基于单细胞测序探索卵巢癌上皮细胞异质性和肿瘤微环境免疫特征

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作者 李荣姬 赵丽珠 杨丽华 《中国肿瘤生物治疗杂志》 北大核心 2025年第7期754-760,共7页

目的:基于公开的卵巢癌(OC)单细胞测序数据并利用生物信息学方法构建OC上皮细胞亚型,探究上皮细胞异质性及其对OC肿瘤微环境(TME)的影响。方法:使用GSE118828卵巢癌单细胞数据集的分析得到的8种细胞类型及基因表达矩阵结果,使用反卷积... 目的:基于公开的卵巢癌(OC)单细胞测序数据并利用生物信息学方法构建OC上皮细胞亚型,探究上皮细胞异质性及其对OC肿瘤微环境(TME)的影响。方法:使用GSE118828卵巢癌单细胞数据集的分析得到的8种细胞类型及基因表达矩阵结果,使用反卷积方法估计整体转录组测序(bulk RNA-seq)数据中的细胞组成,依据上皮细胞丰度将OC分为高上皮细胞亚型(C1型)和低上皮细胞亚型(C2型)。分析C1型与C2型患者的生存时间及免疫微环境差异。基于C1、C2型及OC早期(Ⅰ~Ⅱ期)、晚期(Ⅲ~Ⅳ期)组间的差异表达基因(DEG),筛选与OC进展相关的上皮细胞相关基因并分析其对TME的影响。通过人类蛋白质图谱(HPA)数据库数据验证OC进展中上皮细胞相关基因的蛋白表达水平。结果:C1型患者的OS明显优于C2型患者(P<0.05)。C1、C2型具有完全不同的免疫微环境浸润特性,C1型中辅助性T(Th)细胞、M1型巨噬细胞和激活的树突状细胞浸润程度显著高于C2型(均P<0.05)。晚期高上皮细胞OC患者HAS1、DAPL1、ADH1B基因表达增加(均P<0.05),同时,DAPL1基因在OC中的表达与巨噬细胞、Treg细胞的浸润程度呈正相关(P<0.05)。HPA数据库数据证实,DAPL1蛋白在OC组织中表达显著增加。结论:卵巢癌高上皮细胞亚型可能由于Th细胞、M1型巨噬细胞和激活的树突状细胞的高度浸润发挥抗肿瘤作用;上皮细胞相关基因DAPL1的高表达可能会诱导巨噬细胞、Treg细胞的浸润程度,从而促进OC的进展。 展开更多

关键词 卵巢癌 上皮细胞 肿瘤微环境 单细胞测序

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液体活检在妇科恶性肿瘤中的研究和应用 被引量：3

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作者 丁予露 刘洋 周红林 《临床与实验病理学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2020年第5期560-562,共3页

妇科恶性肿瘤对女性的健康问题构成严重威胁,尚缺乏早期精准诊断及有效的治疗方法。近10年来,液体活检技术及其临床应用均取得突破性进展,逐步被应用到临床肿瘤领域,能早期发现肿瘤病变,实时监测肿瘤的异质性及耐药性变化,并实施精准药... 妇科恶性肿瘤对女性的健康问题构成严重威胁,尚缺乏早期精准诊断及有效的治疗方法。近10年来,液体活检技术及其临床应用均取得突破性进展,逐步被应用到临床肿瘤领域,能早期发现肿瘤病变,实时监测肿瘤的异质性及耐药性变化,并实施精准药物和个体化治疗。液体活检逐渐显示其在妇科恶性肿瘤检测的独特优势和应用前景,可评估肿瘤异质性、监测耐药性、评价治疗反应,并在临床确诊前检测疾病的潜在进展。该文现就液体活检在妇科恶性肿瘤中的研究进展作一综述,并展望该领域的发展趋势。 展开更多

关键词 子宫内膜肿瘤 卵巢癌 液体活检 文献综述

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肥胖男性不育患者精子线粒体膜电位、游离脂肪酸、活性氧的关系 被引量：26

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作者 白双勇 王剑松 赵庆华 《中国医科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2015年第7期653-656,共4页

