泌尿系肿瘤中microRNA的相关研究进展 被引量：7

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作者 黄应龙 王海峰 王剑松 《实用医学杂志》 CAS 北大核心 2019年第3期492-495,共4页

miRNA称为微小RNA(microRNAs),是一类非蛋白质编码的由20多个核苷酸单链构成的小分子RNA。研究表明,miRNA具有原癌基因及抑癌基因的双重作用,其在膀胱癌、肾癌、前列腺癌等常见泌尿系肿瘤的发生、发展及转移等各个阶段中起着极其重要的... miRNA称为微小RNA(microRNAs),是一类非蛋白质编码的由20多个核苷酸单链构成的小分子RNA。研究表明,miRNA具有原癌基因及抑癌基因的双重作用,其在膀胱癌、肾癌、前列腺癌等常见泌尿系肿瘤的发生、发展及转移等各个阶段中起着极其重要的调控作用,并且其相关研究也为肿瘤的早期发现和有效治疗提供了重要的理论依据,在化疗药物的耐受及敏感性方面也提供了相应的理论指导。因此,对于miRNA的深入研究将为泌尿系肿瘤的诊断与治疗提供新的思路。 展开更多

关键词 MIRNA 泌尿系肿瘤 化疗敏感性

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减瘤性肾切除术在转移性肾细胞癌治疗中的研究进展

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作者 郭彩访 范宏 +3 位作者 栾婷 詹辉 王海峰 王剑松 《实用医学杂志》 北大核心 2025年第13期1952-1957,共6页

随着靶向疗法和新型免疫检查点抑制剂的出现,转移性肾细胞癌(metastatic renal cell carcinoma,mRCC)的治疗格局在过去20年中迅速发展。其中,减瘤性肾切除术(cytoreductive nephrectomy,CN)是一个悬而未决的问题,与系统治疗(systemic th... 随着靶向疗法和新型免疫检查点抑制剂的出现,转移性肾细胞癌(metastatic renal cell carcinoma,mRCC)的治疗格局在过去20年中迅速发展。其中,减瘤性肾切除术(cytoreductive nephrectomy,CN)是一个悬而未决的问题,与系统治疗(systemic therapy,ST)相比,其生存效益值得怀疑。CN在mRCC系统治疗中的作用和时机尚未明确。此外,CN患者选择上同样缺乏明确的共识。因此,本文简要综述mRCC中CN的现有证据,结合当前最新的肾癌诊疗指南,重点探讨CN在mRCC中的手术时机、获益人群及转移瘤切除术的价值。此外,本文讨论CN在转移性非透明细胞肾癌的作用,并展望CN在mRCC未来的应用前景和不断变化的角色。 展开更多

关键词 转移性肾细胞癌 减瘤性肾切除术 靶向治疗 免疫治疗 转移瘤切除术

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膀胱尿路上皮癌标本中人微小核糖核酸3658与人源性长寿保障基因Ⅱ型基因表达的相关性及其临床意义 被引量：1

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作者 梁敏 王海峰 +1 位作者 王剑松 杨宏 《中国全科医学》 CAS CSCD 北大核心 2016年第5期549-553,559,共6页

目的探讨人微小核糖核酸3658(miR-3658)和人源性长寿保障基因Ⅱ型(LASS2)在临床膀胱尿路上皮癌标本中的表达差异及相关性。方法收集昆明医科大学第二附属医院和云南省肿瘤医院泌尿外科2014年1月—2015年1月收治的膀胱癌患者96例,在膀胱... 目的探讨人微小核糖核酸3658(miR-3658)和人源性长寿保障基因Ⅱ型(LASS2)在临床膀胱尿路上皮癌标本中的表达差异及相关性。方法收集昆明医科大学第二附属医院和云南省肿瘤医院泌尿外科2014年1月—2015年1月收治的膀胱癌患者96例,在膀胱癌根治术中获取膀胱癌组织和癌旁组织。采用实时荧光定量PCR测定膀胱癌组织和癌旁组织miR-3658及LASS2 mRNA表达水平;采用免疫组化法检测膀胱癌组织和癌旁组织LASS2蛋白表达情况。结果膀胱癌组织miR-3658 mRNA表达水平高于癌旁组织,LASS2 mRNA表达水平低于癌旁组织,差异均有统计学意义(t=6.46、38.12,P<0.01)。不同复发性、病理分级、浸润深度、淋巴转移、远处转移、TNM分期者miR-3658、LASS2 mRNA表达水平比较,差异均有统计学意义(P<0.05)。LASS2蛋白表达定位于胞质中,呈棕色或黄褐色颗粒状。膀胱癌组织LASS2蛋白阳性表达率低于癌旁组织,差异有统计学意义(χ2=15.32,P<0.01)。不同复发性、病理分级、浸润深度、淋巴转移、TNM分期者LASS2蛋白阳性表达率比较,差异均有统计学意义(P<0.05)。Pearson相关分析结果显示,膀胱癌组织LASS2 mRNA表达水平与miR-3658 mRNA表达水平呈负相关(r=-0.676,P<0.05)。结论 miR-3658与LASS2在膀胱癌组织中的表达呈负相关,miR-3658可能通过调节LASS2表达而参与膀胱癌发生发展的过程。 展开更多

