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昆明地区β地中海贫血基因检测结果及红细胞参数特点分析
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作者 郭晓潞 吴亚敏 张艳亮 《中国实验血液学杂志》 北大核心 2025年第2期481-485,共5页
目的:了解昆明地区人群地中海贫血基因携带率和基因型分布特点,并比较β^(+)、β^(0)杂合突变携带者与健康人群之间红细胞参数的差异,以及18-45岁成人不同性别间红细胞参数的差异。方法:回顾性分析2020年4月1日至2022年3月31日于昆明医... 目的:了解昆明地区人群地中海贫血基因携带率和基因型分布特点,并比较β^(+)、β^(0)杂合突变携带者与健康人群之间红细胞参数的差异,以及18-45岁成人不同性别间红细胞参数的差异。方法:回顾性分析2020年4月1日至2022年3月31日于昆明医科大学第一附属医院筛查地贫基因的病例3195例,采用荧光PCR熔解曲线法检测中国人常见的β珠蛋白基因21个位点突变型。将携带β-地贫基因的单纯杂合子患者分为β^(+)杂合子组、β^(0)杂合子组,对照组为体检健康人群219例,收集红细胞计数(RBC)、血红蛋白浓度(Hb)、平均红细胞体积(MCV)、平均红细胞血红蛋白含量(MCH)4项指标数据,比较β^(+)、β^(0)杂合子组与对照组4个红细胞参数的差异,以及在18-45岁之间β^(+)、β^(0)杂合子与健康人群不同性别间红细胞参数的差异。结果:确诊地贫基因携带者688例,占21.53%;包含β珠蛋白基因突变322例,其中β^(+)杂合子145例,β^(0)杂合子151例,β^(+)纯合以及β^(+)和β^(0)双重杂合14例;β珠蛋白和α珠蛋白同时突变或缺失12例。β^(+)地贫以CD26 G>A突变型携带率最高,占57.9%;β^(0)地贫以CD17 A>T突变型携带率最高,占46.4%。将检出的296例β-地贫杂合突变携带者红细胞参数与正常参考区间比较,发现RBC大于参考区间最高值有218例,Hb、MCV、MCH小于参考区间最低值分别为105、281、269例。β^(+)、β^(0)杂合突变携带者与健康人群比较,4个红细胞参数均具有显著性差异(均P<0.001),进一步不同性别间比较亦有显著差异(均P<0.001)。结论:昆明地区人群的地贫基因携带率、β杂合子地贫基因型携带率均处于较高水平,β^(+)、β^(0)杂合子携带者与健康人群红细胞参数有显著性差异。在进行遗传咨询时,应做好告知工作,在处于适婚年龄的成人中应该加强筛查,以预防重型地贫患儿出生。 展开更多
关键词 Β地中海贫血 基因型 血液学表型 基因突变 红细胞参数
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2013—2015年云南省三级医院尿培养病原菌分布及耐药性分析 被引量:23
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作者 王云娟 宋贵波 +3 位作者 苏艳丹 许云敏 郭霞 单斌 《中国抗生素杂志》 CAS CSCD 北大核心 2017年第7期548-560,共13页
目的分析云南地区尿路感染患者病原菌分布和对常见抗菌药物的耐药状况,为合理选用抗菌药物提供客观依据。方法按统一方案,采用纸片扩散法或自动化仪器法进行细菌鉴定及抗菌药物敏感试验,判定标准按CLSI 2016年版,统计分析使用WHONET 5.... 目的分析云南地区尿路感染患者病原菌分布和对常见抗菌药物的耐药状况,为合理选用抗菌药物提供客观依据。方法按统一方案,采用纸片扩散法或自动化仪器法进行细菌鉴定及抗菌药物敏感试验,判定标准按CLSI 2016年版,统计分析使用WHONET 5.6软件进行。结果 2013年1月—2015年12月云南省35家三级医院临床尿标本分离出病原菌42232株,女性患者尿标本占55.4%,其中65.0%为大肠埃希菌,男性患者尿标本占44.6%,其中39.6%为大肠埃希菌。42232株菌中革兰阴性菌32786株,占77.6%,革兰阳性菌9446株,占22.4%;以大肠埃希菌最常见(53.8%),其余依次为肠球菌属细菌(13.9%)、克雷伯菌属细菌(8.3%)和变形菌属细菌(3.5%)等。大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌ESBLs检出率分别为52.3%和44.4%。大肠埃希菌对抗菌药物的敏感率前9位依次为:厄他培南(99.7%)、美罗培南(99.7%)、亚胺培南(99.6%)、头孢替坦(97.6%)、阿米卡星(96.7%)、磷霉素(94.3%)、哌拉西林/三唑巴坦(87.4%)、呋喃妥因(83.3%)和头孢哌酮/舒巴坦(64.9%);耐药率最高的抗菌药物为氨苄西林(89.9%)。肺炎克雷伯菌对厄他培南(6.5%)和美罗培南(9.9%)耐药率低于10.0%。除阿米卡星和呋喃妥因外,住院患者分离出的大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌对各种抗菌药物的耐药率均高于门诊患者。除利奈唑胺和四环素外,屎肠球菌对其他抗菌药物的耐药率均明显高于粪肠球菌。不同抗菌药物3年耐药率变化趋势有所不同。结论云南地区尿培养病原菌以大肠埃希菌、肠球菌属和肺炎克雷伯菌为主。不同年份、不同地区、不同科室、不同年龄、不同性别及不同标本中病原菌对抗菌药物的耐药率各不相同。临床应依据药敏结果或参照当地细菌耐药性资料合理选择抗菌药物。 展开更多
关键词 尿路感染 尿标本 病原菌 耐药性
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敲除DNMT1增强NK细胞对急性髓细胞白血病的抑制作用
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作者 武坤 黄佳莉 +3 位作者 程沈菊 李艳红 曾云 史明霞 《中国实验血液学杂志》 北大核心 2025年第3期653-659,共7页
