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H19介导miR-let-7的分子机制及其在妊娠期糖尿病中的作用研究 被引量：11
1
作者 马敬 唐丹 +1 位作者 张燕 敬晓涛 《中国全科医学》 CAS 北大核心 2019年第8期942-946,共5页
背景妊娠期糖尿病作为临床中常见的妊娠期合并症,其严重威胁产妇及胎儿的生命健康。H19作为一种印记基因,进一步分析其为妊娠期糖尿病靶向治疗工作的开展提供依据。目的研究H19介导miR-let-7的分子机制及其在妊娠期糖尿病中的作用。方法... 背景妊娠期糖尿病作为临床中常见的妊娠期合并症,其严重威胁产妇及胎儿的生命健康。H19作为一种印记基因,进一步分析其为妊娠期糖尿病靶向治疗工作的开展提供依据。目的研究H19介导miR-let-7的分子机制及其在妊娠期糖尿病中的作用。方法 2017年1月—2018年1月于北京大学医学部购进50只SPF级小鼠,根据小鼠的血糖以及血脂水平等将其分为正常组(n=20)和高脂组(n=30)。采用实时荧光定量反转录聚合酶链式反应(RT-qPCR)技术分析正常组和高脂组小鼠H19、let-7、靶基因脂蛋白脂肪酶(LPL)以及肝脏胰岛素受体β(INSR-β)和胰岛素通路相关因子2(IRS-2)、胰岛素受体(INSR)的相对m RNA表达水平。同时于小鼠成肌细胞株中,分别通过细胞转染技术转染干扰RNA(siRNA),特异性敲除小鼠H19,以及转染反义链抑制剂ilet-7,特异性阻断let-7结合靶基因,共转染后分别在第3、6周时收获细胞,观察不同时间点H19、let-7以及靶基因LPL、INSR-β、IRS-2和INSR的相对m RNA表达水平。在人卵巢畸胎瘤细胞系PA-1中,分别通过细胞转染技术转染siRNA,特异性敲除人H19,以及转染反义链抑制剂ilet-7,特异性阻断let-7结合靶基因,共转染后分别在第3、6周时收获细胞,观察各组中H19、let-7以及靶基因LPL、INSR-β、IRS-2及INSR的相对mRNA表达水平。结果高脂组小鼠H19、let-7及LPL mRNA表达水平高于正常组,INSR-β、IRS-2及INSR mRNA表达水平低于正常组(P<0.05)。不同时间点小鼠成肌细胞株H19、let-7、LPL、INSR-β、IRS-2及INSR mRNA表达水平比较,差异均有统计学意义(P<0.05)。不同时间点人卵巢畸胎瘤细胞系PA-1 H19、let-7、LPL、INSR-β、IRS-2及INSR mRNA表达水平比较,差异均有统计学意义(P<0.05)。结论 H19在miR-let-7中发挥分子介导机制,且在妊娠期糖尿病的参与中发挥至关重要的作用,临床中应当加强对妊娠期孕妇的H19以及miR-let-7等相关指标的检测,实现对妊娠期糖尿病的早期预测。 展开更多
关键词 糖尿病 妊娠 H19 miR-let-7 分子机制
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人类胎盘体外循环灌注模型的建立 被引量：10
2
作者 黄桦 张峻 +3 位作者 马润玫 闫晨 郑巧玲 姚勤 《中国药理学与毒理学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2013年第6期1014-1019,共6页