关键词 膀胱肿瘤 微小核糖核酸 人源性长寿保障基因Ⅱ型 相关性

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组合式输尿管软镜联合钬激光治疗肾结石:158例报告 被引量：23

4

作者 平秦榕 王应东 +5 位作者 柯昌兴 韦海荣 詹辉 王宇扬 陈戬 颜汝平 《中国微创外科杂志》 CSCD 北大核心 2018年第6期531-534,共4页

目的探讨组合式输尿管软镜联合钬激光治疗肾结石的临床疗效。方法回顾性分析2012年3月~2016年7月组合式输尿管软镜联合钬激光治疗158例肾结石的临床资料,结石均位于单侧,单发结石132例,多发结石26例,158例共193枚结石,单个结石直径1.0~2... 目的探讨组合式输尿管软镜联合钬激光治疗肾结石的临床疗效。方法回顾性分析2012年3月~2016年7月组合式输尿管软镜联合钬激光治疗158例肾结石的临床资料,结石均位于单侧,单发结石132例,多发结石26例,158例共193枚结石,单个结石直径1.0~2.0 cm,(1.4±0.6)cm。使用德国铂立组合式输尿管软镜,寻及结石后用200μm科医人钬激光光纤碎石。结果术中结石寻及率95.9%(185/193),8例8枚未寻及结石均位于肾下盏。手术时间30~100min,(45.1±10.3)min。无输尿管撕脱、穿孔、尿外渗、肾周脓肿等并发症。Ⅰ期手术碎石成功率89.2%(141/158)(无直径≥4 mm残石)。术后4周复查KUB或CT,结石排净率98.6%(139/141)。结论组合式输尿管软镜联合钬激光治疗直径1~2 cm肾结石安全、有效,具有创伤小、可拆卸、碎石成功率高、并发症发生率低的优点。 展开更多

关键词 肾结石 输尿管软镜 钬激光

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TIGIT的生物学作用及其在膀胱癌中应用的研究进展 被引量：3

5

作者 张娅威 施鸿金 +2 位作者 付什 王剑松 王海峰 《实用医学杂志》 CAS 北大核心 2024年第12期1762-1766,共5页

T细胞免疫球蛋白和免疫受体酪氨酸抑制性基序结构域[T-cell immunoglobulin and immunoreceptor tyrosine-based inhibitory motif(ITIM)domain,TIGIT]是一种在免疫细胞表面表达的穿膜糖蛋白。TIGIT在膀胱癌中表达上调,会对膀胱癌的发... T细胞免疫球蛋白和免疫受体酪氨酸抑制性基序结构域[T-cell immunoglobulin and immunoreceptor tyrosine-based inhibitory motif(ITIM)domain,TIGIT]是一种在免疫细胞表面表达的穿膜糖蛋白。TIGIT在膀胱癌中表达上调,会对膀胱癌的发生发展及不良预后产生重要影响,阻断TIGIT信号的免疫治疗有望改善膀胱癌患者的预后。随着研究的深入,TIGIT很有可能成为膀胱癌诊断和治疗的靶点。现对TIGIT的结构、免疫调节功能及其在膀胱癌治疗中的应用进行综述。 展开更多

关键词 TIGIT 膀胱癌 CD155 免疫抑制性受体 免疫治疗

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LASS2-3'-非翻译区rs8444单核苷酸多态性与膀胱癌易感性的相关性研究 被引量：4

6

作者 陈玉锦 王海峰 +5 位作者 颜汝平 柯昌兴 丁明霞 栾婷 邹仁超 王剑松 《中国肿瘤临床》 CAS CSCD 北大核心 2017年第3期107-111,共5页

