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题名一株小菇属天麻萌发菌原生质体的制备、再生和应用
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作者
李宏敬
李锡琴
粟忠祥
仇全雷
雷云霆
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机构
西南林业大学林学院
中国科学院昆明植物研究所
昆明市林草局西山林场
西藏波密高原藏天麻产业开发有限公司
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出处
《陕西科技大学学报》
北大核心
2025年第1期58-66,共9页
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基金
云南省基础研究专项-面上项目(202301AT070379)
云南省基础研究专项-重点项目(202001AS070021)
西藏中央引导地方科技发展资金项目(XZ202201YD0006C)。
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文摘
小菇属真菌(Mycena spp.)遗传转化体系是研究其促进天麻种子萌发机制的重要基础,而其原生质体的制备和再生是该体系构建的必要条件.以小菇菌株MY004为实验材料,通过单因素分析和正交试验策略,探究其原生质体制备和再生的影响因素,构建小菇原生质体制备和再生体系.结果表明,在含10 mM MES和0.7 M甘露醇的酶解缓冲液(pH=6)中,小菇MY004菌丝被10 mg/mL真菌溶壁酶在24℃条件下酶解3 h,其原生质体的释放率较高;经液体再生培养基(pH=5)培养3天,其原生质体再生效率可达2%.利用该体系,高效地完成了含报告基因eGFP转基因小菇的菌株纯化.小菇原生质体制备和再生体系可用于小菇遗传转化体系的快速构建,也将为小菇与天麻互作分子机制的研究提供基础平台.
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关键词
小菇
原生质体制备
原生质体再生
转基因菌株纯化
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Keywords
Mycena
protoplast preparation
protoplast regeneration
purification of transgenic strain
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分类号
S567.239
[农业科学—中草药栽培]
TS201.3
[轻工技术与工程—食品科学]
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