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非营养型人工甜味剂对肠道菌群影响的研究进展
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作者 缪琦欢 姜英虹 +1 位作者 陈伟伟 薛艳凤 《食品与发酵工业》 北大核心 2025年第18期407-415,共9页
非营养型人工甜味剂广泛添加于食品和饮料中。然而,多项研究表明人工甜味剂与多种疾病风险增加相关,其安全性备受关注和争议。肠道菌群与人体健康密切相关,人工甜味剂可直接或间接作用于肠道菌群,可能带来健康风险。该文主要综述常用非... 非营养型人工甜味剂广泛添加于食品和饮料中。然而,多项研究表明人工甜味剂与多种疾病风险增加相关,其安全性备受关注和争议。肠道菌群与人体健康密切相关,人工甜味剂可直接或间接作用于肠道菌群,可能带来健康风险。该文主要综述常用非营养型人工甜味剂(三氯蔗糖、糖精、安赛蜜、阿斯巴甜)对肠道菌群的影响,并阐述其与葡萄糖耐量受损、肝脏功能异常、肠道微生态失调等不良效应的关联,为人工甜味剂与人体健康的机制研究提供一定参考。 展开更多
关键词 人工甜味剂 肠道菌群 糖精 三氯蔗糖 安赛蜜 阿斯巴甜
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脂肪变性供肝缺血-再灌注损伤的发生机制及修复策略
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作者 张黄燕 江杰 胡宗强 《器官移植》 北大核心 2025年第4期620-625,共6页
供肝短缺已成为限制肝移植临床发展的主要阻碍。边缘供肝的合理利用是缓解供肝短缺的一个有效途径。随着社会发展及人们生活饮食结构的改变,肥胖患病率及脂肪性肝病发生率不断上升,脂肪变性肝脏为扩大供者库提供了一个缓解供肝短缺的机... 供肝短缺已成为限制肝移植临床发展的主要阻碍。边缘供肝的合理利用是缓解供肝短缺的一个有效途径。随着社会发展及人们生活饮食结构的改变,肥胖患病率及脂肪性肝病发生率不断上升,脂肪变性肝脏为扩大供者库提供了一个缓解供肝短缺的机会。较多研究表明,与正常供肝相比,脂肪变性供肝对缺血-再灌注损伤更敏感。本综述将总结目前脂肪变性肝脏缺血-再灌注损伤的发生机制及修复策略,为脂肪变性供肝的合理利用提供参考,同时为扩大肝移植供者池提供思路。 展开更多
关键词 脂肪变性供肝 缺血-再灌注损伤 边缘供肝 活性氧簇 线粒体功能障碍 炎症反应 铁死亡 非酒精性脂肪肝
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基于泛素-蛋白酶体系统的蓝舌病病毒对视黄酸诱导基因I信号传导的调控
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作者 鲁丹枫 张振兴 +2 位作者 李占鸿 朱沛 李卓然 《华南农业大学学报》 北大核心 2025年第5期637-648,共12页
【目的】视黄酸诱导基因I(Retinoic acid inducible gene I,RIG-I)泛素化修饰链上第48位赖氨酸(Lysine,Lys)残基连接的多泛素链能够调控RIG-I蛋白的稳定性,以防止RIG-I信号和宿主抗病毒反应的过度激活。本研究旨在探讨蓝舌病病毒(Blueto... 【目的】视黄酸诱导基因I(Retinoic acid inducible gene I,RIG-I)泛素化修饰链上第48位赖氨酸(Lysine,Lys)残基连接的多泛素链能够调控RIG-I蛋白的稳定性,以防止RIG-I信号和宿主抗病毒反应的过度激活。本研究旨在探讨蓝舌病病毒(Bluetongue virus,BTV)是否也通过影响RIG-I的泛素化修饰调控其信号传导而利于自身增殖。【方法】以BTV感染永生化绵羊肺动脉血管内皮(Sheep pulmonary artery endothelium,SPAE)细胞,分别利用蛋白酶体抑制剂MG-132和去泛素化酶(Deubiquitinase,DUB)抑制剂PR-619处理细胞,通过RTqPCR分别检测环指蛋白125(Ring finger protein 125,RNF125)、泛素特异性蛋白酶4(Ubiquitin-specific protease4,USP4)、RIG-I、干扰素调节因子3(Interferon regulatory factor 3,IRF3)和干扰素α(Interferonα,IFN-α)的转录水平以及BTV基因组拷贝数;利用免疫印迹(Western blotting)和ELISA检测以上蛋白的表达水平;采用免疫荧光(Immunofluorescence)检测IRF3核转移水平。