目的:探讨人源性长寿保障基因2(Homo sapiens longevity assurance homologue 2,LASS2)-3'-非翻译区(UTR)单核苷酸多态性与中国云南地区膀胱癌人群之间的相关性。方法:选择2011年1月至2015年1月在昆明医科大学第二附属医院就诊且经... 目的:探讨人源性长寿保障基因2(Homo sapiens longevity assurance homologue 2,LASS2)-3'-非翻译区(UTR)单核苷酸多态性与中国云南地区膀胱癌人群之间的相关性。方法:选择2011年1月至2015年1月在昆明医科大学第二附属医院就诊且经病理学确诊的105例膀胱癌作为膀胱癌组、100例非膀胱癌作为对照组进行病例对照研究,对两组患者的膀胱组织进行基因扩增和测序,分析研究LASS2-3'-非翻译区单核苷酸多态性与膀胱癌之间的相关性。结果:在LASS2-3'-非翻译区仅发现1个单核苷酸多态性位点rs8444,经χ2检验和Logistic回归分析显示,膀胱癌组和对照组rs8444T/C等位基因频率及基因型分布差异具有统计学意义(χ2=10.267,P=0.006;χ2=10.634,P=0.001)。与携带T等位基因或TT基因型相比,携带C等位基因或CC基因型的个体发生膀胱癌的风险显著降低(OR=0.489,95%CI为0.309~0.772,P=0.002;OR=0.258,95%CI为0.081~0.827,P=0.023),但与膀胱癌的TNM分期、病理分级和有否转移无明显相关性(P>0.05)。结论:LASS2-3'-非翻译区rs8444C等位基因和CC基因型可降低膀胱癌的发病风险,但与膀胱癌的TNM分期、病理分级和转移情况无关。 展开更多

关键词 LASS2 膀胱癌 多态性 单核苷酸

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miRNA-20a在膀胱癌中的表达及其机制研究 被引量：4

7

作者 陈玉锦 王剑松 +5 位作者 颜汝平 柯昌兴 丁明霞 栾婷 邹仁超 王海峰 《中国肿瘤临床》 CAS CSCD 北大核心 2017年第20期1014-1018,共5页

目的:探讨miRNA-20a在膀胱癌组织中的表达及其机制。方法:收集2014年1月至2015年1月昆明医科大学第二附属医院96例患者的组织标本,运用实时定量聚合酶链反应(q RT-PCR)方法检测miRNA-20a在膀胱癌组织和癌旁组织中的表达;生物信息学方法... 目的:探讨miRNA-20a在膀胱癌组织中的表达及其机制。方法:收集2014年1月至2015年1月昆明医科大学第二附属医院96例患者的组织标本,运用实时定量聚合酶链反应(q RT-PCR)方法检测miRNA-20a在膀胱癌组织和癌旁组织中的表达;生物信息学方法预测miRNA-20a的靶基因并采用双荧光素酶报告基因实验进行验证;q RT-PCR、Western blot以及细胞免疫荧光分别检测人膀胱癌细胞系T24和J82细胞转染miRNA-20a模拟物或阴性对照后对靶基因mRNA和蛋白表达的影响;CCK-8、Transwell侵袭小室和划痕实验检测过表达miRNA-20a后T24细胞体外增殖、迁移和侵袭能力的改变。结果:miRNA-20a在膀胱癌组织中高表达,且与肿瘤的病理分级、临床分期、转移以及复发密切相关(P<0.001);双荧光素酶报告基因实验证实miRNA-20a与人源性长寿保障基因2(Homo sapiens longevity assurance homologue 2,LASS2)的3'-UTR直接靶向结合;转染miRNA-20a模拟物可显著下调膀胱癌细胞中LASS2 m RNA和蛋白的表达(P<0.01),增强膀胱癌细胞的增殖、侵袭和迁移能力(P<0.01)。结论:miRNA-20a在膀胱癌组织中高表达,且miRNA-20a可通过靶向抑制LASS2促进膀胱癌细胞的增殖、侵袭和迁移,与膀胱癌的发生发展相关。 展开更多