目的探讨肥胖男性不育患者精子线粒体膜电位的改变,以及线粒体膜电位与精浆中游离脂肪酸、活性氧之间的关系。方法按照研究条件,随机整群选取正常生育男性51人(对照组)、正常体重指数不育男性36人(正常体重不育组)、超重不育男性44人(... 目的探讨肥胖男性不育患者精子线粒体膜电位的改变,以及线粒体膜电位与精浆中游离脂肪酸、活性氧之间的关系。方法按照研究条件,随机整群选取正常生育男性51人(对照组)、正常体重指数不育男性36人(正常体重不育组)、超重不育男性44人(超重不育组)、肥胖不育男性45人(肥胖不育组)。精液常规分析,ELSA法检测精浆中游离脂肪酸、活性氧,流式细胞仪检测精子线粒体膜电位。结果线粒体膜电位正常率的比较中正常体重不育组(27.34%±13.38%)、超重不育组(28.26%±9.76%)、肥胖不育组(25.27%±7.51%)均低于对照组(35.12%±15.90%),差异有统计学意义(P<0.01)。肥胖不育组中线粒体膜电位正常率虽然低于正常体重不育组及超重不育组,但差异无统计学意义。精子线粒体膜电位正常率与精子前向运动率呈明显正相关(r=0.29,P<0.01)。精浆中游离脂肪酸与精浆中活性氧呈明显正相关(r=0.30,P<0.01),精浆中活性氧与精子正常线粒体膜电位呈明显负相关(r=-0.24,P<0.01)。结论超重及肥胖男性不育患者精浆中游离脂肪酸增高,引起活性氧增加,活性氧使得线粒体膜电位下降,最终可能导致精子运动能力下降。治疗时应考虑建议患者减少高脂餐、适当运动。 展开更多

关键词 肥胖 男性不育 活性氧 游离脂肪酸 线粒体膜电位

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长链非编码RNA癌易感性候选基因2在卵巢癌中的表达及其对SKOV3细胞恶性表型的影响 被引量：9

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作者 张素仙 聂小凤 +2 位作者 张琴 冷天艳 杨丽华 《实用医学杂志》 CAS 北大核心 2019年第2期191-195,共5页

目的探讨长链非编码RNA癌易感性候选基因2(LnCRNA CASC2)在卵巢癌中的表达及对卵巢癌SKOV3细胞恶性表型的影响。方法 q RT-PCR检测18例卵巢癌及正常癌旁组织;5株人卵巢癌细胞株A2780、Caov3、HO8910、SKOV3、OVCAR3和人正常卵巢上皮HOE... 目的探讨长链非编码RNA癌易感性候选基因2(LnCRNA CASC2)在卵巢癌中的表达及对卵巢癌SKOV3细胞恶性表型的影响。方法 q RT-PCR检测18例卵巢癌及正常癌旁组织;5株人卵巢癌细胞株A2780、Caov3、HO8910、SKOV3、OVCAR3和人正常卵巢上皮HOEpiC细胞LnCRNA CASC2的相对表达量;通过重组质粒在人卵巢癌SKOV3细胞中过表达LnCRNA CASC2,采用MTT法、流式细胞术、侵袭实验、Western blot检测过表达LnCRNA CASC2后SKOV3细胞增殖、凋亡、侵袭及Bcl-2、Bax蛋白表达情况。结果 LnCRNA CASC2在卵巢癌组织、卵巢癌细胞中表达水平低于对应的癌旁组织及卵巢上皮细胞(P <0.01)。LnCRNA CASC2重组质粒转染SKOV3细胞后可显著抑制细胞的增殖能力、侵袭能力,促进细胞凋亡(P <0.05)。过表达LnCRNA CASC2后,SKOV3细胞Bcl-2表达显著降低、Bax蛋白表达显著增加(P <0.05)。结论 LnCRNA CASC2在卵巢癌组织中表达降低,卵巢癌细胞中过表达LnCRNA CASC2后细胞恶性能力降低,其在卵巢癌中可能发挥抑癌基因的作用,值得进一步研究。 展开更多