【结果】BTV感染上调RNF125、RIG-I、IRF3和IFN-α的转录和表达水平,转录水平上调1.20~8.68倍,表达水平上调0.06~3.94倍;USP4的转录水平轻微上调,但表达水平下调。蛋白酶体抑制剂MG-132显著抑制BTV诱导的RIG-I降解,并导致IRF3细胞核转移率在感染后24 h(24 hour post-infection,24 hpi)和48 hpi较未处理对应组别分别上升9.67和8.66个百分点,IFN-α表达水平在48 hpi上调至未处理对应组别的2.18倍,BTV基因组拷贝数在24和48 hpi分别降低至未处理对应组别的74%和85%。DUB抑制剂PR-619处理明显促进RIG-I降解,IRF3细胞核转移率在24和48 hpi较未处理对应组别分别下降8.00和16.67个百分点,IFN-α表达水平在24 hpi下调至未处理对应组别的56.50%,BTV基因组拷贝数在24和48 hpi分别增加至未处理对应组别的1.93和1.49倍。【结论】BTV利用泛素-蛋白酶体系统(Ubiquitin-proteasome system)调控宿主RIG-I信号传导而利于自身增殖。 展开更多
关键词 蓝舌病病毒 视黄酸诱导基因I 泛素化修饰 蛋白酶体 降解
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蓝舌病病毒感染绵羊胚胎睾丸细胞转录组测序数据的基因集富集分析及验证
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作者 鲁丹枫 李占鸿 +2 位作者 张振兴 朱沛 李卓然 《中国畜牧兽医》 北大核心 2025年第9期4319-4333,共15页
【目的】从促炎细胞因子和细胞凋亡涉及的生物过程和信号通路角度,探讨在蓝舌病病毒(Bluetongue virus,BTV)感染进程中将促炎细胞因子-炎症反应-凋亡三者串联起来的关键宿主细胞因子或蛋白,以期获得BTV致病机制相关宿主因子或蛋白线索... 【目的】从促炎细胞因子和细胞凋亡涉及的生物过程和信号通路角度,探讨在蓝舌病病毒(Bluetongue virus,BTV)感染进程中将促炎细胞因子-炎症反应-凋亡三者串联起来的关键宿主细胞因子或蛋白,以期获得BTV致病机制相关宿主因子或蛋白线索。【方法】对BTV-1血清型毒株Y863感染的绵羊胚胎睾丸细胞(OA3.Ts)总RNA进行转录组测序(RNA-Seq);利用R package edgeR(v 3.14.0)包统计差异表达基因,对差异表达基因进行基因集富集分析(GSEA),获得其在基因集C2:curated gene sets下的KEGG基因子集,基因集C5:GO下的生物过程、细胞组分和分子功能基因子集,以及基因集Hallmark下的基因富集图谱;利用实时荧光定量RT-PCR、ELISA和Western blotting对关键生物过程或通路的10个领头亚集(LS)基因的表达进行验证;并通过Annexin V-FITC/碘化丙锭(PI)染色法检测被感染细胞的凋亡水平。【结果】GSEA结果表明,差异表达基因分别显著富集在基因集C2:curated gene sets的KEGG基因子集下的凋亡通路,基因集C5:GO的生物过程基因子集下的对肿瘤坏死因子(TNF)的反应、对白细胞介素1(IL-1)的反应、细胞对IL-1的反应、对γ-干扰素(IFN-γ)的反应、细胞对IFN-γ的反应和IL-12产生等条目,以及基因集Hallmark下的炎症反应通路。实时荧光定量RT-PCR结果显示,GSEA结果中关键促炎细胞因子和蛋白中的IL-1α、IL-6、C-X-C趋化因子8(CXCL8)、半胱天冬酶7(CASP7)、CASP8、TNF受体超家族成员5(CD40)和核苷酸结合寡聚化结构域样受体热蛋白结构域亚家族成员3(NLRP3)的转录水平显著上调,log2差异倍数(FoldChange,FC)值分别为0.34、1.03、7.42、3.98、3.61、1.00和1.74。ELISA和Western blotting结果显示,与对照组相比,感染组CXCL8、CD40、CASP7和CASP8表达水平显著或极显著上升(P<0.05;P<0.01)。Annexin V-FITC/PI染色结果表明,凋亡的OA3.Ts细胞由对照组的1.89%上升至感染组的12.78%。【结论】本研究分析预测高表达的CD40和CXCL8是串联促炎细胞因子-炎症反应-凋亡三者的关键因素,对BTV感染导致的多组织出血、水肿、弥散性血管内凝血和组织坏死等临床症状及雄性绵羊睾丸退化和无精子症具有重要潜在贡献。 展开更多
关键词 蓝舌病病毒(BTV) 转录组测序 基因集富集分析 CD40 CXCL8