关键词 miRNA-20a LASS2 膀胱癌

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肿瘤干细胞在化疗耐药机制中的研究进展 被引量：14

8

作者 郭海啸 栾婷 +1 位作者 王海峰 王剑松 《实用医学杂志》 CAS 北大核心 2019年第1期163-166,共4页

肿瘤被认为是异质性实体,正是由于肿瘤异质性的存在使得化疗并不能完全清除肿瘤,而肿瘤异质性的原因则趋向于肿瘤干细胞的存在。肿瘤干细胞被认为是肿瘤起始,自我更新,转移和化疗耐药的源头所在。传统的化疗虽然能杀死肿瘤细胞但对肿瘤... 肿瘤被认为是异质性实体,正是由于肿瘤异质性的存在使得化疗并不能完全清除肿瘤,而肿瘤异质性的原因则趋向于肿瘤干细胞的存在。肿瘤干细胞被认为是肿瘤起始,自我更新,转移和化疗耐药的源头所在。传统的化疗虽然能杀死肿瘤细胞但对肿瘤干细胞的作用不大,并且由肿瘤干细胞导致的复发肿瘤往往表现出更强的耐药性,因此研究肿瘤干细胞的化疗耐药机制将有助于改善传统的化疗方案并提升整体的化疗效果。本文主要综述几种分子机制在肿瘤干细胞化疗耐药方面的作用。 展开更多

关键词 肿瘤干细胞 化疗耐受 肿瘤异质性

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lncRNA调控膀胱癌干细胞上皮-间质转化机制的研究进展 被引量：8

9

作者 平秦榕 颜汝平 王剑松 《医学研究生学报》 CAS 北大核心 2017年第2期220-224,共5页

膀胱癌是泌尿系统中最常见的恶性肿瘤,具有易复发和转移的生物学特点。肿瘤干细胞(cancer stem cells,CSCs)理论解释了膀胱癌复发和转移的根源。上皮-间质转化(epithelial-mesenchymal transition,EMT)的发生可以促进肿瘤细胞获得干细... 膀胱癌是泌尿系统中最常见的恶性肿瘤,具有易复发和转移的生物学特点。肿瘤干细胞(cancer stem cells,CSCs)理论解释了膀胱癌复发和转移的根源。上皮-间质转化(epithelial-mesenchymal transition,EMT)的发生可以促进肿瘤细胞获得干细胞特征,而具有干细胞特征的肿瘤细胞也相应的高表达EMT标记分子。长链非编码RNA(long noncoding RNA,lncRNA)通过调控肿瘤细胞的EMT过程,促进肿瘤细胞干性的产生和维持。CSCs、EMT和lncRNA共同参与调控肿瘤细胞的增殖、侵袭、转移等过程,与肿瘤的发生发展密切相关。阐明lncRNA与膀胱癌干细胞EMT的相互关系及其调控机制,将为膀胱癌复发和转移的靶向治疗提供新思路。文中对lncRNA调控膀胱癌干细胞EMT机制的最新研究进展进行综述。 展开更多

关键词 膀胱癌 长链非编码RNA 膀胱癌干细胞 上皮-间质转化

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LASS2基因对恶性肿瘤作用机制研究进展 被引量：7

10

作者 王侨 栾婷 +1 位作者 王剑松 王海峰 《实用医学杂志》 CAS 北大核心 2019年第12期2020-2024,共5页

人源性长寿保障基因Ⅱ型(LASS2)又名肿瘤转移抑制基因-1(TMSG1),是新发现的一种肿瘤转移抑制基因,多项研究表明其在肝癌、肺癌、膀胱癌、乳腺癌、胃癌、前列腺癌、结直肠癌、脑膜瘤、鼻咽癌等多种恶性肿瘤中表达下降,有研究显示LASS2对... 人源性长寿保障基因Ⅱ型(LASS2)又名肿瘤转移抑制基因-1(TMSG1),是新发现的一种肿瘤转移抑制基因,多项研究表明其在肝癌、肺癌、膀胱癌、乳腺癌、胃癌、前列腺癌、结直肠癌、脑膜瘤、鼻咽癌等多种恶性肿瘤中表达下降,有研究显示LASS2对恶性肿瘤具有促进凋亡及抑制转移等抑癌基因的作用。本文就目前研究LASS2对不同恶性肿瘤的作用及其作用机制的进展作一综述。 展开更多

