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基质细胞衍生因子-1及其受体CXCR4对膀胱癌细胞侵袭能力及腔内种植的影响
被引量：
10
1
作者
杨德林
霍倩
+5 位作者
王乙水
杨旭升
王凯
王剑松
徐鸿毅
王海峰
《医学研究生学报》
CAS
北大核心
2014年第10期1028-1032,共5页
目的复发和转移是膀胱癌治疗失败的主要原因。文中利用RNA干扰技术使趋化性细胞因子受体CXCR4基因沉默,探讨其沉默对膀胱癌细胞侵袭能力及腔内种植的影响。方法设计合成CXCR4的特异性短发卡状RNA(short hairpin,shRNA),筛选出能够稳定抑...
目的复发和转移是膀胱癌治疗失败的主要原因。文中利用RNA干扰技术使趋化性细胞因子受体CXCR4基因沉默,探讨其沉默对膀胱癌细胞侵袭能力及腔内种植的影响。方法设计合成CXCR4的特异性短发卡状RNA(short hairpin,shRNA),筛选出能够稳定抑制CXCR4表达的细胞,并分为空白对照组、阴性对照质粒组、pshRNA-CXCR4-1实验组,pshRNA-CXCR4-2实验组,应用RT-PCR和免疫荧光分别检测CXCR4 mRNA和蛋白表达水平,应用Boyden小室模型检测体外侵袭能力的变化。将20只裸小鼠随机数表法分为实验裸小鼠和对照裸小鼠,各10只。向实验裸小鼠膀胱内注入100μL ShRNA-EJ-M3,向对照裸小鼠膀胱内注入100μL EJ-M3细胞,检测shRNA-CXCR4对膀胱癌细胞腔内种植能力的影响。结果稳定转染后的pshRNA-CXCR4-1实验组CXCR4 mRNA表达(62.05±1.35)较空白对照组(174.38±1.96)和阴性对照组(166.27±1.82)明显下降(P<0.05),pshRNA-CXCR4-2实验组CXCR4 mRNA表达水平(182.58±4.2)与空白对照组和阴性对照组比较,差异无统计学意义(P>0.05);免疫荧光实验中pshRNA-CXCR4-1实验组红色免疫荧光细胞数(32.24±2.23)较空白对照组(89.61±4.47)和阴性对照组(92.45±3.68)降低(P<0.05);pshRNA-CXCR4-2实验组红色免疫荧光细胞数(76.87±5.11)与空白对照组和阴性对照组比较,差异无统计学意义(P>0.05)。体外趋化侵袭实验结果显示,pshRNACXCR4-1实验组穿膜细胞数(39.67±8.45)明显少于空白对照组(135.33±9.28)及阴性对照组(123.63±6.36),差异有统计学意义(P<0.05)。实验裸小鼠腔内种植能力与对照裸小鼠比较,差异有统计学意义(10%vs 70%,P<0.01)。结论以CXCR4为靶向的特异性shRNA能有效抑制膀胱癌细胞基因CXCR4的表达,显著降低膀胱癌细胞体外侵袭能力及腔内种植能力,SDF-1/CXCR4生物轴有望成为预防和治疗膀胱癌侵袭和转移的重要靶点之一。
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关键词
CXCR4基因
短发卡状RNA
膀胱癌
侵袭
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题名
基质细胞衍生因子-1及其受体CXCR4对膀胱癌细胞侵袭能力及腔内种植的影响
被引量：
10
1
作者
杨德林
霍倩
王乙水
杨旭升
王凯
王剑松
徐鸿毅
王海峰
机构
昆明
医科
大学
第二
附属
医院
泌
尿
外科
(
云南省
泌
尿
外科
研究所
)
出处
《医学研究生学报》
CAS
北大核心
2014年第10期1028-1032,共5页
基金
云南省科技计划项目(2007C0016R
2008ZC135M)
文摘
目的复发和转移是膀胱癌治疗失败的主要原因。文中利用RNA干扰技术使趋化性细胞因子受体CXCR4基因沉默,探讨其沉默对膀胱癌细胞侵袭能力及腔内种植的影响。方法设计合成CXCR4的特异性短发卡状RNA(short hairpin,shRNA),筛选出能够稳定抑制CXCR4表达的细胞,并分为空白对照组、阴性对照质粒组、pshRNA-CXCR4-1实验组,pshRNA-CXCR4-2实验组,应用RT-PCR和免疫荧光分别检测CXCR4 mRNA和蛋白表达水平,应用Boyden小室模型检测体外侵袭能力的变化。将20只裸小鼠随机数表法分为实验裸小鼠和对照裸小鼠,各10只。向实验裸小鼠膀胱内注入100μL ShRNA-EJ-M3,向对照裸小鼠膀胱内注入100μL EJ-M3细胞,检测shRNA-CXCR4对膀胱癌细胞腔内种植能力的影响。结果稳定转染后的pshRNA-CXCR4-1实验组CXCR4 mRNA表达(62.05±1.35)较空白对照组(174.38±1.96)和阴性对照组(166.27±1.82)明显下降(P<0.05),pshRNA-CXCR4-2实验组CXCR4 mRNA表达水平(182.58±4.2)与空白对照组和阴性对照组比较,差异无统计学意义(P>0.05);免疫荧光实验中pshRNA-CXCR4-1实验组红色免疫荧光细胞数(32.24±2.23)较空白对照组(89.61±4.47)和阴性对照组(92.45±3.68)降低(P<0.05);pshRNA-CXCR4-2实验组红色免疫荧光细胞数(76.87±5.11)与空白对照组和阴性对照组比较,差异无统计学意义(P>0.05)。体外趋化侵袭实验结果显示,pshRNACXCR4-1实验组穿膜细胞数(39.67±8.45)明显少于空白对照组(135.33±9.28)及阴性对照组(123.63±6.36),差异有统计学意义(P<0.05)。实验裸小鼠腔内种植能力与对照裸小鼠比较,差异有统计学意义(10%vs 70%,P<0.01)。结论以CXCR4为靶向的特异性shRNA能有效抑制膀胱癌细胞基因CXCR4的表达,显著降低膀胱癌细胞体外侵袭能力及腔内种植能力,SDF-1/CXCR4生物轴有望成为预防和治疗膀胱癌侵袭和转移的重要靶点之一。
关键词
CXCR4基因
短发卡状RNA
膀胱癌
侵袭
Keywords
CXCR4 ShRNA Bladder cancer Invasion
分类号
R737.14 [医药卫生—肿瘤]
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作者
出处
发文年
被引量
操作
1
基质细胞衍生因子-1及其受体CXCR4对膀胱癌细胞侵袭能力及腔内种植的影响
杨德林
霍倩
王乙水
杨旭升
王凯
王剑松
徐鸿毅
王海峰
《医学研究生学报》
CAS
北大核心
2014
10
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