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保留式双语教学模式在应用型本科院校医学免疫学教学中的研究与实践 被引量:5
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作者 谢力 魏云芳 +3 位作者 袁德凯 俞华 余珊 句红萍 《中国免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2017年第12期1879-1880,共2页
随着我国高等医学教育改革的不断深入,近年来以"岗位胜任力"( Post competency )为人才培养立足点的应用型本科院校发展迅速,既懂得专业知识又具有相当外语水平的复合型人才成为市场化下医药行业中稀缺的人力资源. 双语教学( Bilin... 随着我国高等医学教育改革的不断深入,近年来以"岗位胜任力"( Post competency )为人才培养立足点的应用型本科院校发展迅速,既懂得专业知识又具有相当外语水平的复合型人才成为市场化下医药行业中稀缺的人力资源. 双语教学( Bilingual teaching)在国内的医学高等教育课程教学中已经有多年的探索和实践,但多数情况是首先在研究生课程中开展尝试. 目前,如何对专业学习负担较重且英语基础相对薄弱的应用型医学本科生开展双语教学以适应医学高等院校的人才培养需求,已成为教学管理者和任课教师探讨和关注的课题. 展开更多
关键词 医学免疫学教学 双语教学模式 本科院校 应用 医学教育改革 医学高等教育 医学高等院校 人才培养
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链霉菌Streptomyces sp.P325的化学成分研究
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作者 唐相琴 姜瑞金 +3 位作者 毕晓旭 陈秀 何江波 王莹 《天然产物研究与开发》 CAS CSCD 北大核心 2024年第11期1868-1873,共6页
对Streptomyces sp.P325的化学成分进行研究。采用正相硅胶柱色谱、ODS反相柱色谱、凝胶柱色谱及半制备高效液相色谱等分离技术对Streptomyces sp.P325发酵产物的乙酸乙酯萃取部分进行分离纯化。从中共分离得到6个化合物,通过波谱数据... 对Streptomyces sp.P325的化学成分进行研究。采用正相硅胶柱色谱、ODS反相柱色谱、凝胶柱色谱及半制备高效液相色谱等分离技术对Streptomyces sp.P325发酵产物的乙酸乙酯萃取部分进行分离纯化。从中共分离得到6个化合物,通过波谱数据分析和文献比对鉴定其结构,其中包括2个新化合物:四羟基十八碳二酸I(1)和四羟基十六碳二酸I(2),以及4个已知化合物:iso-frenolicin B(3)、(R)-7-acetyl-3,6-dihydroxy-8-propyl-3,4-dihydronaphthalen-1(2H)-one(4)、对羟基苯甲酸甲酯(5)和isonicotinaldehyde(6)。对分离得到的化合物1~6进行细胞毒活性评价。结果显示,化合物3对HepG2细胞系表现出显著的抑制活性(IC50为13.11μmol/L),对HeLa细胞的抑制活性为中等(IC50为25.04μmol/L)。 展开更多
关键词 链霉菌 化学成分 分离纯化 结构鉴定 细胞毒活性
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云上杜鹃花化学成分及其抑制NO生成活性研究
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作者 段苑婷 程琪 +5 位作者 毕晓旭 王莹 陈冰 栾杰 张高红 何江波 《天然产物研究与开发》 CAS CSCD 北大核心 2024年第1期63-71,共9页
研究云上杜鹃花中的化学成分及其抗炎活性。采用系统分离方法(硅胶柱色谱、凝胶Sephadex LH-20柱色谱、半制备液相色谱)对云上杜鹃花乙酸乙酯萃取相进行分离与纯化,再采用1H NMR、13 C NMR和MS等现代波谱学方法对化合物的结构进行鉴定... 研究云上杜鹃花中的化学成分及其抗炎活性。采用系统分离方法(硅胶柱色谱、凝胶Sephadex LH-20柱色谱、半制备液相色谱)对云上杜鹃花乙酸乙酯萃取相进行分离与纯化,再采用1H NMR、13 C NMR和MS等现代波谱学方法对化合物的结构进行鉴定。利用LPS诱导RAW 264.7巨噬细胞建立炎症模型,评价化合物抗炎活性。