关键词 LASS2 TMSG1 恶性肿瘤 肿瘤预后

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膀胱癌精准化新辅助化疗研究进展 被引量：2

11

作者 李云云 王自勇 +3 位作者 韦海荣 詹辉 王海峰 王剑松 《中国肿瘤临床》 CAS CSCD 北大核心 2019年第22期1177-1180,共4页

根治性膀胱切除术(radical cystectomy,RC)是肌层浸润性膀胱癌(muscular invasive bladder cancer,MIBC)患者的标准治疗,术后5年总生存率仅约50%,而术前新辅助化疗(neoadjuvant chemotherapy,NAC)提高了患者的总生存率。虽各指南均推荐... 根治性膀胱切除术(radical cystectomy,RC)是肌层浸润性膀胱癌(muscular invasive bladder cancer,MIBC)患者的标准治疗,术后5年总生存率仅约50%,而术前新辅助化疗(neoadjuvant chemotherapy,NAC)提高了患者的总生存率。虽各指南均推荐行NAC,但部分患者对NAC无治疗反应,不能从中获益。采用NAC治疗反应的筛选方法对行NAC的患者是否受益进行识别,是实现个体化、精准化治疗的关键所在,但在临床实践中目前尚无一种可靠的筛选方法。本文将对膀胱癌精准化NAC及NAC反应的筛选方法进行综述。 展开更多

关键词 肌层浸润性膀胱癌 新辅助化疗 生物标志物 精准医疗

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HSD3B1在前列腺癌治疗中的研究进展 被引量：1

12

作者 陈振杰 黄应龙 丁明霞 《实用医学杂志》 CAS 北大核心 2019年第16期2658-2663,共6页

HSD3B1基因是编码3β-羟基类固醇脱氢酶-1(3β-HSD1)的基因,而3β-HSD1是催化肾上腺前体类固醇转化为睾酮、双氢睾酮和雌激素的关键酶。在前列腺癌(PCa)的研究中,大量研究证明HSD3B1(1245 A>C)等位基因变异体与PCa患者的去势抵抗性... HSD3B1基因是编码3β-羟基类固醇脱氢酶-1(3β-HSD1)的基因,而3β-HSD1是催化肾上腺前体类固醇转化为睾酮、双氢睾酮和雌激素的关键酶。在前列腺癌(PCa)的研究中,大量研究证明HSD3B1(1245 A>C)等位基因变异体与PCa患者的去势抵抗性密切相关,可作为激素敏感性PCa患者雄激素剥夺治疗反应差的预测标志物。而且,近年来的研究发现HSD3B1基因与甾体类CYP17A1抑制剂阿比特龙的体内代谢密切相关,有望成为帮助PCa患者选择个体化治疗的预测性生物标志物。因此,HSD3B1逐渐成为国内外PCa领域的研究热点。本文就HSD3B1在PCa中的最新研究进展进行综述。 展开更多

关键词 HSD3B1基因 前列腺癌 雄激素剥夺治疗 阿比特龙

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循环血液中非编码RNA的检测在膀胱癌中的研究进展 被引量：4

13

作者 巩宇航 丁明霞 《实用医学杂志》 CAS 北大核心 2018年第20期3478-3481,共4页

膀胱癌是世界第九常见的癌症。研究发现一部分非编码RNA可以在循环血液中被检测到,并与膀胱癌的发展相关,如:microRNA、lncRNA,可能会成为膀胱癌诊断与预后新的检测方法。肿瘤相关的mircoRNA的血清水平可以从健康控制群中区分出患有癌... 膀胱癌是世界第九常见的癌症。研究发现一部分非编码RNA可以在循环血液中被检测到,并与膀胱癌的发展相关,如:microRNA、lncRNA,可能会成为膀胱癌诊断与预后新的检测方法。肿瘤相关的mircoRNA的血清水平可以从健康控制群中区分出患有癌症的病人,且具有很高的特异性和敏感性,mircoRNA作为癌症的生物标记是很有潜力的。异常表达的长链非编码RNA可在循环癌细胞和癌症患者的血清和尿液中检测到,并且它们在癌症的不同阶段和各种组织中表现出特定的表达模式,因此长链非编码RNA可以作为癌症检测的有效生物标志物。本综述主要描述非编码RNA在循环血液中检测膀胱癌的最新研究进展。并着重讨论循环血液中检测mircoRNA和lncRNA对于诊断膀胱癌的意义。 展开更多