目的:探讨敲除DNA甲基转移酶1(DNMT1)对NK细胞抑制急性髓系白血病(AML)的影响及机制。方法:收集AML患者、对照人群外周血NK细胞,PCR测定DNMT1 mRNA水平,Western blot测定DNMT1蛋白水平。构建DNMT1敲除小鼠,获取NK^(DNMT1-/-)细胞;以白介... 目的:探讨敲除DNA甲基转移酶1(DNMT1)对NK细胞抑制急性髓系白血病(AML)的影响及机制。方法:收集AML患者、对照人群外周血NK细胞,PCR测定DNMT1 mRNA水平,Western blot测定DNMT1蛋白水平。构建DNMT1敲除小鼠,获取NK^(DNMT1-/-)细胞;以白介素-12、15、18刺激NK细胞以构建记忆性NK细胞,ELISA法测定γ干扰素(IFN-γ)水平。将记忆性NK细胞与HL60细胞共培养,LDH法检测NK^(DNMT1-/-)细胞对HL60细胞的杀伤作用,流式细胞术检测HL60细胞凋亡及NK细胞NKG2D水平,Western blot测定NK细胞穿孔素、颗粒酶B蛋白水平。通过尾静脉注射HL60细胞构建AML模型小鼠,同时注射记忆性NK细胞,检测小鼠体重、CD33阳性率及生存时间。结果:AML患者外周血NK细胞DNMT1 mRNA、蛋白水平均明显高于对照组(均P<0.01),经白介素刺激后IFN-γ水平明显低于对照组(P<0.05)。与NK^(DNMT1+/+)细胞比较,NK^(DNMT1-/-)细胞经白介素刺激后IFN-γ分泌能力明显升高(P<0.05)。NK^(DNMT1-/-)细胞对HL60细胞杀伤、凋亡诱导作用明显强于NK^(DNMT1+/+)细胞(均P<0.05)。NK^(DNMT1-/-)细胞的NKG2D水平及表达穿孔素、颗粒酶B能力明显高于NK^(DNMT1+/+)细胞(均P<0.05)。与注射NK^(DNMT1+/+)细胞的AML小鼠相比较,注射NK^(DNMT1-/-)细胞的AML小鼠体重明显增加,CD33阳性率明显下降,生存时间明显延长(均P<0.05)。结论:敲除DNMT1可增强NK细胞对AML的抑制作用,其机制可能与增强NK细胞记忆功能相关。 展开更多
关键词 DNA甲基转移酶1 急性髓系白血病 NK细胞 记忆性
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2012年3家教学医院无菌体液病原菌分布和耐药性 被引量:6
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作者 黄燕春 陈知行 +5 位作者 谢轶 刘宝 费樱 杜艳 单斌 康梅 《中国抗生素杂志》 CAS CSCD 北大核心 2014年第6期456-461,共6页
目的了解2012年中国西南地区三家教学医院临床分离自无菌体液病原菌的分布及耐药状况,为感染的预防与控制提供依据。方法运用WHONET5.5和SPSS16软件对3所西南地区三级甲等教学医院2012年无菌体液病原菌进行回顾性分析。结果脑脊液中共... 目的了解2012年中国西南地区三家教学医院临床分离自无菌体液病原菌的分布及耐药状况,为感染的预防与控制提供依据。方法运用WHONET5.5和SPSS16软件对3所西南地区三级甲等教学医院2012年无菌体液病原菌进行回顾性分析。结果脑脊液中共分离病原菌266株,包括革兰阳性菌161株、革兰阴性菌90株和真菌15株。分离最多的为凝固酶阴性葡萄球菌(CNS),其次为金黄色葡萄球菌和鲍曼不动杆菌。其他无菌体液标本(除脑脊液)中共分离病原菌720株,包括革兰阳性菌297株、革兰阴性菌411株和真菌12株。分离最多的为CNS、大肠埃希菌和克雷伯菌属。脑脊液标本中耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(MRSA)和耐甲氧西林凝固酶阴性葡萄球菌(MRCNS)的检出率分别为39.1%和75.9%。其他无菌体液标本中MRSA和MRCNS的检出率分别为45.8%和78.9%。分离自无菌体液的肠球菌出现了对万古霉素和利奈唑胺耐药的现象,其中屎肠球菌对万古霉素的耐药率高达11.5%。在肠杆菌科细菌中大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌属细菌对亚胺培南的耐药率较低,而肠杆菌属细菌对亚胺培南的耐药率则较高(为23.5%)。非发酵菌对碳青霉烯类抗生素耐药率较高,其中鲍曼不动杆菌对亚胺培南的耐药率已大于60%。结论我国西南地区无菌体液病原菌构成与全国监测数据基本一致。无菌体液中MRSA检出率均低于全国监测水平,MRCNS检出率则较高。对万古霉素耐药的屎肠球菌分离率较高。非发酵菌特别是不动杆菌的耐药形势严峻。合理应用抗菌药物,加强医院感染控制应成为减少细菌耐药发生的重要策略。 展开更多
关键词 无菌体液 病原菌 耐药性 抗菌药物
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昆明地区耐碳青霉烯类抗生素铜绿假单胞菌的分子流行病学特点及耐药特征分析 被引量:3
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作者 周飞 李小凤 +4 位作者 梁媛 李洁 姜波 单斌 宋贵波 《中国抗生素杂志》 CAS CSCD 北大核心 2023年第7期820-825,共6页
目的研究耐碳青霉烯类抗生素铜绿假单胞菌分子流行病学规律及耐药机制,为临床预防和治疗铜绿假单胞菌的感染提供理论依据。方法对多中心收集的耐碳青霉烯类抗生素铜绿假单胞菌(carbapenems-resistant Pseudomonas aeruginosa,CRPA)开展... 目的研究耐碳青霉烯类抗生素铜绿假单胞菌分子流行病学规律及耐药机制,为临床预防和治疗铜绿假单胞菌的感染提供理论依据。方法对多中心收集的耐碳青霉烯类抗生素铜绿假单胞菌(carbapenems-resistant Pseudomonas aeruginosa,CRPA)开展多位点序列分型(multilocus sequence typing,MLST)和遗传信息研究,并对碳青霉烯酶基因与外膜孔蛋白OprD编码基因进行序列分析。结果多位点序列分型方法将81株CRPA分为36个ST型,总体以ST3390(41.98%,34/81)为主,其中有5种为新发现的ST型别;CRPA菌株中碳青霉烯酶基因的检出率较高(65.43%,53/81),尿液标本检出率最高(80.00%,28/35),其中IMP、VIM和NDM型碳青霉烯酶基因检出率分别为37.04%、27.16%和1.23%,未检测到KPC、GES、SPM和OXA-40型碳青霉烯酶基因;oprD基因的序列比对分析发现,高达96.29%(78/81)CRPA临床分离株发生了各种类型的突变,以单个或者多个碱基的插入或缺失为主(76.54%,62/81)。结论81株CRPA主要的耐药机制为膜孔蛋白基因突变和产碳青霉烯酶;存在ST3390克隆株的局部流行,应加强医院感染防控措施,防止暴发流行。 展开更多