从乙酸乙酯部位分离并鉴定26个化合物,分别为梫木毒素I(1)、梫木毒素II(2)、pieristoxin S(3)、去氢催吐萝芙木醇(4)、megastigm-5-en-3,9-diol(5)、吐叶醇(6)、5,6-epoxy-3-hydroxy-7-megastigmen-9-one(7)、hydroxy-3-oxo-α-ionol(8)、香叶芳樟醇(9)、negunfurol(10)、2,6,10-trimethyldodeca-6,11-diene-2,3,10-triol(11)、9,10-dihydroxy-6,10-dimethylundec-5-en-2-one(12)、(2Z)-2,6-dimethyl-2,7-octadiene-1,6-diol(13)、medioresinol(14)、松脂素(15)、4-O-甲基雪松素(16)、柚皮素(17)、6,8-di-C-methyldihydrokaempferol(18)、去甲基丁香色原酮(19)、二氢松柏醇(20)、mycophenolic methyl ester(21)、苔色酸甲酯(22)、东莨菪亭(23)、水杨醇(24)、对甲氧基苯乙酸(25)、苔黑酚(26)。活性筛选结果表明,13、16、18抑制LPS诱导RAW 264.7细胞中NO生成,化合物16活性较强,IC 50值达33.5±1.5μmol/L。 展开更多
关键词 云上杜鹃 抗炎活性 吐叶醇 结构鉴定
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三七叶片基因表达受丛枝菌根真菌与茄腐镰刀菌影响的转录组分析
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作者 杨双琳 李秋桦 +6 位作者 钟宇 贾李智 邓利娟 夏体渊 陈秀 尹敏 任禛 《西南农业学报》 CSCD 北大核心 2024年第11期2463-2474,共12页
【目的】探究提前接种丛枝菌根真菌(Arbuscular mycorrhizal fungi, AMF)对健康和患病三七叶片基因表达的影响,为揭示AMF提高三七抗根腐病的分子机制提供科学参考。【方法】通过转录组测序技术,研究健康三七(CK)、接种AMF(A)、接种茄腐... 【目的】探究提前接种丛枝菌根真菌(Arbuscular mycorrhizal fungi, AMF)对健康和患病三七叶片基因表达的影响,为揭示AMF提高三七抗根腐病的分子机制提供科学参考。【方法】通过转录组测序技术,研究健康三七(CK)、接种AMF(A)、接种茄腐镰刀菌Fusarium solani(F)、接种AMF+F.solani(AF)4个不同处理的三七叶片基因的差异表达变化。【结果】4个处理中共检测出41 321个表达基因。差异基因分析结果显示,A vs CK和AF vs F比较组的差异基因数分别为419和1643个。GO功能注释分析显示2个比较组的差异表达基因均主要富集在生物学过程的“代谢过程”、分子功能的“催化活性”及“结合”、细胞组分的“细胞部分”等GO条目中。KEGG功能注释分析显示A vs CK和AF vs F 2个对比组中出现的差异基因均参与了代谢过程、环境信息处理、遗传信息处理过程、有机系统和细胞过程5大过程中的18个通路,且AF vs F比较组在每条通路中的差异基因数均多于A vs CK。在2个比较组的功能注释中,共筛选出4条富集差异基因的主要抗病通路,分别为苯丙烷生物合成、植物激素信号转导、植物-病原体互作和MAPK信号通路-植物。从苯丙烷生物合成通路中随机选取了10个差异基因进行qRT-PCR验证,基因表达变化趋势与转录组测序结果一致。【结论】AMF可以通过调控苯丙烷生物合成、植物激素信号转导、植物-病原体互作和MAPK信号通路-植物等抗病通路的基因表达提高三七抗根腐病的能力。 展开更多
关键词 转录组测序 三七 叶片基因表达 丛枝菌根真菌 茄腐镰刀菌
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三种药用水蛭的染色体制备及核型分析
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作者 施凤 沈路遥 +4 位作者 刘子超 胡清美 仝向荣 毕晓旭 黎俊余 《水产科技情报》 2024年第5期290-295,共6页
为探究宽体金线蛭、天津医蛭和菲牛蛭等3种药用水蛭的染色体制备及核型分析方法,丰富对水蛭染色体数目及核型组成的认知,以精巢细胞为材料,采用空气干燥法制作前述3种水蛭的染色体玻片,并进行镜检和核型分析。试验结果显示,3种水蛭的染... 为探究宽体金线蛭、天津医蛭和菲牛蛭等3种药用水蛭的染色体制备及核型分析方法,丰富对水蛭染色体数目及核型组成的认知,以精巢细胞为材料,采用空气干燥法制作前述3种水蛭的染色体玻片,并进行镜检和核型分析。试验结果显示,3种水蛭的染色体数目和核型公式分别为宽体金线蛭:2n=22=8m+4sm+4st+6t,天津医蛭:2n=22=12m+4sm+2st+4t,菲牛蛭:2n=26=4m+4sm+6st+12t;核型不对称系数分别为宽体金线蛭71.27%,天津医蛭65.70%,菲牛蛭78.99%;核型分类标准分别为宽体金线蛭“3A”型,天津医蛭“2A”型,菲牛蛭“3A”型。结果说明,核型分析结果与这3种水蛭所在的系统分类地位相符,3种水蛭的进化程度有一定差别。 展开更多