目的 建立人类胎盘体外循环灌注模型。方法 体外模拟子宫环境，以安替比林为参照物，选用自然分娩或剖宫产刚娩出的健康、完整、足月的人类胎盘，在其胎儿面选择供应同一胎盘小叶的一对脐动静脉，穿刺插管后建立单个胎盘小叶的胎儿循环... 目的 建立人类胎盘体外循环灌注模型。方法 体外模拟子宫环境，以安替比林为参照物，选用自然分娩或剖宫产刚娩出的健康、完整、足月的人类胎盘，在其胎儿面选择供应同一胎盘小叶的一对脐动静脉，穿刺插管后建立单个胎盘小叶的胎儿循环；胎儿面向下固定于胎盘室内，放置于37℃恒温水浴中，将一端接有导管的两根钝头针插入同一胎盘小叶的绒毛间隙内2~3 mm，建立母体循环。以蠕动泵为循环动力，向同一胎盘小叶的母体侧和胎儿侧供应胎盘灌流液，建立同一个胎盘小叶母体和胎儿双向闭合循环。在母体池中加入安替比林100 mg·L-1，循环灌注3 h。测定胎儿循环侧液体的渗漏率；采用高效液相色谱法于循环开始0，5，10，15，20，30，45，60，75，90，105，120，150和180 min测定安替比林的浓度计算胎盘透过率，并测定循环开始后0，30，60，90，120，150和180 min母体池和胎儿池中的胎盘灌流液的pH值。结果本研究成功建立人类胎盘体外循环灌注模型20例。在持续循环的3 h过程中，母体池和胎儿池灌流液pH值均维持在7.2~7.4范围内；胎儿侧漏液率为（2.47±1.27）ml·h-1；循环结束时，阳性标记物安替比林的胎盘透过率为（36.62±5.08）%。结论 本研究建立的人类胎盘体外循环灌注模型可用于药物的胎盘透过性研究，为妊娠期用药安全性提供可靠的体外研究模型和理论支持。 展开更多
关键词 人类胎盘体外循环灌注模型 转运 安替比林
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超声造影诊断附件区肿块的Meta分析 被引量：4
3
作者 张伟 徐琳 +1 位作者 马永红 朱丽波 《中国医学影像学杂志》 CSCD 北大核心 2018年第1期51-55,共5页
目的应用Meta分析的方法评价超声造影(CEUS)诊断附件区肿块的价值。资料与方法系统检索Pub Med、西文生物医学期刊文献数据库(FMJS)、CHKD期刊全文数据库、中国生物医学文献数据库(CBM),收集公开发表的关于CEUS诊断附件区肿块的中英文... 目的应用Meta分析的方法评价超声造影(CEUS)诊断附件区肿块的价值。资料与方法系统检索Pub Med、西文生物医学期刊文献数据库(FMJS)、CHKD期刊全文数据库、中国生物医学文献数据库(CBM),收集公开发表的关于CEUS诊断附件区肿块的中英文文献。检索时限自数据库建库至2016年12月31日。对纳入的文献进行异质性检验,并采用诊断精确性研究质量评估(QUADAS-2)量表进行质量评价。应用Stata软件进行统计学分析,得到合并效应量,绘制汇总受试者工作特性曲线(SROC曲线),并计算曲线下面积(AUC),作Deek's漏斗图评估发表偏倚。结果最终共纳入22篇文献,中文文献12篇,英文文献10篇。SROC曲线AUC为0.97。Deek's漏斗图表明本文最终纳入的文献不存在明显发表偏倚(P>0.1)。结论CEUS在诊断附件区肿块中具有较高的诊断效能。 展开更多
关键词 卵巢肿瘤 输卵管肿瘤 子宫肿瘤 超声检查 造影剂 诊断 鉴别 META分析
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妊娠期糖尿病孕妇大网膜下脂肪组织全基因组DNA甲基化研究 被引量：2
4
作者 钱源 孙浩 +3 位作者 肖雪 祁文瑾 张兰 马润玫 《中国全科医学》 CAS 北大核心 2017年第2期159-164,共6页
背景大网膜下脂肪组织与妊娠期糖尿病(GDM)密切相关,目前,关于GDM孕妇大网膜下脂肪组织全基因组DNA甲基化研究较少。目的研究GDM孕妇和无GDM孕妇大网膜下脂肪组织全基因组DNA甲基化差异,为寻找GDM可能的致病基因提供线索。方法选取2012... 背景大网膜下脂肪组织与妊娠期糖尿病(GDM)密切相关,目前,关于GDM孕妇大网膜下脂肪组织全基因组DNA甲基化研究较少。目的研究GDM孕妇和无GDM孕妇大网膜下脂肪组织全基因组DNA甲基化差异,为寻找GDM可能的致病基因提供线索。