强细胞质型谷氨酰胺合成酶(GS1)和叶绿体型谷氨酰胺合成酶(GS2)在植物叶片叶肉细胞的细胞质和叶绿体中的表达水平以提高植物氮素利用率的应用研究进展。
关键词 谷氨酰胺合成酶 氮素营养 基因工程 转基因植物
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微生物耐铝机制的研究进展 被引量：2
7
作者 王阁奇 年洪娟 陈丽梅 《生物技术通报》 CAS CSCD 北大核心 2010年第4期59-62,共4页
铝毒是酸性土壤中限制作物生产最主要的因素。微生物与铝作用逐渐受到关注,一些微生物特别是模式微生物的耐铝机制已被提出。主要综述了酵母,假单胞菌及其它微生物耐铝机制的研究进展,并展望了微生物耐铝机制研究发展的方向。
关键词 微生物 酵母 假单胞菌 耐铝机制
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冰川微生物多样性研究进展 被引量：1
8
作者 罗伟 周长涛 +1 位作者 季秀玲 魏云林 《微生物学杂志》 CAS CSCD 2008年第3期68-71,共4页
冰川微生物多样性的研究是丰富物种多样性、开发地球生物资源的重要途径与方式,也能为更加合理的解释冰川微生物与气候环境的关系提供依据。阐述了冰川微生物的分布,极地、海冰、大陆高山等地区冰川微生物多样性的研究进展,并介绍了研... 冰川微生物多样性的研究是丰富物种多样性、开发地球生物资源的重要途径与方式,也能为更加合理的解释冰川微生物与气候环境的关系提供依据。阐述了冰川微生物的分布,极地、海冰、大陆高山等地区冰川微生物多样性的研究进展,并介绍了研究方法、研究意义及前景展望。 展开更多
关键词 冰川 多样性 极地
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高等植物类胡萝卜素代谢工程研究进展 被引量：2
9
作者 周雨隆 陈丽梅 《生物技术通报》 CAS CSCD 2008年第6期17-19,55,共4页
类胡萝卜素是自然界中种类繁多的天然化合物。植物类胡萝卜素由类异戊二烯碳骨架组成,并含有或没有环氧的、羟基或酮基基团。类胡萝卜素是人类饮食结构中不可缺少的重要成分,具有多种重要的保健功能,并且是安全的食品、饲料和化妆品着... 类胡萝卜素是自然界中种类繁多的天然化合物。植物类胡萝卜素由类异戊二烯碳骨架组成,并含有或没有环氧的、羟基或酮基基团。类胡萝卜素是人类饮食结构中不可缺少的重要成分,具有多种重要的保健功能,并且是安全的食品、饲料和化妆品着色剂。类胡萝卜素植物代谢基因工程的应用旨在增加特殊植物的营养价值、利用植物来生产特殊的类胡萝卜素、提高植物对光氧化的抵抗力及对植物的花色进行修饰等。 展开更多
关键词 高等植物 类胡萝卜素 基因操作 研究进展
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枯草芽孢杆菌在抑制植物病原菌中的研究进展 被引量：167
10
作者 黄曦 许兰兰 +1 位作者 黄荣韶 黄庶识 《生物技术通报》 CAS CSCD 北大核心 2010年第1期24-29,共6页
枯草芽孢杆菌是芽孢杆菌中比较具应用潜力的菌种之一。近年来国内外对于芽孢杆菌各方面应用的研究日益增多,枯草芽孢杆菌作为一种生防细菌越来越引起人们的关注。主要综述了枯草芽孢杆菌在抑制植物病原菌生物防治领域的研究进展,阐述了... 枯草芽孢杆菌是芽孢杆菌中比较具应用潜力的菌种之一。近年来国内外对于芽孢杆菌各方面应用的研究日益增多,枯草芽孢杆菌作为一种生防细菌越来越引起人们的关注。主要综述了枯草芽孢杆菌在抑制植物病原菌生物防治领域的研究进展,阐述了枯草芽孢杆菌的控病作用机制,包括竞争作用、拮抗作用、溶茵作用、诱导植物产生抗性及促进植物生长5个方面。简要介绍了枯草芽孢杆菌及其制剂在国内外的应用情况及在植物病害防治应用中存在的问题、解决措施及发展前景。 展开更多
关键词 枯草芽孢杆菌 生物防治 作用机制
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高等植物中一碳化合物代谢研究进展 被引量：10
11