关键词 长链非编码RNA 癌易感侯选基因 卵巢癌 表达 恶性表型

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输卵管结核超声误诊为恶性肿瘤11例分析 被引量：7

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作者 张素仙 刘惠谨 +2 位作者 胡万芹 杨晓玲 张鸿 《中国防痨杂志》 CAS 2013年第2期149-150,共2页

输卵管结核是结核分枝杆菌侵入机体后,在输卵管引起的特异性炎症,属于女性盆腔结核的一部分,曾被认为是妇科疾病中的少见病。Khanna等报道,全球女性生殖器结核有逐年上升趋势。由于结核分枝杆菌对输卵管破坏严重,输卵管结核可能残留瘢... 输卵管结核是结核分枝杆菌侵入机体后,在输卵管引起的特异性炎症,属于女性盆腔结核的一部分,曾被认为是妇科疾病中的少见病。Khanna等报道,全球女性生殖器结核有逐年上升趋势。由于结核分枝杆菌对输卵管破坏严重,输卵管结核可能残留瘢痕、狭窄等不可逆病变,应用足够的抗结核药物治愈后获得正常妊娠的机会甚微，宫外孕和早期流产、不孕症较为常见。结核病变对输卵管和子宫内膜的破坏是不可逆的，故患者即使在结核病治愈后，妊娠率也是极低的，给患者身体和心理带来很大痛苦。 展开更多

关键词 输卵管结核 恶性肿瘤 超声误诊 结核分枝杆菌 女性生殖器结核 女性盆腔结核 结核病变 特异性炎症

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阻断PD-L1/PD-1途径增强顺铂化疗效果的实验研究 被引量：11

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作者 魏洁 寇蓬 +2 位作者 廉阳秧 梁宏 杨丽华 《实用医学杂志》 CAS 北大核心 2016年第1期47-50,共4页

目的:探讨抗PD-1抗体阻断PD-L1/PD-1途径对顺铂的抗肿瘤效应以及抗肿瘤免疫力的影响。方法:建立TC-1肿瘤细胞C57BL/6小鼠模型,分为4组(n=4),绘制肿瘤生长曲线及小鼠生存曲线,并取肿瘤组织,免疫组化法检测肿瘤组织中PD-L1、CD8^+T细胞的... 目的:探讨抗PD-1抗体阻断PD-L1/PD-1途径对顺铂的抗肿瘤效应以及抗肿瘤免疫力的影响。方法:建立TC-1肿瘤细胞C57BL/6小鼠模型,分为4组(n=4),绘制肿瘤生长曲线及小鼠生存曲线,并取肿瘤组织,免疫组化法检测肿瘤组织中PD-L1、CD8^+T细胞的表达。结果:(1)顺铂组、PD-1组及联合用药组均可显著抑制肿瘤生长及延长小鼠生存时间,联合用药组效果最为明显(P<0.05)。(2)顺铂组肿瘤组织PD-L1表达显著增加,联合用药组PD-L1表达显著下降(P<0.05)。(3)顺铂组肿瘤组织中CD8^+T细胞减少,联合用药组CD8^+T细胞表达显著增加(P<0.05)。结论:PD-1抗体阻断PD-L1/PD-1通路联合顺铂可提高机体抗肿瘤免疫,发挥免疫细胞抗肿瘤效应,增强顺铂的化疗效果。 展开更多

关键词 宫颈肿瘤 顺铂 PD-L1/PD-1通路 免疫治疗 肿瘤模型

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血根碱通过下调TGF-β1/Smad通路抑制紫杉醇耐药卵巢癌细胞生长 被引量：5

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作者 王妍妍 张琴 +1 位作者 冷天艳 杨丽华 《天然产物研究与开发》 CAS CSCD 北大核心 2017年第7期1127-1131,共5页