关键词 宽体金线蛭 天津医蛭 菲牛蛭 染色体 核型
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四种制作多聚赖氨酸免疫组化黏附载玻片方法的比较 被引量:6
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作者 付先利 支月莹 +4 位作者 郑芳 曾超 肖栩 贾静 吴建农 《临床与实验病理学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2016年第3期347-348,共2页
随着病理学技术的不断发展,免疫组化染色技术以其操作简单、敏感性高、特异性强、可将形态和抗原定位结合起来等优点,在临床肿瘤病理诊断及鉴别诊断中已广泛应用。
关键词 多聚赖氨酸 免疫组织化学 黏附载玻片 涂胶方法 防脱片
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对比研究8批红芪多糖对CCl_4所致小鼠肝损伤的药效 被引量:6
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作者 李继平 张雪梅 +4 位作者 师志强 陈亚丽 洪妍 封士兰 卢弘 《中成药》 CAS CSCD 北大核心 2017年第9期1927-1931,共5页
目的比较产自甘肃陇南、陇西等8批不同产地红芪中红芪多糖对四氯化碳(CCl_4)所致小鼠肝损伤的作用。方法采用水提醇沉法从8批红芪中提取红芪多糖,然后对总糖含有量、单糖组成、分子量进行分析;通过CCl_4-花生油皮下注射致小鼠肝损伤,同... 目的比较产自甘肃陇南、陇西等8批不同产地红芪中红芪多糖对四氯化碳(CCl_4)所致小鼠肝损伤的作用。方法采用水提醇沉法从8批红芪中提取红芪多糖,然后对总糖含有量、单糖组成、分子量进行分析;通过CCl_4-花生油皮下注射致小鼠肝损伤,同时给予8批红芪多糖(10 g原药材/kg,1次/d)灌胃,5周后测定天冬氨酸转氨酶(AST)、丙氨酸转氨酶(ALT)及肝质量指数;灰色关联度法将血清指标与多糖的单糖基进行谱效相关分析。结果CCl_4所致小鼠肝损伤效果明显;8批红芪多糖的单糖组成虽然相同,但是单糖基比例不同,总多糖含有量和分子量存在差异,对CCl_4所致小鼠肝损伤药效显著,但药效活性存在差异,其中产自武都米仓山者最好,陇西首阳镇者最差。结论红芪多糖具有抗CCl_4所致急性肝损伤的作用,8批红芪多糖抗肝损伤药效强弱不同,总多糖含有量、分子量均与药效强弱相关。 展开更多
关键词 红芪多糖 CCL4 肝损伤 谱效关系
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花花柴化学成分的研究 被引量:2
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作者 何江波 牛燕芬 +6 位作者 陈武荣 李金仙 王林波 字泰平 句红萍 贾静 陈伟伟 《中成药》 CAS CSCD 北大核心 2016年第5期1062-1066,共5页
目的研究花花柴Karelinia caspia(Pall.)Less的化学成分。方法采用硅胶、Sephadex LH-20凝胶和反相RP-18色谱柱,对花花柴乙酸乙酯提取物进行分离纯化,通过波谱数据鉴定所得化合物的结构。结果从中分离出12个化合物,分别鉴定为Δ5,22-豆... 目的研究花花柴Karelinia caspia(Pall.)Less的化学成分。方法采用硅胶、Sephadex LH-20凝胶和反相RP-18色谱柱,对花花柴乙酸乙酯提取物进行分离纯化,通过波谱数据鉴定所得化合物的结构。结果从中分离出12个化合物,分别鉴定为Δ5,22-豆甾醇3-O-β-D-葡萄糖吡喃糖苷(1)、蒲公英甾醇醋酸酯(2)、cyclomusalenone(3)、φ-蒲公英甾醇(4)、taraxast-20-ene-3β,30-diol(5)、豆甾醇(6)、槲皮素(7)、4',3,5,7-四羟基-3',6-二甲氧基黄酮(8)、柽柳素(9)、芹菜素(10)、4β-acetoxy-3β-angeloyloxy-7,11-dehydroeudesman-8-one(11)、3β-angeloyloxy-4α,11-dihdroxy-6,7-dehydroeudesman-8-one(12)。结论所有化合物均为首次从该植物中分离得到。 展开更多