关键词 铜绿假单胞菌 分子流行病学 多位点序列分型 碳青霉烯类抗生素 耐药机制
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血清miR-4646-5p、miR-3654联合传统肺癌肿瘤标志物在云南宣威肺癌诊断中的应用研究 被引量:2
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作者 张仁宁 万鑫蕊 +4 位作者 黄萱 李明平 许凯 方绕红 李娅 《中国肺癌杂志》 CAS CSCD 北大核心 2024年第9期654-664,共11页
背景与目的宣威肺癌近年来发病率持续增加,还具有全年龄段高发、女性肺癌死亡率高等特点。因此寻找更多稳定的生物标志物用于宣威肺癌的诊断具有巨大的临床应用前景。本研究旨在探究4个微小RNA(microRNA,miRNA)各自及联合传统肺癌肿瘤... 背景与目的宣威肺癌近年来发病率持续增加,还具有全年龄段高发、女性肺癌死亡率高等特点。因此寻找更多稳定的生物标志物用于宣威肺癌的诊断具有巨大的临床应用前景。本研究旨在探究4个微小RNA(microRNA,miRNA)各自及联合传统肺癌肿瘤标志物在宣威肺癌检测和诊断中的临床应用价值。方法通过检测4个miRNA和5种传统肺癌肿瘤标志物在45例宣威肺癌患者和健康体检者血清中的表达量,采用逻辑回归模型综合评估4个miRNA在宣威肺癌诊断中的灵敏度、特异度和诊断效能等相关统计学指标。结果单个血清miRNA中miR-4646-5P、miR-3654在宣威肺癌组中的相对表达水平与对照组存在显著差异(P<0.05),miR-3654用于诊断的效果最好,灵敏度、特异度和曲线下面积分别为86.7%、82.2%、0.847。miR-3654联合miR-4646-5p、癌胚抗原(carcinoembryonic antigen,CEA)诊断宣威肺癌的效能最高,曲线下面积为0.901,灵敏度为73.3%,特异度为93.3%,阳性预测值为91.7%。结论血清miR-3654在4个miRNA中对宣威肺癌诊断效果最好,并且联合miR-4646-5p、CEA能有效提高其对宣威肺癌的诊断价值,有望作为有价值的宣威肺癌筛查指标。 展开更多
关键词 微小RNA 宣威肺腺癌 肺肿瘤 肿瘤标志物 诊断效能
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头孢他啶/阿维巴坦联合不同抗菌药物对产金属酶肠杆菌目细菌体外活性分析
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作者 董小雪 张鸿娟 +5 位作者 苏艳丹 李欣玥 许云敏 朱晓雁 郭兰花 单斌 《中国抗生素杂志》 CAS CSCD 北大核心 2024年第10期1101-1106,共6页
目的研究头孢他啶/阿维巴坦联合氨曲南、亚胺培南和美罗培南对产金属酶肠杆菌目细菌的体外抑菌活性,为临床产金属酶肠杆菌目细菌的治疗提供依据。方法收集昆明医科大学第一附属医院2022年8月—2023年8月碳青霉烯类耐药肠杆菌目细菌,PCR... 目的研究头孢他啶/阿维巴坦联合氨曲南、亚胺培南和美罗培南对产金属酶肠杆菌目细菌的体外抑菌活性,为临床产金属酶肠杆菌目细菌的治疗提供依据。方法收集昆明医科大学第一附属医院2022年8月—2023年8月碳青霉烯类耐药肠杆菌目细菌,PCR方法检测bla_(KPC)、bla_(OXA-48)、bla_(VIM)、bla_(NDM)和bla_(IMP)等5种耐药基因,应用微量肉汤稀释法检测头孢他啶/阿维巴坦、氨曲南、亚胺培南和美罗培南的最低抑菌浓度,棋盘法检测头孢他啶/阿维巴坦联合氨曲南、亚胺培南和美罗培南的协同抑菌活性,计算联合药敏的部分抑菌浓度指数和敏感折点指数,判断两种组合之间的协同、相加、无关或拮抗作用,评估不同组合之间的协同效果。结果本研究共收集耐碳青霉烯类肠杆菌目细菌234株,其中产金属酶的菌株占12.8%(30/234),对头孢他啶/阿维巴坦的耐药率为100%(30/30)。分别从不同样本类型中选择6株产金属酶的代表性菌株进行联合药敏实验,结果头孢他啶/阿维巴坦联合氨曲南对6株菌株部分抑菌浓度指数均<0.5,表现出协同作用,协同率为100%(6/6),联合美罗培南和亚胺培南时,每个组合仅对1株菌株表现出协同作用,协同率为16.7%(1/6),但在美罗培南的组合中,有3株菌株表现出相加作用,相加率为50%(3/6),对2株双酶型菌株均无协同或相加作用,敏感折点指数头孢他啶/阿维巴坦联合氨曲南明显优于亚胺培南和美罗培南,协同效果显著。结论体外联合药敏结果显示,对产金属酶肠杆菌目细菌,头孢他啶/阿维巴坦联合氨曲南具有显著的协同效果,联合美罗培南和亚胺培南协同效果不明显,因此头孢他啶/阿维巴坦联合氨曲南可作为治疗产金属酶肠杆菌感染的方案之一。 展开更多
关键词 联合药敏实验 碳青霉烯类 多重耐药 协同抑菌活性 金属酶
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孕晚期孕妇无乳链球菌耐药状况与其血清型和毒力基因分析研究
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作者 董小雪 马志刚 +3 位作者 张鸿娟 李欣玥 许云敏 单斌 《中国抗生素杂志》 CAS CSCD 北大核心 2024年第11期1309-1315,共7页
