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熔解曲线分析检测临床常见5种革兰阴性菌的方法建立
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作者 陈弟 胡大春 +3 位作者 邵剑春 刘德华 周玲 秦海燕 《实用医学杂志》 CAS 北大核心 2011年第15期2843-2846,共4页
目的:构建熔解曲线分析法检测5种临床常见革兰阴性病原菌。方法:选取临床最常见的大肠埃希菌、铜绿假单胞菌、肺炎克雷伯杆菌、鲍曼不动杆菌、嗜麦芽单胞菌作为目标检测菌种。对目标菌种设计种特异性引物。构建熔解曲线法,并进行特异性... 目的:构建熔解曲线分析法检测5种临床常见革兰阴性病原菌。方法:选取临床最常见的大肠埃希菌、铜绿假单胞菌、肺炎克雷伯杆菌、鲍曼不动杆菌、嗜麦芽单胞菌作为目标检测菌种。对目标菌种设计种特异性引物。构建熔解曲线法,并进行特异性验证。检测不同拷贝浓度稀释液进行敏感性分析。检测临床分离目标菌各20株,进行稳定性评价。结果:(1)经预实验后,对Tm值差异较大的铜绿假单胞菌、肺炎克雷伯杆菌、鲍曼不动杆菌三对引物同时进行熔解曲线分析,对大肠埃希菌、嗜麦芽单胞菌两对引物同时进行熔解曲线分析。(2)特异性验证显示,目标菌种均有特异性的熔解曲线,各自的Tm值依次为88.37、86.32、80.86和87.56、86.32℃。(3)可检测到的拷贝浓度稀释液约为3.0×103copies/mL。(4)稳定性评价的结果显示,Tm值变化范围窄小,差异有统计学意义。结论:所构建的熔解曲线法具有较好的特异性、敏感性和稳定性。 展开更多
关键词 熔解曲线分析 方法建立 检测 革兰阴性病原菌
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肺炎克雷伯菌超广谱β-内酰胺酶基因型研究 被引量:26
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作者 胡大春 邵剑春 +3 位作者 杨绍敏 周玲 李超 刘德华 《中国抗生素杂志》 CAS CSCD 北大核心 2006年第1期19-22,58,共5页
目的探讨我院肺炎克雷伯菌中超广谱β-内酰胺酶(ESBL s)基因分布规律。方法对20株经双纸片试验确证为ESBL s表型阳性的肺炎克雷伯菌进行blaTEM-1、blaSHV-1、CTX-M-1组、TOHO-1组等4种基因PCR扩增,并对16株blaSHV-1基因PCR扩增阳性的菌... 目的探讨我院肺炎克雷伯菌中超广谱β-内酰胺酶(ESBL s)基因分布规律。方法对20株经双纸片试验确证为ESBL s表型阳性的肺炎克雷伯菌进行blaTEM-1、blaSHV-1、CTX-M-1组、TOHO-1组等4种基因PCR扩增,并对16株blaSHV-1基因PCR扩增阳性的菌株进行基因序列测定,在In ternet网上与G enB ank中的已知序列进行核苷酸相似性分析,并进行编码基因对位和氨基酸序列对比分析。结果产ESBL s肺炎克雷伯菌中blaTEM-1、blaSHV-1、CTX-M-1组等3种基因扩增阳性率分别是50.0%、95.0%、20.0%。16株肺炎克雷伯菌中有4株序列与SHV-1a(序列号:X 98101,74→934)氨基酸序列完全相同;有3株序列与SHV-2(序列号:AY 570959,42→812)100%相同;有2株序列与SHV-11(序列号:AY 293069,41→817)100%相同;有4株序列与SHV-27(序列号:AF 293345,2→821)氨基酸序列完全相同;有1株序列与SHV-28(序列号:AF 538324,12→823)100%相同;有2株序列在G enB ank中未找到与之完全相同的序列。结论本地肺炎克雷伯菌中有SHV-1a、SHV-11、SHV-28广谱β-内酰胺酶基因和SHV-2、SHV-27 ESBL s基因存在。 展开更多
关键词 肺炎克雷伯菌 超广谱Β-内酰胺酶 基因 序列分析
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产ESBLs大肠埃希菌的耐药表型及水平传播研究 被引量:17
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作者 赵晓丽 胡大春 +2 位作者 周玲 刘德华 蒋杰 《中国抗生素杂志》 CAS CSCD 北大核心 2008年第1期55-57,共3页
目的了解昆明市第一人民医院临床分离的大肠埃希菌超广谱p内酰胺酶(extended spectrum β-lactamases,ESBLs)的耐药表型和水平传播情况。方法对2005年1月~12月昆明市第一人民医院临床分离的197株大肠埃希菌用表型确证试验检测ESBLs... 目的了解昆明市第一人民医院临床分离的大肠埃希菌超广谱p内酰胺酶(extended spectrum β-lactamases,ESBLs)的耐药表型和水平传播情况。方法对2005年1月~12月昆明市第一人民医院临床分离的197株大肠埃希菌用表型确证试验检测ESBLs,用Kirby—Bauer琼脂扩散法做药物敏感试验;用接合试验了解产ESBLs基因是否定位于质粒,并对接合子进行KB法药敏试验和ESBLs表型确证。结果197株大肠埃希菌中共检出产ESBLs菌104株,检出率52.79%。在各类标本中产ESBLs菌株在纤维支气管镜(bronchofibroscope,BF)刷片中分离率最高(75%),就科别来看内分泌科标本的产ESBLs大肠埃希菌的分离率最高(78.57%)。除亚胺培南和阿米卡星外,产ESBLs菌株对其他15种抗菌药物的耐药率明显高于非产ESBLs菌株(P〈0.01)。104株产ESBLs菌株中有91株符合供体菌的标准,64株接合成功,接合子均确证产ESBLs,其接合率为70.33%。64株供体菌及其相应接合子的药敏结果显示除复方磺胺甲噁唑、左氧氟沙星、庆大霉索、头孢吡肟和头孢西丁外,供体菌及其接合子对其他12种药物耐药率无显著性差异(P〉0.05)。结论昆明市第一人民医院大肠埃希菌产ESBLs和耐药质粒水平传播情况严重,临床应加强对大肠埃希菌耐药性的监测,严格掌握抗生素的使用指征,防止耐药菌株的传播流行。 展开更多