关键词 膀胱癌 非编码RNA 血液 检测

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CELL-SELEX筛选膀胱癌核酸适配体的细胞学研究

14

作者 平秦榕 李翀 +4 位作者 梁剑伟 刘杨文易 雷容 王剑松 颜汝平 《医学研究生学报》 CAS 北大核心 2020年第7期708-714,共7页

目的基于膀胱癌标志物的早期诊断和术后复发监测方法是目前的研究热点。文中利用CELL-SELEX技术筛选出可特异性识别膀胱癌细胞系(EJ、T24、BIU87)的核酸适配体。方法以人膀胱癌细胞系EJ、T24和BIU87为阳性质控细胞,以HCV29(人正常尿路... 目的基于膀胱癌标志物的早期诊断和术后复发监测方法是目前的研究热点。文中利用CELL-SELEX技术筛选出可特异性识别膀胱癌细胞系(EJ、T24、BIU87)的核酸适配体。方法以人膀胱癌细胞系EJ、T24和BIU87为阳性质控细胞,以HCV29(人正常尿路上皮细胞系)、293T(人胚肾细胞系)、huh7(人肝癌细胞系)为阴性质控细胞,进行CELL-SELEX筛选。PCR上游引物5’端标记FITC,下游引物5’端标记Biotin,将每一轮次筛选得到的ssDNA作为模板进行PCR扩增、纯化。利用生物素-链亲和素磁珠分离法将PCR纯化产物进行分离后获得次级FITC-ssDNA用于下一轮次的筛选,流式细胞仪监测CELL-SELEX筛选进程。选取与膀胱癌细胞系EJ、T24和BIU87结合率最高轮次的ssDNA文库进行PCR扩增、产物纯化、分子克隆和测序;根据测序结果,利用Dnaman软件模拟核酸适配体的二级结构。体外合成FITC标记的适配体,流式细胞仪检测适配体与EJ、T24和BIU87的结合率。结果随着CELL-SELEX流程的推进,FITC-ssDNA与EJ、T24和BIU87细胞的结合率逐渐增加;第15轮FITC-ssDNA与EJ结合率最高,文库中apt1富集度最高;第18轮FITC-ssDNA与T24、BIU87结合率最高,文库中apt2和apt3富集度最高。DNA结构预测分析显示apt1、apt2和apt3的二级结构主要为茎环结构。流式细胞仪检测:FITC-apt1可特异性识别EJ细胞,阳性率达71.5%。FITC-apt2与T24细胞的结率明显高于BIU87细胞。FITC-apt3与BIU87细胞的结合率明显高于T24细胞。FITC-apt2可特异性识别T24细胞,阳性率达63.9%。FITC-apt3可特异性识别BIU87细胞,阳性率达74.7%。结论利用CELL-SELEX技术筛选出可识别膀胱癌细胞系的适配体。其中适配体apt1可特异性识别EJ细胞,适配体apt2可特异性识别T24细胞,适配体apt3可特异性识别BIU87细胞,为膀胱癌早期诊断和靶向治疗技术的研发提供了实验依据。 展开更多

关键词 CELL-SELEX 膀胱癌 适配体

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基质细胞衍生因子-1及其受体CXCR4对膀胱癌细胞侵袭能力及腔内种植的影响 被引量：10

15

作者 杨德林 霍倩 +5 位作者 王乙水 杨旭升 王凯 王剑松 徐鸿毅 王海峰 《医学研究生学报》 CAS 北大核心 2014年第10期1028-1032,共5页