目的分析孕晚期孕妇生殖道无乳链球菌荚膜血清型、毒力基因的分布以及和红霉素、克林霉素耐药率及D试验阳性率的相关性,为临床无乳链球菌(group B Streptococcus GBS)感染的预防控制与治疗提供依据。方法收集昆明医科大学第一附属医院2... 目的分析孕晚期孕妇生殖道无乳链球菌荚膜血清型、毒力基因的分布以及和红霉素、克林霉素耐药率及D试验阳性率的相关性,为临床无乳链球菌(group B Streptococcus GBS)感染的预防控制与治疗提供依据。方法收集昆明医科大学第一附属医院2021年11月—2022年10月孕晚期孕妇临床分离的GBS菌株,采用标准纸片扩散法进行药物敏感性实验,多重PCR的方法进行荚膜血清型分型,PCR方法进行毒力基因分析,药敏分析应用WHONET 5.6进行,统计分析应用SPSS26.0。结果共收集168株无乳链球菌,血清分型中血清型Ⅲ的检出率最高为31.5%(53/168),其次为Ⅴ型31.0%(52/168),Ⅰb型25.0%(42/168),Ⅰa型7.7%(13/168),Ⅱ、Ⅳ型少见,未检出Ⅳ型、Ⅶ型、Ⅷ型、Ⅸ型。检出的9种不同的毒力基因中每株菌至少含有3种上的毒力基因,其中cylB、fbsA和fbsB基因检出率为100.0%(168/168),hylB、lmb和scpB基因检出率均大于91.0%,bac基因检出率最低,为27.0%(47/168)。血清型Ⅰb中bca和bac基因的表达率显著高于其他血清型(P<0.05),分别为92.1%(39/42)和88.1%(42/47),血清型Ⅲ中bac基因的表达率明显低于其他血清型(P<0.05),为3.8%(2/53)。未检出对青霉素和万古霉素耐药的菌株,对克林霉素和红霉素的耐药率分别为76.7%和70.8%。克林霉素和红霉素的耐药率在不同的血清型之间差异显著(P<0.05)。D实验阳性率为16.6%(28/168),其中Ⅴ型血清型中D实验阳性率为85.7%(24/28),与其他血清型之间差异显著(P<0.05)。结论孕晚期孕妇生殖道GBS血清型以Ⅲ型和Ⅴ型为主,普遍存在3种以上毒力基因,不同血清型之间毒力基因表达率、D试验阳性率、红霉素和克林霉素的耐药率存在差异。未发现耐青霉素G和万古霉素的菌株,青霉素仍可作为治疗无乳链球菌感染的首选药物。 展开更多
关键词 无乳链球菌 血清型 毒力基因 耐药性
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2012年中国云南地区革兰阴性杆菌耐药监测 被引量:20
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作者 杜艳 陈正辉 +1 位作者 陈瑞春 单斌 《中国抗生素杂志》 CAS CSCD 北大核心 2014年第8期629-634,共6页
目的了解2012年中国云南地区革兰阴性杆菌耐药监测临床分离的革兰阴性杆菌临床分布及耐药情况。方法收集2012年1月至12月卫生部全国细菌耐药监测网云南地区26家三级医院和2家二级医院的革兰阴性杆菌,各医院按统一的方法进行细菌培养、... 目的了解2012年中国云南地区革兰阴性杆菌耐药监测临床分离的革兰阴性杆菌临床分布及耐药情况。方法收集2012年1月至12月卫生部全国细菌耐药监测网云南地区26家三级医院和2家二级医院的革兰阴性杆菌,各医院按统一的方法进行细菌培养、分离、鉴定和药敏试验。结果共分离非重复的革兰阴性杆菌27616株,其中肠杆菌科占75.84%,非发酵菌占24.16%。肠杆菌科以大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌为主;非发酵菌以铜绿假单胞菌和鲍曼不动杆菌为主。肠杆菌科细菌对头孢类一代耐药率大于50%;除变形菌属外对含β-内酰胺酶抑制剂的β-内酰胺类抗生素阿莫西林/克拉维酸、氨苄西林/舒巴坦的耐药率均大于40%;对头孢哌酮/舒巴坦、哌拉西林/三唑巴坦的耐药率小于20%。除变形菌属外,对碳青霉烯类和阿米卡星耐药率均小于10%;除变形菌属外对喹诺酮类耐药率小于30%。非发酵菌对常用抗菌药耐药率明显高于肠杆菌科细菌。鲍曼不动杆菌和铜绿假单胞菌对碳青霉烯类的耐药率均大于30%。嗜麦芽寡养单胞菌对复方磺胺甲噁唑的耐药率小于20%,米诺环素小于10%。结论肠杆菌科细菌对碳青酶烯类抗生素耐药压力大。非发酵菌对常用抗菌药物耐药率明显高于肠杆菌科,耐药现状严峻。监测非发酵菌的耐药趋势以及严格实施院内感染控制制度应成为减少细菌耐药性的重要措施。 展开更多
关键词 耐药性 革兰阴性杆菌 肠杆菌科 非发酵菌 不动杆菌
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2013—2015年云南省铜绿假单胞菌耐药性分析 被引量:18
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作者 郭霞 单斌 +2 位作者 许云敏 康细林 段勇 《中国抗生素杂志》 CAS CSCD 北大核心 2017年第11期993-997,共5页
目的了解云南省2013—2015年分离的铜绿假单胞菌的耐药性及特征,指导临床合理用药,为院内感染的监测和预防提供指导。方法按照统一的方案对云南省24家医院分离的铜绿假单胞菌进行耐药性监测,根据2015美国临床实验室标准化协会(CLSI)的... 目的了解云南省2013—2015年分离的铜绿假单胞菌的耐药性及特征,指导临床合理用药,为院内感染的监测和预防提供指导。方法按照统一的方案对云南省24家医院分离的铜绿假单胞菌进行耐药性监测,根据2015美国临床实验室标准化协会(CLSI)的标准进行药敏结果的判读,用WHONET 5.6软件及SPSS 17.0统计软件进行数据分析。结果 2013—2015年共分离铜绿假单胞菌12690株,主要分离自呼吸道标本。铜绿假单胞菌对哌拉西林/三唑巴坦、头孢他啶、头孢吡肟、亚胺培南、美罗培南、庆大霉素及环丙沙星耐药率呈上升趋势,对其余抗生素耐药率无明显变化。儿童分离株耐药率低于成人和老年患者分离株;ICU分离株耐药率明显高于非ICU分离菌株;除哌拉西林/三唑巴坦、妥布霉素、环丙沙星和左氧氟沙星外,分离自血液标本的菌株耐药率均高于非血液标本。结论 3年来云南省铜绿假单胞菌的分离数量逐年增加,ICU患者耐药形势严峻且血液标本来源的菌株对多数抗生素的耐药率高于非血液标本来源的菌株。因此,应加强对铜绿假单胞菌耐药性的连续监测,尤其应加强对ICU及血液标本来源菌株的关注,从而指导临床合理用药。 展开更多