关键词 花花柴 化学成分 分离纯化
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制作脂肪组织冷冻切片的体会 被引量:2
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作者 肖栩 郑芳 +2 位作者 付先利 贾静 曾超 《临床与实验病理学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2016年第2期231-231,共1页
高质量的冷冻切片对于病理诊断的可靠性、准确性尤为重要,而富含脂肪组织的冷冻切片的制作比较困难,用常规温度的切片方法难以切出理想的切片,且易脱片。陈洁等。介绍防脱片明胶的办法,但效果不甚满意。翟金萍等。报道利用厚切片挤... 高质量的冷冻切片对于病理诊断的可靠性、准确性尤为重要,而富含脂肪组织的冷冻切片的制作比较困难,用常规温度的切片方法难以切出理想的切片,且易脱片。陈洁等。介绍防脱片明胶的办法,但效果不甚满意。翟金萍等。报道利用厚切片挤压拉片的方法,虽然切片效果不错,但比较耗时,不容易操作。本文利用改良厚切片的方法做出了满意的结果,且对组织结构无损害。 展开更多
关键词 脂肪组织 冷冻切片 病理诊断
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抗生物膜感染的群体效应抑制剂 被引量:2
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作者 冯梦蝶 洪愉 +2 位作者 毛普加 许泽仰 曾韦锟 《上海交通大学学报(医学版)》 CAS CSCD 北大核心 2016年第3期442-446,共5页
生物膜是微生物群落附着在基质或表面并被自身合成的胞外基质包裹形成的复合物。细菌生物膜为细菌提供保护层,阻止抗生素进入,使细菌表现出抗抗生素能力。据临床统计表明,80%病原菌感染与其群体效应(QS)介导的生物膜相关,因此,要根治病... 生物膜是微生物群落附着在基质或表面并被自身合成的胞外基质包裹形成的复合物。细菌生物膜为细菌提供保护层,阻止抗生素进入,使细菌表现出抗抗生素能力。据临床统计表明,80%病原菌感染与其群体效应(QS)介导的生物膜相关,因此,要根治病原菌的感染,抑制生物膜的形成至关重要。QS分子参与生物膜形成,而QS抑制剂(QSI)能抑制生物膜形成。该文就QSI在抗生物膜方面的进展进行综述。 展开更多
关键词 生物膜 群体效应 群体效应抑制剂
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中医针刺操作评价指标研究 被引量:3
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作者 童毅 曹丽琰 秦竹 《护理学杂志》 2011年第11期62-64,共3页
目的编制适用于护理专业学生针刺操作考核的标准化评分表。方法采用系统分析法,以教学和临床经验为基础,初步拟订针刺操作评分表,通过4轮专家咨询筛选;依据层次分析法,计算权重系数,最终确定评分条目。结果专家权威系数为0.890,最终确... 目的编制适用于护理专业学生针刺操作考核的标准化评分表。方法采用系统分析法,以教学和临床经验为基础,初步拟订针刺操作评分表,通过4轮专家咨询筛选;依据层次分析法,计算权重系数,最终确定评分条目。结果专家权威系数为0.890,最终确立的评分表有操作前评估、操作准备、针刺操作、操作后评价4个一级指标,归一化权重分别为0.046、0.204、0.654、0.096;共15个条目,各条目归一化权重0.049~0.701,以此建立针刺操作评分表。结论该评分表可靠性高,达到教学和临床实践的要求,可作为考核护理专业学生针刺操作的工具。 展开更多
关键词 中医护理 针刺 评价指标系统分析法 评分表 层次分析法 权重
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重组Ser^(17)突变型hIFN-β腺病毒的构建及其对结肠癌细胞的增殖抑制作用
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作者 唐丽媛 李楠 +7 位作者 缪希松 王元 芮丹云 童毅 王波 李臣 句红萍 谢力 《中国免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2017年第2期196-200,205,共6页