培养紫杉醇耐药卵巢癌细胞A2780/Taxol,分为对照组与血根碱组,对照组不加血根碱,血根碱组应用不同浓度血根碱(0.67μmol/L、1.0μmol/L、2.0μmol/L)处理,应用MTT法、克隆形成、流式细胞检测和Western blot等实验方法检测血根碱对A2780/... 培养紫杉醇耐药卵巢癌细胞A2780/Taxol,分为对照组与血根碱组,对照组不加血根碱,血根碱组应用不同浓度血根碱(0.67μmol/L、1.0μmol/L、2.0μmol/L)处理,应用MTT法、克隆形成、流式细胞检测和Western blot等实验方法检测血根碱对A2780/Taxol细胞增殖、凋亡、周期的影响及Bax、TGF-β1、Smad3蛋白的表达情况。结果显示,2.0μmol/L浓度的血根碱可显著抑制A2780/Taxol细胞增殖,与对照组相比,Bax表达显著上调,TGF-β1和Smad3蛋白表达水平明显下调(P<0.05)。血根碱通过下调TGF-β1/Smad通路,促进细胞凋亡而抑制紫杉A2780/Taxol细胞生长。 展开更多

关键词 血根碱 卵巢癌 紫杉醇耐药 TGF-Β1/SMAD

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男性不育患者体重指数、精浆中谷胱甘肽过氧化物酶、活性氧与精液质量的关系 被引量：5

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作者 白双勇 王剑松 赵庆华 《中国医科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2014年第11期1038-1040,共3页

随着体重指数的增加,畸形精子率、精浆中活性氧也随之增加,而谷胱甘肽过氧化物酶及精液量减少,是肥胖男性生育力下降的原因之一。

关键词 体重指数 谷胱甘肽过氧化物酶 活性氧 肥胖 男性 不育

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基于Oncomine数据库分析ARID5B基因在卵巢癌中的表达意义及血根碱的干预研究 被引量：5

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作者 杨艳 殷雪琴 +2 位作者 倪娜 张琴 杨丽华 《实用妇产科杂志》 CAS CSCD 北大核心 2019年第7期539-543,共5页

目的:通过挖掘Oncomine数据库中的相关数据,分析ARID5B基因在卵巢癌中的表达及临床意义,并探讨血根碱对卵巢癌细胞中ARID5B基因的干预作用。方法:收集Oncomine数据库中关于ARID5B研究的信息,对其在卵巢癌的水平变化进行荟萃分析,采用Kap... 目的:通过挖掘Oncomine数据库中的相关数据,分析ARID5B基因在卵巢癌中的表达及临床意义,并探讨血根碱对卵巢癌细胞中ARID5B基因的干预作用。方法:收集Oncomine数据库中关于ARID5B研究的信息,对其在卵巢癌的水平变化进行荟萃分析,采用Kaplan-Meier法分析ARID5B水平与卵巢癌患者生存时间之间的关系,探讨其临床意义。卵巢癌SKOV3细胞,分为对照组和血根碱组,48小时后提取总RNA,用全基因芯片检测基因表达谱,筛选差异基因,探讨血根碱对卵巢癌SKOV3细胞ARID5B基因表达的影响。结果:分析Oncomine数据库中收集的卵巢癌和正常卵巢组织ARID5B基因水平的13项研究数据,发现卵巢癌组织中ARID5B基因的表达显著低于正常卵巢组织(P<0.05)。通过生存分析发现低表达ARID5B基因的卵巢癌患者无病生存期(PFS)、总生存期(OS)明显长于高表达者,高表达患者的预后更差(P<0.05)。血根碱显著上调卵巢癌SKOV3细胞ARID5B基因表达丰度,差异有统计学意义(P<0.05)。结论:ARID5B基因在卵巢癌组织中呈现低表达,其表达丰度与卵巢癌患者预后呈负相关,该基因可能是血根碱干预卵巢癌细胞的一个靶点。 展开更多

关键词 卵巢癌 ARID5B Oncomine数据库 血根碱

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CRISPR/Cas系统作用机制及其在寄生虫学研究中的应用 被引量：5

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作者 宋海洋 吴杰 +1 位作者 邹丰才 刘洋 《中国畜牧兽医》 CAS 北大核心 2017年第1期208-213,共6页

