目的·探讨磷脂酰乙醇胺(phosphatidylethanolamine,PE)对巨噬细胞衰老及其衰老相关分泌表型的影响和分子机制,以及PE在肝损伤中的病理生理学意义。方法·利用阿霉素建立巨噬细胞衰老模型,并给予PE处理。通过腹腔联合注射PE和...目的·探讨磷脂酰乙醇胺(phosphatidylethanolamine,PE)对巨噬细胞衰老及其衰老相关分泌表型的影响和分子机制,以及PE在肝损伤中的病理生理学意义。方法·利用阿霉素建立巨噬细胞衰老模型,并给予PE处理。通过腹腔联合注射PE和脂多糖构建小鼠肝损伤模型,观察PE对肝损伤的影响。采用衰老相关β-半乳糖苷酶(senescence-associatedβ-galactosidase,SA-β-gal)染色,结合实时荧光定量PCR、Western blotting等检测细胞周期抑制蛋白p21、肿瘤坏死因子-α(tumor necrosis factor-α,TNF-α)和白介素-6(interleukin-6,IL-6)等衰老标志物及衰老相关分泌表型生物活性因子的表达水平。通过RNA测序结合基因本体论(Gene Ontology,GO)细胞组分富集分析、京都基因与基因组百科全书(Kyoto Encyclopedia of Genes and Genomes,KEGG)通路富集分析、基因集变异分析(Gene Set Variation Analysis,GSVA)和基因集富集分析(Gene Set Enrichment Analysis,GSEA)筛选PE促进巨噬细胞衰老的信号通路及分子机制。通过体内和体外实验检测内质网应激相关通路中肌醇需求酶1α(inositol requiring enzyme 1α,IRE1α)、剪接型X盒结合蛋白1(spliced X box binding protein 1,XBP1s)、转录激活因子6(activating transcription factor 6,ATF6)、ATF4、C/EBP同源蛋白(C/EBP homologous protein,CHOP)的表达。结果·PE显著促进巨噬细胞衰老标志物SA-β-gal、p21、p16及衰老相关分泌表型生物活性因子的表达。RNA测序分析显示内质网应激参与PE促进衰老相关分泌表型表达的作用。进一步的实验表明,PE通过激活巨噬细胞内质网应激信号通路促进巨噬细胞衰老及衰老相关分泌表型表达。体内实验证实PE通过内质网应激加剧脂多糖诱导的小鼠肝损伤。结论·PE通过激活内质网应激信号通路,促进巨噬细胞衰老及衰老相关分泌表型生物活性因子分泌,进而加重脂多糖诱导的肝损伤。展开更多
目的研究大麻二酚(CBD)及其纳米制剂对小鼠抑郁样行为的影响及机制。方法腹腔注射脂多糖(LPS)诱导急性焦虑抑郁小鼠模型。将55只小鼠随机分组:长期实验分为正常(Con)组、模型(LPS)组、大麻二酚(CBD)组、纳米大麻二酚(NCBD)组、舍曲林(S...目的研究大麻二酚(CBD)及其纳米制剂对小鼠抑郁样行为的影响及机制。方法腹腔注射脂多糖(LPS)诱导急性焦虑抑郁小鼠模型。将55只小鼠随机分组:长期实验分为正常(Con)组、模型(LPS)组、大麻二酚(CBD)组、纳米大麻二酚(NCBD)组、舍曲林(SER)组,每组7只;短期实验分为Con组、LPS组、CBD组、NCBD组,每组5只。除Con组和LPS组给予蒸馏水,其余组灌胃给予25、50 mg/kg CBD及其纳米制剂。采用旷场和强迫游泳实验检测小鼠焦虑及抑郁样行为,Luxol Fast Blue髓鞘染色检测前额皮层中髓鞘形态,免疫荧光染色检测前额皮层中沉默信息调节因子2(SIRT2)、离子钙结合衔接分子1(Iba-1)和白细胞介素-1β(IL-1β)蛋白表达。结果长期实验中与Con组比较,LPS组小鼠穿梭次数减少(P<0.05),不动时间百分比增加(P<0.01),髓鞘数量及长度减少(P<0.05);与LPS组相比,CBD组、NCBD组、SER组小鼠抑郁样行为减少(P<0.01),髓鞘数量及长度增加(P<0.05)。短期实验中与Con组比较,LPS组小鼠焦虑抑郁样行为增加(P<0.05),SIRT2表达降低(P<0.01),Iba-1、IL-1β表达增加(P<0.01);与LPS组相比,CBD组、NCBD组小鼠焦虑样行为减少(P<0.05),SIRT2表达增加(P<0.01),Iba-1、IL-1β表达降低(P<0.05)。结论CBD及其纳米制剂可缓解小鼠焦虑、抑郁样行为,作用机制可能与逆转前额皮层中SIRT2蛋白表达、脱髓鞘变化、小胶质细胞活化及炎症因子的水平相关。展开更多