目的:构建表达突变型人源β干扰素(Ser17hI FN-β)的重组腺病毒,体外评价其对结肠癌细胞的抑制增殖作用及细胞周期的影响。方法:人工合成含Ser17突变型hI FN-β基因并克隆至穿梭载体pshuttle-CMV,pshuttle-Ser17hI FNβ与腺病毒骨架质粒... 目的:构建表达突变型人源β干扰素(Ser17hI FN-β)的重组腺病毒,体外评价其对结肠癌细胞的抑制增殖作用及细胞周期的影响。方法:人工合成含Ser17突变型hI FN-β基因并克隆至穿梭载体pshuttle-CMV,pshuttle-Ser17hI FNβ与腺病毒骨架质粒pA d同源重组后转染HEK293细胞,包装重组腺病毒rA d-Ser17hI FNβ。rA d-Ser17hI FNβ转染人结肠癌细胞株HT-29,Western blot检测rA d-Ser17hI FNβ在HT-29中的表达;MTT细胞生长实验检测rA d-Ser17hI FNβ对HT-29细胞的体外增殖的影响,流式细胞术检测HT-29细胞周期改变情况。结果:重组腺病毒经HEK293细胞扩增后滴度可达109.125CCID50/ml;Western blot检测到外源性Ser17hI FN-β基因在HT-29细胞中的表达;rA d-Ser17hI FNβ转染后HT-29细胞生长受到抑制(P<0.05),细胞处于S期百分比增加。结论:表达Ser17突变型hI FN-β的重组腺病毒能抑制结肠癌细胞的增殖及诱导S期阻滞,为应用β干扰素对结肠癌进行基因治疗提供了实验基础。 展开更多
关键词 Ser17hI FN-β 结肠癌 重组腺病毒
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LSPA1早期基因gp22细菌双杂交诱饵载体与筛选文库的建立
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作者 冯梦蝶 毛普加 +7 位作者 洪愉 许泽仰 赵继华 杨洪文 宋武战 黄芬 井申荣 曾韦锟 《生物技术通报》 CAS CSCD 北大核心 2015年第7期214-219,共6页
构建细菌双杂交系统中的诱饵载体p KT25-gp22和甲型副伤寒沙门氏菌基因文库以便后续的筛选实验。PCR扩增获得gp22基因,插入p KT25构成诱饵质粒p KT25-gp22。提取甲型副伤寒沙门氏菌基因组DNA,经Sau3AⅠ部分酶切后连接到p UT18C质粒的Ba... 构建细菌双杂交系统中的诱饵载体p KT25-gp22和甲型副伤寒沙门氏菌基因文库以便后续的筛选实验。PCR扩增获得gp22基因,插入p KT25构成诱饵质粒p KT25-gp22。提取甲型副伤寒沙门氏菌基因组DNA,经Sau3AⅠ部分酶切后连接到p UT18C质粒的Bam HⅠ位点,获得基因组DNA表达文库。用化转的方法将诱饵质粒与p UT18C共转入BTH101,检测诱饵质粒自激活作用,并检测诱饵蛋白对宿主菌的毒性。将文库质粒电转至JM109感受态,PCR鉴定文库的多样性。诱饵载体p KT25-gp22无自激活报告基因的能力且对细菌的生长无毒性。所构建的副甲基因组文库覆盖基因组达8倍,满足文库筛选需要。成功构建细菌双杂交系统中诱饵载体p KT25-gp22,筛选文库质量良好,可应用于细菌双杂交实验。 展开更多
关键词 细菌双杂交 诱饵载体 基因组文库 早期基因 甲型副伤寒沙门氏菌
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甲型副伤寒沙门菌噬菌体LSPA1启动子筛选方法的建立
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作者 曾韦锟 毛普加 +8 位作者 洪愉 冯梦蝶 许泽仰 宋武战 杨洪文 赵继华 王纪爱 黄芬 井申荣 《郑州大学学报(医学版)》 CAS 北大核心 2015年第6期745-749,共5页
目的:通过构建p CAT3启动子陷阱载体筛选甲型副伤寒沙门菌噬菌体LSPA1启动子。方法:PCR无义突变去除p CAT2载体骨架上CalⅠ酶切位点,并在CAT片段的5’端引入CalⅠ的酶切位点,构建启动子陷阱载体p CAT3。TaqⅠ酶切噬菌体LSPA1基因组,插入... 目的:通过构建p CAT3启动子陷阱载体筛选甲型副伤寒沙门菌噬菌体LSPA1启动子。方法:PCR无义突变去除p CAT2载体骨架上CalⅠ酶切位点,并在CAT片段的5’端引入CalⅠ的酶切位点,构建启动子陷阱载体p CAT3。TaqⅠ酶切噬菌体LSPA1基因组,插入p CAT3载体中,转化至大肠杆菌DH5α,通过氯霉素抗性平板筛选获得噬菌体LSPA1基因文库菌;随机挑取1株提取质粒,测序及比对分析插入序列;根据分析结果设计引物,扩增可能的启动子序列,并插入验证载体p-3lysm-egfp,转化DH5α,荧光显微镜观察。结果:成功构建p CAT3启动子陷阱载体,获得约100启动子文库菌,其中1株文库菌质粒中随机插入片段可能对应噬菌体LSPA1的ORF4启动子;插入待验证DNA片段的p-3lysm-egfp载体重组菌在荧光显微镜下能见到明显绿色荧光。结论:该启动子文库可有效筛选噬菌体LSPA1启动子,为进一步深入研究噬菌体LSPA1提供帮助。 展开更多
