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题名M1表型的小胶质细胞外泌体对血脑屏障功能的影响
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作者
蒋雯
邓琼花
梅松
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机构
昆明医科大学第一附属医院神经内科
昆明医科大学第一附属医院心脏大血管外科
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出处
《重庆医科大学学报》
CAS
CSCD
北大核心
2024年第2期153-157,共5页
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基金
云南省教育厅科学研究基金资助项目(编号:2022J0199)
云南省科技厅-昆明医科大学联合基金资助项目(编号:202201AY070001-049)。
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文摘
目的:研究M1表型的小胶质细胞外泌体(M1 microglia-derived exosome,M1-exo)对体外血脑屏障(blood-brain bar⁃rier,BBB)功能及血管内皮细胞间紧密连接蛋白表达的影响。方法:用脂多糖(lipopolysaccharide,LPS)刺激小鼠小胶质细胞来源的细胞系BV2细胞,流式技术检测其向M1型极化情况,分离提取外泌体。用小鼠脑微血管内皮细胞系b.End3细胞与原代培养的小鼠星形胶质细胞构建体外BBB模型,随机分为3组:b.End3细胞正常培养组(b.End3组)、b.End3细胞+25µg/mL正常BV2细胞来源外泌体(BV2-derived exosome,BV2-exo)组(b.End3+BV2-exo组)、b.End3细胞+25µg/mL M1表型的小胶质细胞来源外泌体组(b.End3+M1-exo组)。按实验分组将不同来源外泌体与BBB模型共培养,检测各组的跨膜电阻(transendothelial electrical resistance,TEER)、荧光黄通过率,免疫印迹法(Western blot,WB)检测紧密连接复合物蛋白Claudin-1、Occludin、ZO-1及JAM蛋白的表达。结果:①小胶质细胞向M1型极化成功,其细胞标志物CD16/32阳性率较对照组明显升高(P=0.023);②与M1-exo共培养后,体外BBB模型的TEER明显下降(P=0.000),对荧光黄的透过率明显增加(P=0.000);③与b.End3组和b.End3+BV2-exo组相比,b.End3+M1-exo组的Claudin-1、Occludin及ZO-1蛋白的表达水平明显下降。结论:M1-exo可以破坏BBB的完整性,影响其功能。
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关键词
M1表型的小胶质细胞
外泌体
体外血脑屏障模型
缺血性脑卒中
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Keywords
M1 microglia
exosome
in-vitro blood-brain barrier model
ischemic stroke
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分类号
R743.32
[医药卫生—神经病学与精神病学]
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