关键词 铜绿假单胞菌 抗生素 耐药分析
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Mohnarin2012年云南省革兰阳性球菌耐药性监测 被引量:5
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作者 邵天波 单斌 +2 位作者 许云敏 陈瑞春 杜艳 《中国抗生素杂志》 CAS CSCD 北大核心 2014年第7期534-538,共5页
目的了解2012年中国云南省临床分离革兰阳性球菌分布及耐药监测情况。方法收集2012年1月至12月卫生部全国细菌耐药监测网云南省28所医院的革兰阳性球菌,各医院按统一的方法进行细菌培养、分离、鉴定和药敏试验,按CLSI 2012M100-S22判读... 目的了解2012年中国云南省临床分离革兰阳性球菌分布及耐药监测情况。方法收集2012年1月至12月卫生部全国细菌耐药监测网云南省28所医院的革兰阳性球菌,各医院按统一的方法进行细菌培养、分离、鉴定和药敏试验,按CLSI 2012M100-S22判读结果。结果共收集到各医院分离的非重复革兰阳性球菌10845株,其中葡萄球菌65.0%,肠球菌23.8%,链球菌11.2%。耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(MRSA)和耐甲氧西林凝固酶阴性葡萄球菌(MRCNS)分别为38.4%和80.6%。葡萄球菌属中甲氧西林耐药株(MR)对β-内酰胺类抗生素和其他测试药的耐药率显著高于甲氧西林敏感株(MS),未发现万古霉素和利奈唑胺耐药株。肠球菌属中粪肠球菌对多数测试药物的耐药率低于屎肠球菌。肠球菌中有少数万古霉素耐药、替考拉宁和利奈唑胺耐药株。非脑膜炎肺炎链球菌PISP和PRSP比例较低,小于5%,未发现万古霉素耐药株。结论革兰阳性球菌对利奈唑胺、万古霉素、替考拉宁依然保持极高的敏感性,但其分离率和耐药性仍呈增长趋势,对临床构成严重威胁,加强感染控制措施是当务之急。 展开更多
关键词 细菌耐药性监测 细菌药物敏感试验 革兰阳性球菌
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沉默DNMT1减弱WIF-1基因启动子甲基化对慢性髓系白血病K562细胞生物学行为的影响 被引量:3
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作者 武坤 晋臻 +4 位作者 李轶勋 李昕 程沈菊 李艳红 郭翀 《中国实验血液学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2021年第6期1768-1774,共7页
目的:探讨沉默DNA甲基转移酶(DNMT1)对人慢性髓系白血病细胞内抑癌基因wnt抑制因子-1(WIF-1)基因启动子甲基化的影响。方法:构建DNMT1 siRNAi质粒,将DNMT1 siRNAi转染至慢性髓系白血病K562细胞中,采用RT-PCR和Western blot法检测DNMT1... 目的:探讨沉默DNA甲基转移酶(DNMT1)对人慢性髓系白血病细胞内抑癌基因wnt抑制因子-1(WIF-1)基因启动子甲基化的影响。方法:构建DNMT1 siRNAi质粒,将DNMT1 siRNAi转染至慢性髓系白血病K562细胞中,采用RT-PCR和Western blot法检测DNMT1基因和相关蛋白的表达,并利用甲基化PCR检测WIF-1基因启动子甲基化水平,台盼蓝拒染法和MTT法检测细胞的增殖能力,流式细胞术检测细胞的凋亡率,集落形成实验检测细胞的集落形成能力,Western blot法检测沉默DNMT1基因后Wnt/β-catenin及其下游信号通路蛋白的表达情况。结果:实验组DNMT1 mRNA和相关蛋白表达水平显著低于对照组和阴性对照组(P<0.05);成功转染72 h后,对照组和阴性对照组WIF-1基因处于完全甲基化状态,而实验组WIF-1基因启动子区域甲基化水平显著降低。MSP检测结果显示,实验组未甲基化的WIF-1引物扩增出的PCR产物含量显著增加,而甲基化的WIF-1引物扩增出的PCR产物含量显著降低。转染成功48 h后,实验组的OD值、活细胞数及集落形成数均显著低于阴性对照组和对照组(P<0.05)。实验组的细胞凋亡率显著高于阴性对照组和对照组(P<0.05)。实验组K562细胞中β-actin、myc、cyclin D1和TCF-1蛋白表达水平均显著低于阴性对照组和对照组(P<0.05)。结论:沉默DNMT1基因能够抑制K562细胞增殖,促进其凋亡,其作用机制可能与逆转WIF-1基因启动子高甲基化水平,从而抑制Wnt/β-catenin信号通路的活性有关。 展开更多
关键词 DNA甲基转移酶1 人慢性髓系白血病 高甲基化 Wnt抑制因子-1
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Notch1基因在T-ALL患者中的表达及其对NF-κB通路的影响 被引量:2
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作者 武坤 郭翀 +5 位作者 马晓波 李云涛 张学美 李林燕 罗珊 史明霞(指导) 《中国免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2022年第8期982-986,共5页