关键词 甲型副伤寒沙门菌 噬菌体 启动子
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抗菌药物跨生物膜传递方式的研究进展
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作者 冯梦蝶 曾韦锟 《复旦学报(医学版)》 CAS CSCD 北大核心 2016年第3期373-378,共6页
生物膜是指单一或混合微生物附着于生物或者合成的表面具有一定组织结构的微生物聚集体,其组成成分包括微生物自身及其分泌的多糖基质、纤维蛋白及脂质蛋白。生物膜除了能够帮助细菌耐受多种环境压力,例如紫外线、噬菌体等,更为重要的... 生物膜是指单一或混合微生物附着于生物或者合成的表面具有一定组织结构的微生物聚集体,其组成成分包括微生物自身及其分泌的多糖基质、纤维蛋白及脂质蛋白。生物膜除了能够帮助细菌耐受多种环境压力,例如紫外线、噬菌体等,更为重要的是它能够阻碍抗生素进入和扩散,是病原菌耐药性形成的重要机制之一。因此,在治疗病原体感染的过程中,选择一种有效的抗菌药物是必要的,但对于形成生物膜的微生物如何将抗菌药物有效地传递至生物膜从而彻底治愈成膜病原菌感染是至关重要的,所以本文就抗菌药物传递至生物膜的运输方式进行综述。 展开更多
关键词 抗菌药物 生物膜 药物传递方式
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TGFβR2与MSI在结直肠癌中的相关性及临床病理学意义 被引量:4
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作者 张楚悦 危群 +6 位作者 杨裔坚 钱程 付必莽 谢楠 魏雷 李春满 苏莹珍 《解放军医学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2022年第4期367-374,共8页
目的探讨结直肠癌(CRC)组织中TGFβR2的表达与微卫星不稳定性(MSI)的相关性,以及两者与CRC患者临床病理参数的关系。方法收集2019年1月1日-9月30日昆明医科大学第二附属医院收治的184例CRC患者的CRC组织及癌旁组织,采用多重荧光PCR毛细... 目的探讨结直肠癌(CRC)组织中TGFβR2的表达与微卫星不稳定性(MSI)的相关性,以及两者与CRC患者临床病理参数的关系。方法收集2019年1月1日-9月30日昆明医科大学第二附属医院收治的184例CRC患者的CRC组织及癌旁组织,采用多重荧光PCR毛细管电泳法(CE)检测MSI,免疫组化染色(IHC)检测MMR和TGFβR2蛋白的表达情况。采用Kappa一致性检验分析IHC与CE检测MSI结果的一致性。qRT-PCR检测TGFβR2 mRNA的表达情况。采用秩和检验分析TGFβR2基因突变与MSI的相关性以及TGFβR2 mRNA相对表达量与临床病理参数的关系。结果184例CRC组织样本中,152例(82.6%,152/184)为微卫星低度不稳定(MSI-L)/微卫星稳定(MSS),32例(17.4%,32/184)为微卫星高度不稳定(MSI-H)。CE与IHC检测MSI的主体结果具有高度一致性,Kappa一致性系数为0.922(P<0.001)。与MSI-L/MSS相比,MSI-H多发生于无淋巴结转移、TNM分期Ⅰ-Ⅱ期的CRC(P<0.05)。TGFβR2 mRNA和蛋白在CRC组织中的表达低于癌旁组织(P<0.01)。TGFβR2基因在MSI-H CRC组织中的突变率高于MSI-L/MSS CRC组织[93.3%(28/30)vs.14.9%(23/154),P<0.01]。TGFβR2 mRNA相对表达量在MSI-H肿瘤中高于MSI-L/MSS肿瘤(7.93±0.36 vs.4.47±1.31,P<0.01),在癌旁组织中高于CRC组织(9.38±0.82 vs.4.76±1.63,P<0.01)。在无远处转移、无淋巴结转移、TNM分期Ⅰ-Ⅱ期的CRC组织中,TGFβR2 mRNA相对表达量较高(P<0.05)。结论MSI与TGFβR2的表达在肿瘤发生部位、是否发生淋巴结转移及TNM分期方面存在一致性及协同性。 展开更多
关键词 结直肠癌 转化生长因子βⅡ型受体 微卫星不稳定 临床病理参数
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