方法选取2012年1月—2014年5月于昆明医科大学第一附属医院妇产科门诊定期产前检查并入院分娩的GDM孕妇3例为病例组,同期健康孕妇3例为对照组。剖宫产术中剥离大网膜下脂肪组织,提取全基因组DNA。经变性和扩增后酶切扩增产物,将DNA片段与Illumina Methylation Bead Chip芯片进行杂交。根据Methylation Analysis Algorithms生成各样本每个位点的甲基化水平,经过偏差校正和位点过滤,得到甲基化水平。采用DAVID数据库对具有显著性差异的甲基化基因进行Gene Ontology(GO)和Kyoto Encyclopedia of Genes and Genomes(KEGG)信号通路分析。另分别选取同期GDM孕妇和无GDM孕妇各5例,验证候选基因启动子区域甲基化水平差异。结果病例组1 298个基因低甲基化,1 570个基因高甲基化,其中TMEM195、TCF7L2、IGF1、IGF1R甲基化可能与血糖调控密切相关,DGKG、NRXN3甲基化可能与体质指数(BMI)密切相关。GO功能分析显示,低甲基化基因参与的生物学过程主要是级联反应的活性调节、细胞凋亡调节及蛋白转运等,细胞成分主要为细胞外基质;高甲基化基因参与的生物学过程主要是抗原处理和呈递、主要组织相容复合体(MHC)Ⅱ参与的抗原处理和呈递,细胞成分主要为肌动骨架蛋白、MHC等。KEGG信号通路分析中,富集数>20.000的通路有抗原处理和呈递(富集数为23.142)、过氧化物酶体增殖物激活受体(PPAR)信号通路(富集数为22.068)。分别选取参与抗原处理和呈递、PPAR信号通路中的甲基化差异基因人类白细胞抗原G(HLA-G)、PPARGC1A进行验证。GDM孕妇大网膜下脂肪组织HLA-G启动子区域甲基化水平高于无GDM孕妇(t=4.968,P=0.001)。两者大网膜下脂肪组织PPARGC1A启动子区域甲基化水平比较,差异无统计学意义(t=0.929,P=0.380)。结论 GDM孕妇和健康孕妇大网膜下脂肪组织基因甲基化位点和水平存在显著差异,甲基化差异基因主要参与抗原处理和呈递及PPAR信号通路途径。 展开更多
关键词 糖尿病 妊娠 DNA甲基化 脂肪组织 抗原呈递 过氧化物酶体增殖物激活受体 全基因组关联研究
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不同Sap活性白假丝酵母菌对阴道上皮局部免疫的影响 被引量：2
5
作者 邵明琨 侯梦瑶 +1 位作者 罗丹丹 祁文瑾 《安徽医科大学学报》 CAS 北大核心 2022年第5期791-795,共5页
目的探讨不同Sap分泌型天冬氨酸蛋白酶(Sap)活性菌株对阴道局部免疫的影响。方法收集门诊外阴阴道假丝酵母菌病(VVC)及复发性外阴阴道假丝酵母菌病(RVVC)患者阴道分泌物进行菌株鉴定,取白假丝酵母菌行药敏性分析、25S rDNA基因分型、Sa... 目的探讨不同Sap分泌型天冬氨酸蛋白酶(Sap)活性菌株对阴道局部免疫的影响。方法收集门诊外阴阴道假丝酵母菌病(VVC)及复发性外阴阴道假丝酵母菌病(RVVC)患者阴道分泌物进行菌株鉴定,取白假丝酵母菌行药敏性分析、25S rDNA基因分型、Sap及磷酯酶(Plb)活性检测;用不同Sap活性的白假丝酵母菌与阴道上皮细胞共培养,用ELISA方法检测细胞上清液中白细胞介素(IL)-4、IL-8、IL-17的水平。结果VVC白假丝酵母菌株的Sap活性强于RVVC菌株;白假丝酵母菌感染后,阴道上皮细胞分泌的IL-4、IL-8、IL-17更多,且IL-8和IL-17出现的时间早、持续时间长;Sap强的白假丝酵母菌能刺激阴道上皮分泌更多的细胞因子。结论除外Sap活性,VVC与RVVC菌株之间侵袭力无明显差异;白假丝酵母菌能在短时间内激活阴道宿主免疫反应,且Sap活性强的菌株诱发的宿主免疫也强;RVVC致病白假丝酵母菌Sap活性弱的原因可能与阴道上皮分泌的保护性因子有关。 展开更多