目的:探讨ErbB受体反馈抑制物1(ERRFI1)在成年昆明小鼠脑组织不同部位的mRNA和蛋白质表达情况。方法:选用成年健康雌性昆明小鼠,取脑组织的额叶、顶叶、枕叶、颞叶、丘脑、小脑和海马等部位,采取RT-PCR、real time RT-PCR检测ERRFI1 mRN...目的:探讨ErbB受体反馈抑制物1(ERRFI1)在成年昆明小鼠脑组织不同部位的mRNA和蛋白质表达情况。方法:选用成年健康雌性昆明小鼠,取脑组织的额叶、顶叶、枕叶、颞叶、丘脑、小脑和海马等部位,采取RT-PCR、real time RT-PCR检测ERRFI1 mRNA在各脑区的表达情况;采取Western Blot检测ERRFI1蛋白质在各脑区的表达情况;再采取免疫组织化学技术的方法对不同部位脑组织ERRFI1蛋白质进行表达与定位情况的研究。结果:ERRFI1 mRNA在小鼠脑组织的额叶、顶叶、枕叶、颞叶、丘脑、小脑和海马等部位均有表达,且表达没有显著差异;而ERRFI1蛋白质在小脑的表达显著高于额叶、顶叶、枕叶、颞叶、丘脑和海马(P<0.05);免疫组化结果显示,ERRFI1在大脑皮质及脑干的部分神经元、海马少数锥体细胞及颗粒细胞、海马分子层及多形层的胶质细胞、小脑的部分神经元、浦肯野细胞、高尔基细胞等呈阳性表达,嗅球的小球周细胞、僧帽细胞、颗粒细胞等也呈阳性。结论:ERRFI1在成年昆明小鼠的脑组织中广泛表达。展开更多
文摘目的·探讨磷脂酰乙醇胺(phosphatidylethanolamine,PE)对巨噬细胞衰老及其衰老相关分泌表型的影响和分子机制,以及PE在肝损伤中的病理生理学意义。方法·利用阿霉素建立巨噬细胞衰老模型,并给予PE处理。通过腹腔联合注射PE和脂多糖构建小鼠肝损伤模型,观察PE对肝损伤的影响。采用衰老相关β-半乳糖苷酶(senescence-associatedβ-galactosidase,SA-β-gal)染色,结合实时荧光定量PCR、Western blotting等检测细胞周期抑制蛋白p21、肿瘤坏死因子-α(tumor necrosis factor-α,TNF-α)和白介素-6(interleukin-6,IL-6)等衰老标志物及衰老相关分泌表型生物活性因子的表达水平。通过RNA测序结合基因本体论(Gene Ontology,GO)细胞组分富集分析、京都基因与基因组百科全书(Kyoto Encyclopedia of Genes and Genomes,KEGG)通路富集分析、基因集变异分析(Gene Set Variation Analysis,GSVA)和基因集富集分析(Gene Set Enrichment Analysis,GSEA)筛选PE促进巨噬细胞衰老的信号通路及分子机制。通过体内和体外实验检测内质网应激相关通路中肌醇需求酶1α(inositol requiring enzyme 1α,IRE1α)、剪接型X盒结合蛋白1(spliced X box binding protein 1,XBP1s)、转录激活因子6(activating transcription factor 6,ATF6)、ATF4、C/EBP同源蛋白(C/EBP homologous protein,CHOP)的表达。结果·PE显著促进巨噬细胞衰老标志物SA-β-gal、p21、p16及衰老相关分泌表型生物活性因子的表达。RNA测序分析显示内质网应激参与PE促进衰老相关分泌表型表达的作用。进一步的实验表明,PE通过激活巨噬细胞内质网应激信号通路促进巨噬细胞衰老及衰老相关分泌表型表达。体内实验证实PE通过内质网应激加剧脂多糖诱导的小鼠肝损伤。结论·PE通过激活内质网应激信号通路,促进巨噬细胞衰老及衰老相关分泌表型生物活性因子分泌,进而加重脂多糖诱导的肝损伤。
文摘目的研究大麻二酚(CBD)及其纳米制剂对小鼠抑郁样行为的影响及机制。方法腹腔注射脂多糖(LPS)诱导急性焦虑抑郁小鼠模型。将55只小鼠随机分组:长期实验分为正常(Con)组、模型(LPS)组、大麻二酚(CBD)组、纳米大麻二酚(NCBD)组、舍曲林(SER)组,每组7只;短期实验分为Con组、LPS组、CBD组、NCBD组,每组5只。除Con组和LPS组给予蒸馏水,其余组灌胃给予25、50 mg/kg CBD及其纳米制剂。采用旷场和强迫游泳实验检测小鼠焦虑及抑郁样行为,Luxol Fast Blue髓鞘染色检测前额皮层中髓鞘形态,免疫荧光染色检测前额皮层中沉默信息调节因子2(SIRT2)、离子钙结合衔接分子1(Iba-1)和白细胞介素-1β(IL-1β)蛋白表达。结果长期实验中与Con组比较,LPS组小鼠穿梭次数减少(P<0.05),不动时间百分比增加(P<0.01),髓鞘数量及长度减少(P<0.05);与LPS组相比,CBD组、NCBD组、SER组小鼠抑郁样行为减少(P<0.01),髓鞘数量及长度增加(P<0.05)。短期实验中与Con组比较,LPS组小鼠焦虑抑郁样行为增加(P<0.05),SIRT2表达降低(P<0.01),Iba-1、IL-1β表达增加(P<0.01);与LPS组相比,CBD组、NCBD组小鼠焦虑样行为减少(P<0.05),SIRT2表达增加(P<0.01),Iba-1、IL-1β表达降低(P<0.05)。结论CBD及其纳米制剂可缓解小鼠焦虑、抑郁样行为,作用机制可能与逆转前额皮层中SIRT2蛋白表达、脱髓鞘变化、小胶质细胞活化及炎症因子的水平相关。