目的复发和转移是膀胱癌治疗失败的主要原因。文中利用RNA干扰技术使趋化性细胞因子受体CXCR4基因沉默,探讨其沉默对膀胱癌细胞侵袭能力及腔内种植的影响。方法设计合成CXCR4的特异性短发卡状RNA(short hairpin,shRNA),筛选出能够稳定抑... 目的复发和转移是膀胱癌治疗失败的主要原因。文中利用RNA干扰技术使趋化性细胞因子受体CXCR4基因沉默,探讨其沉默对膀胱癌细胞侵袭能力及腔内种植的影响。方法设计合成CXCR4的特异性短发卡状RNA(short hairpin,shRNA),筛选出能够稳定抑制CXCR4表达的细胞,并分为空白对照组、阴性对照质粒组、pshRNA-CXCR4-1实验组,pshRNA-CXCR4-2实验组,应用RT-PCR和免疫荧光分别检测CXCR4 mRNA和蛋白表达水平,应用Boyden小室模型检测体外侵袭能力的变化。将20只裸小鼠随机数表法分为实验裸小鼠和对照裸小鼠,各10只。向实验裸小鼠膀胱内注入100μL ShRNA-EJ-M3,向对照裸小鼠膀胱内注入100μL EJ-M3细胞,检测shRNA-CXCR4对膀胱癌细胞腔内种植能力的影响。结果稳定转染后的pshRNA-CXCR4-1实验组CXCR4 mRNA表达(62.05±1.35)较空白对照组(174.38±1.96)和阴性对照组(166.27±1.82)明显下降(P<0.05),pshRNA-CXCR4-2实验组CXCR4 mRNA表达水平(182.58±4.2)与空白对照组和阴性对照组比较,差异无统计学意义(P>0.05);免疫荧光实验中pshRNA-CXCR4-1实验组红色免疫荧光细胞数(32.24±2.23)较空白对照组(89.61±4.47)和阴性对照组(92.45±3.68)降低(P<0.05);pshRNA-CXCR4-2实验组红色免疫荧光细胞数(76.87±5.11)与空白对照组和阴性对照组比较,差异无统计学意义(P>0.05)。体外趋化侵袭实验结果显示,pshRNACXCR4-1实验组穿膜细胞数(39.67±8.45)明显少于空白对照组(135.33±9.28)及阴性对照组(123.63±6.36),差异有统计学意义(P<0.05)。实验裸小鼠腔内种植能力与对照裸小鼠比较,差异有统计学意义(10%vs 70%,P<0.01)。结论以CXCR4为靶向的特异性shRNA能有效抑制膀胱癌细胞基因CXCR4的表达,显著降低膀胱癌细胞体外侵袭能力及腔内种植能力,SDF-1/CXCR4生物轴有望成为预防和治疗膀胱癌侵袭和转移的重要靶点之一。 展开更多

关键词 CXCR4基因 短发卡状RNA 膀胱癌 侵袭

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血管紧张素抑制剂缬沙坦对膀胱癌细胞表达的影响

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作者 霍倩 杨德林 +5 位作者 杨定芳 颜汝平 王海峰 韦海荣 丁祥黎 唐钊然 《中国全科医学》 CAS CSCD 北大核心 2015年第11期1274-1279,共6页

目的探讨缬沙坦对不同侵袭能力的膀胱癌细胞株血管紧张素Ⅱ(AngⅡ)1型受体(AT1R)抗原、基质金属蛋白酶2(MMP-2)、基质金属蛋白酶9(MMP-9)表达的影响。方法对三株不同侵袭能力的细胞株EJM3、EJ、BIU-87进行培养,使用10-2、10-3、10-4、1... 目的探讨缬沙坦对不同侵袭能力的膀胱癌细胞株血管紧张素Ⅱ(AngⅡ)1型受体(AT1R)抗原、基质金属蛋白酶2(MMP-2)、基质金属蛋白酶9(MMP-9)表达的影响。方法对三株不同侵袭能力的细胞株EJM3、EJ、BIU-87进行培养,使用10-2、10-3、10-4、10-5、10-6、10-7、10-8、10-9mol/L缬沙坦的1640培养液作用于细胞株,采用细胞生长状态测定法检测细胞增殖状况,确定最终药物浓度。根据细胞株不同分为EJ-M3组、EJ组、BIU-87组,每组细胞分为实验亚组和对照亚组,实验亚组加入含有10-3mol/L缬沙坦的RPMI-1640培养液,对照亚组仅加入无血清RPMI-1640培养液,培养48 h后抽提相应蛋白和mRNA。采用Western blotting法测定AT1R、MMP-2和MMP-9蛋白表达水平,采用RT-PCR法检测AT1R、MMP-2和MMP-9基因的相对表达。采用细胞划痕实验、Transwell体外细胞侵袭实验检测3种膀胱癌细胞株的迁移能力和侵袭能力的改变。结果依据MTT实验测定出的生长曲线选择浓度为10-3mol/L的缬沙坦作为最终药物浓度。Western blotting电泳结果显示,AT1R、MMP-2、MMP-9在3个细胞株中均有表达,但均较对照亚组表达明显降低。3组细胞株对照亚组AT1R、MMP-2、MMP-9 mRNA相对表达均高于实验亚组(P<0.05)。3组细胞株实验亚组细胞迁移距离短于对照亚组(t=7.24、6.14、4.30,P<0.01)。3组细胞株实验亚组侵入细胞数量较对照亚组少(t=6.24、4.33、2.81,P<0.01)。结论缬沙坦可有效抑制膀胱癌细胞AT1R表达,进而抑制MMP-2和MMP-9表达。AT1R抑制剂有可能成为一种新的抑制膀胱癌转移和延长膀胱癌患者生存期的药物。 展开更多