关键词 外阴阴道假丝酵母菌病 白假丝酵母菌 分泌型天冬氨酸蛋白酶活性 IL-4 IL-8 IL-17
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白假丝酵母菌最优化RNA提取策略的探索 被引量：1
6
作者 李赛男 祁文瑾 《中国全科医学》 CAS CSCD 北大核心 2015年第2期176-179,共4页
目的探索白假丝酵母菌总RNA简单、快捷、高效的提取方法。方法选取昆明医科大学第一附属医院妇产科门诊2011年7月—2013年3月有临床症状且阴道分泌物镜检阳性的外阴阴道假丝酵母菌病(VVC)患者的白假丝酵母菌40株,选用不同时间与温度组... 目的探索白假丝酵母菌总RNA简单、快捷、高效的提取方法。方法选取昆明医科大学第一附属医院妇产科门诊2011年7月—2013年3月有临床症状且阴道分泌物镜检阳性的外阴阴道假丝酵母菌病(VVC)患者的白假丝酵母菌40株,选用不同时间与温度组合下的4种溶壁酶(Lyticase)破壁方案(A方案:37℃、12 h,B方案:25℃、12 h,C方案:37℃、24 h,D方案:25℃、24 h)进行RNA提取,将所得RNA进行荧光定量PCR(q PCR)反应验证RNA的浓度及纯度,并进行管家基因18S rRNA的检测。结果 D方案提取获得的RNA浓度高于A、B、C方案(P<0.05);B方案提取获得的RNA浓度高于A、C方案(P<0.05);而A、C两方案提取获得的RNA浓度比较,差异无统计学意义(P>0.05)。B、D方案获得的RNA纯度高于A、C方案(P<0.05);但A、C方案获得的RNA纯度比较,差异无统计学意义(P>0.05);B方案提取获得的RNA纯度高于D方案(P<0.05)。A、B、C、D方案提取的RNA扩增产物Ct转化值比较,差异有统计学意义(P<0.05);其中B、D方案q PCR扩增产物Ct转化值高于A、C方案(P<0.05);但B、D方案及A、C方案之间的q PCR扩增产物Ct转化值比较,差异无统计学意义(P>0.05)。管家基因18S rRNA的引物扩增出的产物片段大小为150 bp。结论以Lyticase破壁提取白假丝酵母菌具有简单易行及RNA产量高、纯度好的优点,值得临床推广应用。 展开更多
关键词 白假丝酵母菌 RNA 聚合酶链反应 溶壁酶
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髂内动脉球囊临时置入在五例凶险性前置胎盘剖宫产中的应用 被引量：54
7
作者 张功霖 姜永能 +1 位作者 马润玫 赵卫 《介入放射学杂志》 CSCD 北大核心 2012年第12期991-994,共4页
目的探讨髂内动脉球囊临时置入在凶险性前置胎盘剖宫产中的临床应用。方法 5例均经超声和磁共振诊断为凶险性前置胎盘伴胎盘植入患者,在剖宫产术前行髂内动脉球囊临时置入,待胎儿娩出脐带结扎后充盈球囊,剖宫产术后24 h去除球囊,记录所... 目的探讨髂内动脉球囊临时置入在凶险性前置胎盘剖宫产中的临床应用。方法 5例均经超声和磁共振诊断为凶险性前置胎盘伴胎盘植入患者,在剖宫产术前行髂内动脉球囊临时置入,待胎儿娩出脐带结扎后充盈球囊,剖宫产术后24 h去除球囊,记录所受射线剂量、出血量,并观察有无并发症发生。结果 5例髂内动脉球囊临时置入,均获得成功。出血量<500 ml者3例,>1 000 ml者2例。3例保留子宫,2例因难治性出血,行子宫全切1例,子宫次全切1例。以上5例均未发生球囊置入并发症。结论髂内动脉球囊临时置入可减少凶险性前置胎盘剖宫产出血量,并降低了子宫切除风险。 展开更多
关键词 髂内动脉 球囊 凶险性前置胎盘 胎盘植入 剖宫产
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