CRISPR/Cas系统是一种存在于细菌和古细菌的免疫系统,该系统包括能靶向入侵宿主的病毒或外源DNA核酸片段的RNA和切割该片段的Cas9核酸酶。与其他基因编辑技术相比,该系统更易操作,效率更高,成本更低,被广泛应用于各种基因工程领域。作... CRISPR/Cas系统是一种存在于细菌和古细菌的免疫系统,该系统包括能靶向入侵宿主的病毒或外源DNA核酸片段的RNA和切割该片段的Cas9核酸酶。与其他基因编辑技术相比,该系统更易操作,效率更高,成本更低,被广泛应用于各种基因工程领域。作者综述了CRISPR/Cas系统的作用机制及其在寄生虫方面的应用。 展开更多

关键词 CRISPR/Cas系统 Cas9核酸酶 基因编辑

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紫杉醇对宫颈癌TC-1细胞表面PD-L1表达的影响 被引量：2

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作者 杨静 肖肖 +2 位作者 魏洁 寇蓬 杨丽华 《医药导报》 CAS 2015年第8期1028-1031,共4页

目的探讨紫杉醇对宫颈癌TC-1细胞程序性凋亡配体1(PD-L1)表达的影响及其机制。方法 1将细胞分为紫杉醇组及紫杉醇联合蛋白激酶D(PKD)阻断药(G6976),每组设4个浓度梯度,各5个复孔,分别加入对应浓度试剂,MTT法检测紫杉醇对TC-1细胞活力... 目的探讨紫杉醇对宫颈癌TC-1细胞程序性凋亡配体1(PD-L1)表达的影响及其机制。方法 1将细胞分为紫杉醇组及紫杉醇联合蛋白激酶D(PKD)阻断药(G6976),每组设4个浓度梯度,各5个复孔,分别加入对应浓度试剂,MTT法检测紫杉醇对TC-1细胞活力的影响及G6976对紫杉醇IC50值的影响。2将细胞分为0.9%氯化钠溶液组及紫杉醇组,每组5个复孔,分别加入对应浓度试剂,免疫组化法检测紫杉醇对TC-1细胞PD-L1表达的影响。3将细胞分成阴性对照组、G6976组、紫杉醇组、紫杉醇联合G6976组4组,每组5个复孔,分别加入对应浓度试剂,免疫组化法检测紫杉醇、G6976对TC-1细胞PD-L1表达的影响。结果紫杉醇组紫杉醇对TC-1细胞的IC50值为40.0μg·m L-1,紫杉醇联合G6976组紫杉醇对TC-1细胞IC50值为38.9μg·m L-1,两组IC50值差异无统计学意义(P>0.05)。紫杉醇处理TC-1细胞24 h后PD-L1的表达为(88.48±13.44)%,显著高于阴性对照组(39.59±5.99)%(P<0.05)。紫杉醇联合G6976处理TC-1细胞24 h后PD-L1表达为(79.7±4.7)%,显著低于紫杉醇组(96.8±2.5)%(P<0.05)。结论紫杉醇可增加TC-1细胞PD-L1表达,阻断PKD途径可显著抑制PD-L1表达增加的程度,紫杉醇可能是通过PKD途径发挥作用。 展开更多

关键词 紫杉醇 程序性凋亡配体1 蛋白激酶D 癌 宫颈

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Twist在低氧微环境中对宫颈癌Hela细胞顺铂耐药的作用及可能机制 被引量：2

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作者 寇蓬 徐勤 杨丽华 《医学研究生学报》 CAS 北大核心 2015年第8期815-819,共5页