关键词 膀胱肿瘤 受体 血管紧张素 1型 缬沙坦 基质金属蛋白酶类

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双镜联合治疗复杂性肾结石 被引量：32

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作者 平秦榕 颜汝平 +6 位作者 王剑松 陈戬 柯昌兴 王海峰 詹辉 梁剑伟 王伟 《中国微创外科杂志》 CSCD 北大核心 2017年第4期317-321,共5页

目的探讨经皮肾镜联合输尿管软镜钬激光碎石术治疗复杂性肾结石的临床疗效。方法选取2014年10月~2015年10月复杂性肾结石40例,随机分为观察组和对照组,每组20例。观察组采用皮肾镜联合输尿管软镜钬激光碎石术,对照组采用经皮肾镜取石术... 目的探讨经皮肾镜联合输尿管软镜钬激光碎石术治疗复杂性肾结石的临床疗效。方法选取2014年10月~2015年10月复杂性肾结石40例,随机分为观察组和对照组,每组20例。观察组采用皮肾镜联合输尿管软镜钬激光碎石术,对照组采用经皮肾镜取石术,比较2组手术时间、术中出血量、住院时间、一期手术结石清除率、术后并发症发生率等情况。结果 40例手术均顺利完成。观察组手术时间明显短于对照组[(80.2±12.0)min vs.(104.4±9.7)min,t=-7.014,P=0.000],2组术中出血量[(109.6±7.1)ml vs.(112.7±5.6)ml,t=-1.533,P=0.134]和住院时间差异无显著性[(6.8±1.3)d vs.(7.0±1.1)d,t=-0.525,P=0.602]。观察组一期手术结石清除率明显高于对照组[85.0%(17/20)vs.50.0%(10/20),Fisher精确检验,P=0.020],并发症发生率明显低于对照组[10.0%(2/20)vs.45.0%(9/20),Fisher精确检验,P=0.015]。随访3个月,观察组2例二期行体外震波碎石术(extracorporeal shock wave lithotripsy,ESWL),对照组4例,2组比较无统计学差异(Fisher精确检验,P=0.331);对照组二期行经皮肾镜取石术3例,观察组无一例,2组比较无统计学差异(Fisher精确检验,P=0.115)。术后1、3个月复查,2组结石清除率无显著差异[90.0%(18/20)vs.75.0%(15/20),Fisher精确检验,P=0.204;95.0%(19/20)vs.90.0%(18/20),Fisher精确检验,P=0.500]。结论经皮肾镜联合输尿管软镜钬激光碎石术治疗复杂性肾结石疗效显著,具有结石清除率高、并发症少等优点,值得临床推广应用。 展开更多

关键词 经皮肾镜 输尿管软镜 钬激光 复杂性肾结石

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ctDNA在转移性去势抵抗性前列腺癌诊断中的应用现状

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作者 王自勇 王海峰 +4 位作者 李海皓 王伟 刘靖宇 丁明霞 王剑松 《中国肿瘤临床》 CAS CSCD 北大核心 2019年第15期804-807,共4页

转移性去势抵抗性前列腺癌(metastatic castration-resistant prostate cancer,mCRPC)是不可治愈的,严重威胁着男性患者的 健康,也是人类恶性肿瘤治疗的一个重要难题。循环肿瘤DNA( circulating tumor DNA,ctDNA)是 一种非侵入性、可重... 转移性去势抵抗性前列腺癌(metastatic castration-resistant prostate cancer,mCRPC)是不可治愈的,严重威胁着男性患者的 健康,也是人类恶性肿瘤治疗的一个重要难题。循环肿瘤DNA( circulating tumor DNA,ctDNA)是 一种非侵入性、可重复的评估肿 瘤基因组的工具,具有全面了解恶性肿瘤的潜力,在mCRPC中也进行了深入研究。本文将对ctDNA在mCRPC中的检测情况,以 及用于mCRPC患者监测及对耐药性机制等相关研究现状进行综述,并提出对未来可能有参考价值的研究方向。 展开更多

关键词 转移性去势抵抗性前列腺癌 循环肿瘤DNA 基因检测 生物标志物

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