作者 徐迪 陈丽梅 +1 位作者 年洪娟 梅岩 《西北植物学报》 CAS CSCD 北大核心 2009年第6期1284-1289,共6页
高等植物中一碳(C1)化合物的代谢主要包括甲醇代谢、甲醛代谢和甲酸代谢等,它们是高等植物一碳单位代谢的重要组成部分.由于C1化合物的代谢机制复杂、代谢规模非常小、参与代谢反应的酶和中间产物的含量低且不稳定等特点,相关研究报道... 高等植物中一碳(C1)化合物的代谢主要包括甲醇代谢、甲醛代谢和甲酸代谢等,它们是高等植物一碳单位代谢的重要组成部分.由于C1化合物的代谢机制复杂、代谢规模非常小、参与代谢反应的酶和中间产物的含量低且不稳定等特点,相关研究报道很有限.现代生化和分子遗传学方法的综合使用使得人们对参与植物中C1化合物代谢的酶和基因有了一定程度的了解,该文主要综述了近年来有关高等植物中内源和外源C1化合物甲醇、甲醛和甲酸的来源和代谢途径方面的研究进展,并提出了该研究领域目前存在的问题和今后的研究方向. 展开更多
关键词 高等植物 一碳化合物 甲醇代谢 甲醛代谢 甲酸代谢
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植物铝胁迫响应基因的研究进展 被引量：9
12
作者 陈奇 陈丽梅 +2 位作者 武孔焕 李昆志 玉永雄 《植物遗传资源学报》 CAS CSCD 北大核心 2012年第5期858-864,共7页
铝毒是酸性土壤中植物生长和作物生产的主要限制因子。近年来的很多研究应用差异显示PCR、抑制差减cDNA文库和DNA微正列等技术,在一些铝耐受型和敏感型植物中鉴定了很多铝胁迫响应基因。本研究通过参阅国内外有关报道和结合本实验室的... 铝毒是酸性土壤中植物生长和作物生产的主要限制因子。近年来的很多研究应用差异显示PCR、抑制差减cDNA文库和DNA微正列等技术,在一些铝耐受型和敏感型植物中鉴定了很多铝胁迫响应基因。本研究通过参阅国内外有关报道和结合本实验室的研究成果,从铝诱导的通道蛋白、代谢相关、胁迫和细胞死亡以及信号转导相关基因4个方面的研究进展进行了综述。 展开更多
关键词 铝毒 铝胁迫响应基因 植物
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2种玉米幼苗耐旱性生理机制研究 被引量：5
13
作者 李松 周磊 +2 位作者 郭传龙 陈奇 陈丽梅 《西北植物学报》 CAS CSCD 北大核心 2013年第5期976-983,共8页
以白种皮(白玉米)和黄种皮(黄玉米)2个玉米栽培品种为材料,在水培条件下进行聚乙二醇(PEG-6000)模拟干旱胁迫处理,分析玉米叶片抗旱性相关生理特性和质膜H+-ATP酶活性的变化,探讨2种玉米幼苗耐旱性生理机制。结果表明:(1)在2%、5%、10%P... 以白种皮(白玉米)和黄种皮(黄玉米)2个玉米栽培品种为材料,在水培条件下进行聚乙二醇(PEG-6000)模拟干旱胁迫处理,分析玉米叶片抗旱性相关生理特性和质膜H+-ATP酶活性的变化,探讨2种玉米幼苗耐旱性生理机制。结果表明:(1)在2%、5%、10%PEG-6000处理条件下,随处理浓度和时间的增加,2种玉米幼苗植株失水率上升,叶片蒸腾速率降低,气孔传导率下降;在所有相同处理条件下,白玉米植株失水率明显小于黄玉米,而叶片蒸腾速率和气孔传导率下降幅度明显大于黄玉米,即白玉米的耐旱性比黄玉米强。(2)在相同浓度PEG-6000处理下,白玉米叶片可溶性蛋白、可溶性糖含量、游离脯氨酸含量均高于黄玉米,它在干旱胁迫下的渗透调节能力强于黄玉米。(3)在抗氧化酶体系中,随着PEG-6000胁迫浓度的升高,2种玉米叶片CAT活性呈下降趋势,但白玉米CAT活性在2%和5%PEG-6000胁迫下均显著高于黄玉米,其叶片中H2O2含量显著低于黄玉米。(4)随着PEG-6000胁迫浓度的升高,白玉米叶片质膜H+-ATPase磷酸化水平及其与14-3-3蛋白的结合受到的抑制作用比黄玉米强,白玉米叶片质膜H+-ATPase活性比黄玉米叶片低,叶片气孔开度小于黄玉米,叶片蒸腾速率和气孔传导率均低于黄玉米,这可能是白玉米耐旱性强于黄玉米的一个重要机制。 展开更多
关键词 玉米 干旱 气孔开度 质膜H+-ATP酶 过氧化氢
