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用无细胞蛋白合成系统重组表达恶性疟原虫蛋白的研究
被引量：
1
1
作者
曹俊
金子修
+4 位作者
坪井敬文
鸟居本美
诸葛洪祥
夏超明
高琪
《中国人兽共患病学报》
CAS
CSCD
北大核心
2008年第9期816-819,823,共5页
目的探索无细胞麦芽体外蛋白合成系统重组表达恶性疟原虫蛋白可行性,并检测用重组蛋白制备的免疫血清对原虫蛋白的特异性反应。方法将目的蛋白PfRON2的部分片断克隆连接到重组表达载体后,用无细胞麦芽体外蛋白合成系统进行重组表达并纯...
目的探索无细胞麦芽体外蛋白合成系统重组表达恶性疟原虫蛋白可行性,并检测用重组蛋白制备的免疫血清对原虫蛋白的特异性反应。方法将目的蛋白PfRON2的部分片断克隆连接到重组表达载体后,用无细胞麦芽体外蛋白合成系统进行重组表达并纯化,用纯化的重组蛋白免疫小鼠制备免疫血清,并用免疫斑点实验(Western blot)和免疫荧光抗体实验(IFA)检测该血清对恶性疟蛋白的特异性反应。结果成功克隆的重组质粒能在无细胞麦芽体外蛋白合成系统中生成大小相符的GST融合蛋白,并能较好地纯化。免疫斑点实验中,用该重组蛋白制备的免疫血清能检测到重组蛋白和恶性疟目标蛋白,免疫荧光抗体实验显示该免疫血清能成功地标记恶性疟目标蛋白所在部位。结论无细胞麦芽体外蛋白合成系统可应用于恶性疟原虫蛋白的重组表达,获得的免疫血清能特异性识别疟原虫蛋白。
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关键词
无细胞蛋白合成
恶性疟原虫
重组表达
免疫血清
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职称材料
题名
用无细胞蛋白合成系统重组表达恶性疟原虫蛋白的研究
被引量：
1
1
作者
曹俊
金子修
坪井敬文
鸟居本美
诸葛洪祥
夏超明
高琪
机构
苏州
大学
医学院基础医学系
日本
长崎
大学
热带病研究所
日本
爱媛
大学
无细胞技术研究中心
日本爱媛大学分子寄生虫教研室
江苏省血吸虫
寄生虫
病防治研究所
出处
《中国人兽共患病学报》
CAS
CSCD
北大核心
2008年第9期816-819,823,共5页
基金
国家自然科学基金资助(No.30700695)
文摘
目的探索无细胞麦芽体外蛋白合成系统重组表达恶性疟原虫蛋白可行性,并检测用重组蛋白制备的免疫血清对原虫蛋白的特异性反应。方法将目的蛋白PfRON2的部分片断克隆连接到重组表达载体后,用无细胞麦芽体外蛋白合成系统进行重组表达并纯化,用纯化的重组蛋白免疫小鼠制备免疫血清,并用免疫斑点实验(Western blot)和免疫荧光抗体实验(IFA)检测该血清对恶性疟蛋白的特异性反应。结果成功克隆的重组质粒能在无细胞麦芽体外蛋白合成系统中生成大小相符的GST融合蛋白,并能较好地纯化。免疫斑点实验中,用该重组蛋白制备的免疫血清能检测到重组蛋白和恶性疟目标蛋白,免疫荧光抗体实验显示该免疫血清能成功地标记恶性疟目标蛋白所在部位。结论无细胞麦芽体外蛋白合成系统可应用于恶性疟原虫蛋白的重组表达,获得的免疫血清能特异性识别疟原虫蛋白。
关键词
无细胞蛋白合成
恶性疟原虫
重组表达
免疫血清
Keywords
cell-free protein expression system
Plasmodium falciparum
recombinant protein
antiserum
分类号
R382.3 [医药卫生—医学寄生虫学]
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题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
用无细胞蛋白合成系统重组表达恶性疟原虫蛋白的研究
曹俊
金子修
坪井敬文
鸟居本美
诸葛洪祥
夏超明
高琪
《中国人兽共患病学报》
CAS
CSCD
北大核心
2008
1
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