目的:探讨Notch1基因在急性T淋巴细胞白血病(T-ALL)患者外周血单个核细胞(PBMC)中的表达及其对NF-κB通路的作用。方法:选取T-ALL患者67例作为试验组,以67例健康体检者作为对照。采用qRT-PCR分析PBMC中Notch1和NF-κB通路(IκBα、IKKβ... 目的:探讨Notch1基因在急性T淋巴细胞白血病(T-ALL)患者外周血单个核细胞(PBMC)中的表达及其对NF-κB通路的作用。方法:选取T-ALL患者67例作为试验组,以67例健康体检者作为对照。采用qRT-PCR分析PBMC中Notch1和NF-κB通路(IκBα、IKKβ)mRNA表达量,分析Notch1的表达水平与T-ALL患者临床指标和预后之间的关联,以及Notch1与NF-κB通路mRNA表达水平的关联。沉默Jurkat细胞中的Notch1基因,qRT-PCR分析Notch1、IκBα和IKKβ mRNA表达,Western blot分析Notch1、磷酸化IκBα(p-IκBα)和磷酸化IKKβ(p-IKKβ)蛋白表达。结果:T-ALL组PBMC中Notch1 mRNA表达水平高于健康组,差异有统计学意义(P<0.05)。Notch1表达水平与LDH水平、白细胞水平和危险度分级之间呈显著正相关(r=0.102,P=0.025;r=0.247,P=0.019;r=0.429,P=0.006),而与年龄和性别无显著相关性。Notch1与IκBα mRNA水平呈显著负相关(r=-0.754,P=0.039),与IKKβ mRNA水平呈显著正相关(r=0.738,P=0.002)。Notch1低表达组中位总生存时间为(18.5±2.2)个月,显著长于高表达组的(12.7±3.4)个月(χ;=1.677,P=0.038)。沉默Notch1可显著上调IκBα mRNA和p-IκBα蛋白水平(P<0.05),显著下调IKKβ mRNA和p-IKKβ蛋白水平(P<0.05)。结论:Notch1基因在T-ALL患者血浆PBMC中高表达,与患者LDH水平、白细胞水平和危险度分级等临床指标和生存率相关,Notch1可能通过NF-κB通路发挥作用。 展开更多
关键词 急性T淋巴细胞白血病 NOTCH1基因 NF-ΚB通路 临床特征
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WNK1基因rs11611246位点多态性与云南汉族儿童急性淋巴细胞白血病关联性研究 被引量:2
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作者 武坤 苏艳丹 +2 位作者 杨金荣 王雪娇 曾云 《中国免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2020年第13期1619-1624,共6页
目的:分析云南汉族人群急性淋巴细胞白血病(ALL)患儿WNK1基因rs11611246位点多态性,并探讨此基因位点多态性与ALL发病关系。方法:选择昆明医科大学第一附属医院2012年1月~2014年1月收治的首诊ALL患儿86例为研究对象,另选择同期健康患儿9... 目的:分析云南汉族人群急性淋巴细胞白血病(ALL)患儿WNK1基因rs11611246位点多态性,并探讨此基因位点多态性与ALL发病关系。方法:选择昆明医科大学第一附属医院2012年1月~2014年1月收治的首诊ALL患儿86例为研究对象,另选择同期健康患儿95例为健康对照组,收集相关资料,采用TaqMan-MGB探针等位基因分型技术分析rs11611246位点多态性,免疫印迹法检测ALL患者骨髓WNK1蛋白表达,并进行统计学分析。结果:ALL患儿与健康儿童rs11611246位点GG型、GT型、TT型等位基因均符合Hardy-Weinberg遗传平衡规律,GG型基因会显著增加儿童ALL患病风险(OR:2.002,95%CI:1.517~2.853,P=0.012),合并分析后发现G等位基因ALL发病风险是T等位基因2.189倍(95%CI:1.583~2.971,P=0.008)。GG型基因与“出生后居室装修”、“放射性物质接触”有协同交互作用(P<0.05)。GG型、GT/TT型患儿第1疗程诱导治疗完全缓解率无显著差异,但是GG型患儿5年无复发生存率、5年无事件生存率及5年总生存率显著低于GT/TT型患儿(P<0.05)。GG型患儿骨髓细胞WNK1蛋白表达显著低于GT型、TT型(P<0.05)。结论:WNK1基因rs11611246位点多态性与儿童ALL易感性相关,与部分环境因素呈协同交互作用,对患儿预后有一定影响。 展开更多
关键词 WNK1 rs11611246 基因多态性 儿童 急性淋巴细胞白血病
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中国西部地区老年患者临床分离菌的耐药及分布特点 被引量:7
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作者 宋贵波 单斌 +8 位作者 喻华 阿祥仁 张华 季萍 贾伟 徐修礼 鲁卫平 郭素芳 魏莲花 《中国抗生素杂志》 CAS CSCD 2018年第9期1101-1108,共8页
目的了解中国西部地区10所医院2016—2017年老年患者临床分离菌的分布特点及其对抗菌药物的耐药性。方法按统一方案,采用纸片扩散法或自动化仪器法进行细菌药敏试验,按照美国临床和实验室标准化协会(Clinical and Laboratory Standards ... 目的了解中国西部地区10所医院2016—2017年老年患者临床分离菌的分布特点及其对抗菌药物的耐药性。方法按统一方案,采用纸片扩散法或自动化仪器法进行细菌药敏试验,按照美国临床和实验室标准化协会(Clinical and Laboratory Standards Institute,CLSI)2017年标准判读结果。结果共收集临床分离菌121374株,其中老年患者41448株,占34.1%。其中革兰阳性菌9499株,占22.9%;革兰阴性菌31949株,占77.1%。耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(MRSA)和耐甲氧西林凝固酶阴性葡萄球菌(MRCNS)的检出率分别为37.1%和79.3%。未发现万古霉素、替考拉宁和利奈唑胺耐药葡萄球菌。除四环素、克林霉素和利奈唑胺外,屎肠球菌对其他抗菌药物耐药率均高于粪肠球菌;两者中均有少数万古霉素、替考拉宁和利奈唑胺耐药株,耐药率均<3%。碳青霉烯类抗生素依然对肠杆菌科细菌保持良好的抗菌活性,耐药率均<10%。肺炎克雷伯菌对亚胺培南、美罗培南的耐药率分别为7.1%和9.9%,比2011年明显升高。铜绿假单胞菌对亚胺培南和美罗培南的耐药率分别为18.9%和17.8%。鲍曼不动杆菌对亚胺培南和美罗培南的耐药率均>60%,高于全国平均水平(60.0%,2016年)。结论老年患者临床分离菌的耐药及分布特点不同于全国平均水平。经验用药应参考老年人群耐药监测数据,根据药敏试验结果合理选用抗菌药物。 展开更多