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用红外光谱研究植物响应甲醛胁迫的生理特性 被引量：6
14
作者 程琴 黄庶识 +2 位作者 梅岩 徐迪 陈丽梅 《浙江大学学报（农业与生命科学版）》 CAS CSCD 北大核心 2010年第6期674-682,共9页
采用傅里叶变换红外(FTIR)光谱技术结合常规生理学方法分析2种观赏植物琴叶喜林芋(Philodendron panduriforme)和大花蕙兰(Cymbidium grandiflorium)叶片吸收和代谢甲醛的能力及它们响应甲醛胁迫的生理特性.结果表明:2种植物对甲醛胁迫... 采用傅里叶变换红外(FTIR)光谱技术结合常规生理学方法分析2种观赏植物琴叶喜林芋(Philodendron panduriforme)和大花蕙兰(Cymbidium grandiflorium)叶片吸收和代谢甲醛的能力及它们响应甲醛胁迫的生理特性.结果表明:2种植物对甲醛胁迫产生的生理响应模式不同,琴叶喜林芋在甲醛胁迫的短时间内作出激烈响应,并通过增加物质合成来提高其代谢和抵抗甲醛的能力,而大花蕙兰对甲醛胁迫的响应不明显,主要通过消耗自身原来的物质来代谢和抵抗甲醛;2种植物完全吸收处理液中的甲醛所需时间与它们在FTIR光谱中各组分恢复到正常水平所需时间有较好的相关性;在甲醛胁迫下这2种植物叶片中可溶性总蛋白和可溶性总糖含量的变化趋势和FTIR数据大致相符,说明FTIR数据能反映这2种植物叶片受甲醛胁迫后的生理响应特征.以上研究表明,FTIR分析可以应用于植物响应甲醛胁迫的生理特性和吸收代谢能力的研究. 展开更多
关键词 傅里叶变换红外光谱技术 甲醛胁迫 生理特性 观赏植物
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改良SDS法提取石韦基因组DNA的研究 被引量：10
15
作者 杜金子 陈丽梅 +2 位作者 黄荣韶 黎桦 黄棉 《西南农业学报》 CSCD 北大核心 2009年第3期754-758,共5页
以7种石韦为试材，采用不同SDS提取液浓度（0．5％、1．5％、2．5％）、不同温浴时间（0．5、1、1.5、2h）对石韦基因组DNA进行提取，并测定基因组DNA的纯度和浓度。结果表明，改良SDS法完全适用于石韦基因组DNA的提取，而且1．5％为改... 以7种石韦为试材，采用不同SDS提取液浓度（0．5％、1．5％、2．5％）、不同温浴时间（0．5、1、1.5、2h）对石韦基因组DNA进行提取，并测定基因组DNA的纯度和浓度。结果表明，改良SDS法完全适用于石韦基因组DNA的提取，而且1．5％为改良SDS法提取石韦基因组DNA的适宜提取液浓度，1—1．5h为提取的最佳时间。 展开更多
关键词 石韦 基因组 DNA提取 改良SDS法
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光照对云南红梨着色及果实品质影响的研究 被引量：11
16
作者 张晓东 陈丽梅 +2 位作者 舒群 苏俊 李昆志 《中国南方果树》 北大核心 2009年第5期1-6,共6页
对红梨果实套袋处理,测定其果皮花色苷含量和着色指数、果实可溶性固形物及蔗糖含量,以探讨光照对云南红梨32号、红梨35号和云红梨1号果皮着色及果实品质的影响。结果表明,红梨32号、红梨35号和云红梨1号果皮着色指数与光照时间和光照... 对红梨果实套袋处理,测定其果皮花色苷含量和着色指数、果实可溶性固形物及蔗糖含量,以探讨光照对云南红梨32号、红梨35号和云红梨1号果皮着色及果实品质的影响。结果表明,红梨32号、红梨35号和云红梨1号果皮着色指数与光照时间和光照质量有关。相同光照条件下,摘除果袋后果皮着色指数从大到小依次为云红梨1号>红梨32号>红梨35号,且着色指数与果皮花色苷含量变化趋于一致;自然光、桔黄色光和白色光是诱导果皮花色苷合成的主要色光,其中自然光对果皮着色影响最大。随着果皮着色指数增加,红梨果肉中蔗糖含量不断增加。 展开更多
关键词 云南红梨 光照 着色指数 套袋 果实品质
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细菌抗生素和重金属协同选择抗性机制研究进展 被引量：13