目的耐药是影响宫颈癌患者的化疗效果及预后的主要原因。探讨Twist在低氧微环境中宫颈癌Hela细胞顺铂耐药的作用及可能机制。方法将Hela细胞分无药对照组、常氧A组(不含Co Cl2)、低氧A组(加入含终浓度为150μmol/L Co Cl2的培养基),6 h... 目的耐药是影响宫颈癌患者的化疗效果及预后的主要原因。探讨Twist在低氧微环境中宫颈癌Hela细胞顺铂耐药的作用及可能机制。方法将Hela细胞分无药对照组、常氧A组(不含Co Cl2)、低氧A组(加入含终浓度为150μmol/L Co Cl2的培养基),6 h后分别向常氧A组、低氧A组加入不同浓度梯度顺铂(10-3、10-4、10-5、10-6、10-7mol/L),24 h后加MTT,测IC50及生长抑制率。以二氯化钴(Co Cl2)处理Hela细胞模拟低氧微环境;MTT法筛选低氧条件下顺铂的最适作用浓度及时间;设置常氧B组、顺铂组、低氧B组、低氧顺铂组,免疫荧光法和Western blot法检测Twist、MDR1的表达情况。结果 MTT结果示:常氧A组顺铂IC50为10-5.3mol/L,低氧A组顺铂IC50为10-4.5mol/L。当顺铂浓度≥10-5mol/L时,常氧A组、低氧A组对Hela细胞抑制率较0 mol/L顺铂差异具有统计学意义(P<0.05),且常氧A组与低氧A组抑制率差异有统计学意义(P<0.05)。当作用时间≥24 h时,常氧A组、低氧A组对Hela细胞抑制率较0 h时差异具有统计学意义(P<0.05),且常氧A组与低氧A组抑制率差异有统计学意义(P<0.05)。免疫荧光结果示:顺铂组、低氧B组、低氧顺铂组Hela细胞中Twist蛋白表达(20.81±2.07、24.25±4.51、33.14±4.24)较常氧B组(13.08±2.39)显著增高(P<0.05),MDR1蛋白表达(35.26±8.41、60.13±22.32、76.00±9.96)亦较常氧B组(29.57±12.80)增高(P<0.05);低氧B组及低氧顺铂组Twist与MDR1表达呈正相关(r=0.639,P<0.05)。Western blot结果示:顺铂组、低氧B组、低氧顺铂组Hela细胞中Twist蛋白表达(0.777±0.066、0.786±0.010、0.990±0.052)较常氧B组(0.631±0.015)增高(P<0.05),MDR1蛋白表达(0.923±0.038、0.896±0.015、1.049±0.037)亦较常氧B组(0.661±0.085)增高(P<0.05;低氧B组及低氧顺铂组Twist与MDR1表达呈正相关(r=0.686,P<0.05;r=0.546,P<0.05)。结论低氧条件下Hela细胞对顺铂的敏感性下降,可能是低氧激活Twist,上调MDR1表达从而引起宫颈癌Hela细胞耐药。 展开更多

关键词 低氧微环境 HELA细胞 TWIST 多耐药基因-1 顺铂耐药性

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低氧对宫颈癌Hela细胞生长侵袭能力的影响及机制研究 被引量：1

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作者 寇蓬 徐勤 +2 位作者 刘建军 杨静 杨丽华 《实用医学杂志》 CAS 北大核心 2014年第4期522-524,共3页

目的:探讨低氧对宫颈癌Hela细胞生长转移能力的影响及可能机制。方法:以二氯化钴(CoCl2)处理Hela细胞,模拟细胞低氧微环境,划痕实验检测低氧细胞迁移能力的变化;细胞免疫荧光法检测低氧细胞低氧诱导因子-1(hypoxia inducible factor-l,H... 目的:探讨低氧对宫颈癌Hela细胞生长转移能力的影响及可能机制。方法:以二氯化钴(CoCl2)处理Hela细胞,模拟细胞低氧微环境,划痕实验检测低氧细胞迁移能力的变化;细胞免疫荧光法检测低氧细胞低氧诱导因子-1(hypoxia inducible factor-l,HIF-1)、Vimentin蛋白表达。结果:150 mmol/L CoCl2作用于Hela细胞6 h显示为细胞增殖促进作用,48 h低氧组Hela细胞迁移能力显著高于常氧组;低氧组Hela细胞HIF-1α、Vimentin表达较常氧组显著增高,HIF-1α、Vimentin表达呈正相关(P<0.05)。结论:低氧诱导宫颈癌细胞HIF-1α表达增加,HIF-1α上调Vimentin使其获得侵袭、转移能力。 展开更多

关键词 宫颈肿瘤 HELA细胞 低氧 低氧诱导因子-1 波形蛋白

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