关键词 老年患者 细菌耐药性监测 耐药性 碳青霉烯类耐药肠杆菌科细菌
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ALKBH5通过抑制上皮-间质转化降低人滋养细胞的迁移和侵袭能力 被引量:3
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作者 何建萍 李晓娟 +4 位作者 吕梦欣 王珏 唐健 罗胜军 钱源 《南方医科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2020年第12期1720-1725,共6页
目的探讨去甲基酶ALKBH5对滋养细胞HTR-8/SVneo迁移、侵袭功能及对上皮-间质转化(EMT)过程的影响。方法将ALKBH5高表达、抑制及其阴性对照NC质粒转染人滋养细胞系HTR-8/SVneo细胞,采用实时荧光定量PCR(qRT-PCR)及Westen boltting(WB)实... 目的探讨去甲基酶ALKBH5对滋养细胞HTR-8/SVneo迁移、侵袭功能及对上皮-间质转化(EMT)过程的影响。方法将ALKBH5高表达、抑制及其阴性对照NC质粒转染人滋养细胞系HTR-8/SVneo细胞,采用实时荧光定量PCR(qRT-PCR)及Westen boltting(WB)实验检测各组细胞中ALKBH5 mRNA及ALKBH5蛋白的表达水平。并通过Transwell实验检测转染后滋养细胞迁移、侵袭功能变化,同时通过WB实验检测各组细胞中上皮-间质转化(EMT)相关蛋白:Vimentin、Fibronectin、E-cadherin、N-cadherin、MMP9及MMP2的表达水平。结果ALKBH5组与未转染组(Control)和无意义序列组(NC)相比,ALKBH5 mRNA及蛋白高表达效果显著(P<0.05);shALKBH5组与未转染组(Control)和无意义序列组(NC)相比,ALKBH5 mRNA及蛋白抑制效果显著(P<0.05)。ALKBH5高表达后HTR-8/Svneo细胞迁移、侵袭功能降低(P<0.05),EMT相关蛋白中上皮标记物E-cadherin蛋白表达上调,间质标记物Fibronectin、N-cadherin、MMP2蛋白表达下调,差异有统计学意义(P<0.05)。ALKBH5表达抑制后HTR-8/Svneo细胞迁移、侵袭功能增强(P<0.05),EMT相关蛋白中上皮标记物E-cadherin蛋白表达下调,间质标记物Fibronectin、N-cadherin、MMP2蛋白表达上调,差异有统计学意义(P<0.05)。结论ALKBH5通过抑制EMT过程降低滋养细胞迁移、侵袭能力,从而参与子痫前期的发病机制。 展开更多
关键词 ALKBH同源蛋白5 子痫前期 上皮-间质转化 细胞迁移 细胞侵袭
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DNMT3a在氢醌致造血干细胞毒性中的作用研究 被引量:1
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作者 武坤 聂波 +5 位作者 杨金荣 贺振新 程沈菊 李艳红 晋臻 史明霞 《中国实验血液学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2022年第2期607-612,共6页
目的:探讨DNA甲基转移酶3A(DNMT3a)在氢醌(HQ)致造血干细胞毒性中的调控作用及其机制。方法:人造血干细胞HSPC-1随机分为4组,A组:正常HSPC-1;B组:HQ干预HSPC-1;C组:B组+转染pcDNA3空载体;D组:B组+pcDNA3-DNMT3a。采用RT-qPCR法检测DNMT3... 目的:探讨DNA甲基转移酶3A(DNMT3a)在氢醌(HQ)致造血干细胞毒性中的调控作用及其机制。方法:人造血干细胞HSPC-1随机分为4组,A组:正常HSPC-1;B组:HQ干预HSPC-1;C组:B组+转染pcDNA3空载体;D组:B组+pcDNA3-DNMT3a。采用RT-qPCR法检测DNMT3a、PARP-1 mRNA表达情况;免疫印迹法检测DNMT3a、PARP-1蛋白表达水平。显微镜下观察细胞形态;MTT、流式细胞术分别检测细胞活力和凋亡率。结果:与A组相比,B组细胞DNMT3a mRNA及蛋白表达降低、PARP-1 mRNA及蛋白水平升高(P<0.05);C组与B组相比上述指标差异无统计学意义(P>0.05);D组HSPC-1转染DNMT3a后,DNMT3a mRNA及蛋白水平较B组升高,PARP-1 mRNA及蛋白水平降低(P<0.05)。各组细胞转染DNMT3a后继续培养24 h, A组HSPC-1高密度生长,呈现的单核融合生长,B组及C组HSPC-1数目减少、生长缓慢;与B组和C组相比,D组细胞生长速度加快。MTT分析显示,B组各时间点HSPC-1细胞活力均明显低于A组(P<0.05),与C组比较无明显差异(P>0.05);转染24、48、72 h后D组细胞活力均明显高于B组(P<0.05)。B组细胞凋亡率明显高于A组(P<0.001),与C组无显著差异(P>0.05),D组细胞凋亡率明显低于B组(P<0.001)。结论:DNMT3a可能参与氢醌所致造血干细胞损伤过程,氢醌细胞损伤作用的发挥可能与DNMT3a表达受抑后对PARP-1活性的调节有关。 展开更多
关键词 造血干细胞 DNMT3a 氢醌 PARP-1 形态 凋亡
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HOTAIR过表达慢病毒载体的构建及稳定细胞株的建立 被引量:3
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作者 李晓娟 王珏 +2 位作者 何建萍 吕梦欣 钱源 《安徽医科大学学报》 CAS 北大核心 2021年第5期683-687,共5页