关键词 大肠埃希菌 超广谱Β-内酰胺酶 耐药 接合实验
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产ESBLs大肠埃希菌的耐药性分析 被引量:7
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作者 赵晓丽 胡大春 +3 位作者 周玲 刘德华 秦海燕 陈俊 《中国感染控制杂志》 CAS 2009年第6期423-425,437,共4页
目的了解昆明市第一人民医院产超广谱β-内酰胺酶(ESBLs)大肠埃希菌的检出及耐药情况。方法对该院2006年1—12月临床分离的293株大肠埃希菌,用表型确证试验检测ESBLs,K-B琼脂纸片扩散法做药物敏感试验。结果 293株大肠埃希菌中,检出产ES... 目的了解昆明市第一人民医院产超广谱β-内酰胺酶(ESBLs)大肠埃希菌的检出及耐药情况。方法对该院2006年1—12月临床分离的293株大肠埃希菌,用表型确证试验检测ESBLs,K-B琼脂纸片扩散法做药物敏感试验。结果 293株大肠埃希菌中,检出产ESBLs菌168株(57.34%)。各类标本中,产ESBLs率以痰标本分离株(64.71%)最高,其次为血液(62.50%)和脓液标本(57.14%);各科室中,产ESBLs率以重症监护室(ICU)分离株(65.22%)最高,其次为内分泌科(65.00%)和肿瘤科(63.33%)。除亚胺培南和阿米卡星外,产ESBLs菌对其他14种常用抗菌药物的耐药率均明显高于非产ESBLs菌(均P<0.01);产ESBLs菌株不仅对青霉素、头孢菌素、氨曲南等抗生素广泛耐药,同时对喹诺酮类、氨基糖苷类、磺胺类等多种抗菌药物耐药,仅对亚胺培南、阿米卡星的耐药率<5%(分别为0.00%、3.30%)。结论昆明市第一人民医院临床分离大肠埃希菌产ESBLs率较高;产ESBLs菌株对临床常用多种抗菌药物严重耐药,可经验选用的药物十分有限。临床医生应根据病原菌药敏结果合理选用抗菌药物,以提高治疗效果。 展开更多
关键词 大肠埃希菌 超广谱Β-内酰胺酶 抗药性 微生物 抗菌药物 合理用药
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云南汉族原发性高血压与HLA-DQA1等位基因的相关性研究 被引量:7
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作者 胡大春 邵剑春 +4 位作者 陈爱华 王玮 陈俊 孙保明 蔡雪梅 《中国心血管杂志》 2004年第3期157-159,共3页
目的 探讨云南汉族人群 HL A- DQA1等位基因与高血压病的相关性。方法 应用病例 -对照相关分析方法 ,采用 PCR- SSP基因分型技术对云南汉族健康个体 91例和高血压病患者 83例 (均无血缘关系 ) ,进行 HL A- DQA1位点 10个有表达的等位... 目的 探讨云南汉族人群 HL A- DQA1等位基因与高血压病的相关性。方法 应用病例 -对照相关分析方法 ,采用 PCR- SSP基因分型技术对云南汉族健康个体 91例和高血压病患者 83例 (均无血缘关系 ) ,进行 HL A- DQA1位点 10个有表达的等位基因分型 ,并进行遗传相关分析。结果 原发性高血压患者中 DQA1* 0 30 2的频率为0 .12 8,显著高于对照组 (0 .0 11) ,χ2 =19.4 0 9,P<0 .0 1,相对危险率 RR=11.4 2 ,EF为 0 .2 3。DQA1* 0 2 0 1的频率(0 .0 6 1)显著低于对照组 (0 .170 ) ,χ2 =9.876 ,P<0 .0 5。相对危险率为 0 .35。 PF为 0 .18。结论 云南汉族 HL A-DQA1等位基因与高血压病的相关性与北方汉族存在部分差异 ,HL A - DQA1* 0 30 2可能与原发性高血压易感相关 ;DQA1* 0 2 0 1可能在云南汉族原发性高血压发病中有保护作用。 展开更多
关键词 高血压病 HLA-DQA1 等位基因 相关性 云南汉族
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HLA-DQB1等位基因与高血压病的相关性研究 被引量:1
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作者 胡大春 邵剑春 +4 位作者 陈爱华 王玮 陈俊 孙保明 蔡雪梅 《中国免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2008年第5期434-435,共2页
关键词 HLA-DQB1等位基因 高血压病患者 抗原特异性 等位基因分型 基因分型技术 多基因疾病 遗传机制 连锁分析
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