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题名分离培养原代树鼩角膜基质细胞
被引量：1
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作者
张璐
李妍
孙子雯
李楠钰
胡竹林
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机构
昆明医科大学第四附属医院眼科云南省第二人民医院眼科云南省眼科研究所云南省眼科疾病研究重点实验室
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出处
《中国比较医学杂志》
CAS
北大核心
2019年第5期109-115,共7页
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基金
院士和领军人才培养(2017HC010)
院士专家工作站(2017IC064)
+1 种基金
云南省眼科疾病重点实验室(2017DG008)
昆明医科大学研究生创新基金(2018S047)
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文摘
目的探索一种简单、易行的体外快速、分离培养树鼩角膜基质细胞(corneal stromal cells, CSCs)的方法。方法实验分为实验组A和实验组B,取树鼩角膜基质层,实验组A剪碎,用1%的Ⅱ型胶原酶消化60 min,离心后重悬接种;实验组B用Ⅱ型胶原酶联合中性蛋白酶消化。比较记录原代及传代细胞生长情况、传代时间,细胞行波形蛋白免疫组化及免疫荧光鉴定。结果胶原酶消化法可成功的获取原代细胞, 9 d后即可进行传代,细胞形态好;传代细胞生长较快,2～3 d即可传一代;双酶消化法获得的CSCs较少, 10 d才可见少量散落细胞,15～20 d可传代;波形蛋白免疫组化及免疫荧光表达阳性。结论两种方法均可成功培养出CSCs,但胶原酶消化法能更容易高效分离培养出大量树鼩CSCs。
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关键词
角膜基质细胞
体外培养
树鼩
组织工程
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Keywords
corneal stromal cells
in vitro culture
tree shrew
tissue engineering
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分类号
R-33
[医药卫生]
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