目的构建稳定过表达HOTAIR的人滋养细胞HTR-8/SVneo细胞系,并验证HOTAIR的表达。方法利用PCR技术扩增HOTAIR基因全长序列,并将其克隆入LV5载体中,构建LV5-HOTAIR载体,重组质粒经双酶切鉴定及测序验证成功后,转染人胚肾细胞293T,包装过... 目的构建稳定过表达HOTAIR的人滋养细胞HTR-8/SVneo细胞系,并验证HOTAIR的表达。方法利用PCR技术扩增HOTAIR基因全长序列,并将其克隆入LV5载体中,构建LV5-HOTAIR载体,重组质粒经双酶切鉴定及测序验证成功后,转染人胚肾细胞293T,包装过表达病毒颗粒,制备并浓缩慢病毒颗粒。将构建好的过表达HOTAIR慢病毒载体感染HTR-8/SVneo细胞,采用嘌呤霉素筛选出HOTAIR稳定表达的细胞系,荧光显微镜观察绿色荧光表达;qRT-PCR验证HOTAIR表达。结果重组质粒酶切得到的条带与预期相符,过表达HOTAIR慢病毒载体中序列与目标序列一致。荧光显微镜下过表达HOTAIR组细胞有绿色荧光表达;qRT-PCR结果表明过表达HOTAIR的HTR-8/Svneo稳定细胞株中HOTAIR表达是Control组的206.3倍(P<0.05),是NC组的232.8倍(P<0.05)。结论成功建立稳定过表达HOTAIR的HTR-8/SVneo细胞,且过表达HOTAIR的HTR-8/Svneo稳定细胞株中HOTAIR mRNA表达水平明显升高。 展开更多
关键词 HOTAIR 慢病毒载体 HTR-8/Svneo 子痫前期
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2012年中国西南地区Whire Union革兰阳性球菌耐药性监测 被引量:1
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作者 刘宝 杨焕婕 +4 位作者 杜艳 单斌 谢轶 康梅 费樱 《中国抗生素杂志》 CAS CSCD 北大核心 2014年第7期529-533,共5页
目的了解2012年中国西南地区Whire Union监测网络医院临床分离的革兰阳性球菌临床分布及耐药情况。方法西南地区3家教学医院对临床分离的革兰阳性球菌采用VITEK-2微生物自动鉴定仪(生物梅里埃,法国)或Walkaway 96SI微生物自动鉴定仪(西... 目的了解2012年中国西南地区Whire Union监测网络医院临床分离的革兰阳性球菌临床分布及耐药情况。方法西南地区3家教学医院对临床分离的革兰阳性球菌采用VITEK-2微生物自动鉴定仪(生物梅里埃,法国)或Walkaway 96SI微生物自动鉴定仪(西门子,德国)以及相应复合药敏板卡进行细菌鉴定和药敏试验。采用WHONET 5.5和SPSS16软件进行统计分析。结果分离革兰阳性球菌4071株,其中葡萄球菌属占67.9%(2764株),肠球菌属占20.2%(822株),链球菌属4.9%(199株)。阳性标本3933份,位列前3位的标本分别为分泌物/脓(27.4%),血液(19.3%)和痰液(17.5%)。MRSA和MRCNS的分离率分别为38.4%和83.9%。未发现万古霉素和利奈唑胺耐药的葡萄球菌。屎肠球菌总体耐药率高于粪肠球菌。屎肠球菌和粪肠球菌对万古霉素的耐药率分别为5.9%和0.8%;对利柰唑胺的耐药率分别为2.7%和2.1%。青霉素对肺炎链球菌仍具有较高的敏感率(>95%)。结论革兰阳性球菌引起的感染在临床占有一定的比例,万古霉素和利奈唑胺对葡萄球菌、肠球菌、链球菌仍有很高抗菌活性。治疗粪肠球菌引起的严重感染可选择联合用药方案,以减少糖肽类抗生素的耐药压力。青霉素仍是治疗肺炎链球菌相关肺炎的首选药物。分析革兰阳性球菌耐药信息可为临床提供治疗参考,也有利于控制细菌耐药性蔓延。 展开更多
关键词 耐药性 革兰阳性球菌 葡萄球菌 肠球菌 肺炎链球菌
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高黏液型肺炎克雷伯菌毒力基因及分子流行病学研究 被引量:2
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作者 刘淑敏 杜艳 毕建蝶 《中国抗生素杂志》 CAS CSCD 北大核心 2023年第6期672-677,共6页
目的分析临床分离的高黏液型肺炎克雷伯菌(hypermucoviscous Klebsiella pneumoniae,HMKP)的耐药性、毒力基因及其分子流行病学特征,为有效防治高毒力肺炎克雷伯菌(hypervirulent Klebsiella pneumoniae,HVKP)的克隆传播提供依据。方法... 目的分析临床分离的高黏液型肺炎克雷伯菌(hypermucoviscous Klebsiella pneumoniae,HMKP)的耐药性、毒力基因及其分子流行病学特征,为有效防治高毒力肺炎克雷伯菌(hypervirulent Klebsiella pneumoniae,HVKP)的克隆传播提供依据。方法通过拉丝试验收集非重复HMKP菌株。采用PCR检测毒力基因、荚膜血清型及进行多位点序列分型(MLST)。分别比较K1型和K2型菌株毒力基因携带模式的差异,以及毒力基因rmpA或rmpA2阳性组与阴性组毒力基因的携带情况。结果共收集HMKP菌株42株,标本来源以痰液为主(88.10%),主要的疾病分布为肿瘤(26.19%)、呼吸系统疾病(21.43%)、脑部疾病(21.43%)。荚膜血清型以K1(28.57%)和K2(33.33%)型为主,85.71%的菌株携带高毒力基因rmpA/rmpA2和iucA/iutA。MLST以ST23(21.43%)、ST86(19.05%)最常见。K1型和K2型有不同的毒力基因携带模式,K1型携带的毒力基因数多于K2型。rmpA或rmpA2阳性组的毒力基因rmpA2或rmpA、iucA、iutA携带率高于其阴性组(P<0.05)。结论本院HMKP以K1、K2荚膜血清型为主,ST型主要为ST23、ST86,85.71%的菌株为携带高毒力基因rmpA/rmpA2和iucA/iutA的HVKP。 展开更多
关键词 高黏液型肺炎克雷伯菌 毒力基因 分子流行特征
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