17
作者 季秀玲 魏云林 林连兵 《生物技术通报》 CAS CSCD 北大核心 2010年第5期65-69,共5页
随着各类抗生素和新型复合金属材料的不断开发和使用,环境中抗生素和重金属离子协同污染的机率不断提高,对环境选择最为敏感的细菌通过自身的进化和发展形成了二者协同选择的抗性机制,如协同抗性、交叉抗性、协同调控和生物膜诱导机制。
关键词 协同抗性 交叉抗性 协同调控 生物膜诱导
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观赏植物叶片对甲醛吸收能力的研究 被引量：6
18
作者 徐迪 梅岩 +2 位作者 年洪娟 李昆志 陈丽梅 《安徽农业科学》 CAS 北大核心 2009年第12期5459-5462,共4页
用甲醛溶液处理5种观赏植物的叶片,测定不同植物叶片对甲醛的吸收能力,并研究环境温度、甲醛溶液的酸碱度和消毒处理对植物叶片吸收甲醛能力的影响。结果表明,5种观赏植物的叶片对甲醛均有一定的吸收能力,环境温度和甲醛溶液的酸碱度对... 用甲醛溶液处理5种观赏植物的叶片,测定不同植物叶片对甲醛的吸收能力,并研究环境温度、甲醛溶液的酸碱度和消毒处理对植物叶片吸收甲醛能力的影响。结果表明,5种观赏植物的叶片对甲醛均有一定的吸收能力,环境温度和甲醛溶液的酸碱度对植物叶片吸收甲醛的能力均有影响,且植物叶片上的微生物也可吸收甲醛。 展开更多
关键词 观赏植物 甲醛 环境条件 微生物
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绿色木霉对Zn^(2+)的吸附特性研究 被引量：15
19
作者 胡亮 王吉坤 +2 位作者 王鲁民 林连兵 魏云林 《化学与生物工程》 CAS 2007年第8期38-40,共3页
采用从含锌重金属废水中筛选出来的绿色木霉C-1进行锌离子吸附研究,考察了相关因素对吸附效果的影响。结果表明,菌丝体经酸碱预处理,可显著提高对锌离子的吸附性能;当pH值为5.5、干菌量为3 g.L-1、锌离子初始浓度在60 mg.L-1以下时,室... 采用从含锌重金属废水中筛选出来的绿色木霉C-1进行锌离子吸附研究,考察了相关因素对吸附效果的影响。结果表明,菌丝体经酸碱预处理,可显著提高对锌离子的吸附性能;当pH值为5.5、干菌量为3 g.L-1、锌离子初始浓度在60 mg.L-1以下时,室温吸附60 min可以达到2 mg.L-1的排放标准。 展开更多
关键词 绿色木霉 生物吸附 锌离子 废水
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应用FTIR研究模式植物拟南芥和烟草甲醛代谢机理的差异 被引量：3
20
作者 宋中邦 梅岩 +3 位作者 程琴 张道君 黄庶识 陈丽梅 《光谱学与光谱分析》 SCIE EI CAS CSCD 北大核心 2010年第7期1763-1767,共5页
运用FTIR技术分析模式植物拟南芥和烟草在甲醛胁迫条件下体内各物质含量的变化规律及光谱表征,为推定两种植物甲醛代谢机理的差异提供线索。拟南芥红外光谱中1 376 cm-1的纤维素峰没有出现在烟草样品中。在应对甲醛胁迫时,它的强度值下... 运用FTIR技术分析模式植物拟南芥和烟草在甲醛胁迫条件下体内各物质含量的变化规律及光谱表征,为推定两种植物甲醛代谢机理的差异提供线索。拟南芥红外光谱中1 376 cm-1的纤维素峰没有出现在烟草样品中。在应对甲醛胁迫时,它的强度值下降趋势比其他吸收峰小,说明拟南芥体内的甲醛主要流向氧化生成甲酸和CO2的途径。胁迫后期该吸收峰强度值下降,而其他物质的峰持续上升,说明该途径中相关酶基因的表达可能受到甲醛抑制,而其他途径的酶基因表达不受影响。烟草用甲醛处理后红外光谱中各化学成分的含量变化趋势一致,说明甲醛进入各代谢途径的流量差别不大。第4天时烟草红外光谱各吸收峰的强度值再次下降是其甲醛代谢能力较弱结果,表明烟草对甲醛的抗性不如拟南芥强。 展开更多
关键词 傅里叶变换红外光谱 拟南芥 烟草 甲醛代谢
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