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影响猪胚冷冻效果的若干因素的研究 被引量:6
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作者 徐晓波 小岛敏之 +1 位作者 刘铁铮 葛云山 《江苏农业学报》 CSCD 1996年第4期41-46,共6页
屠宰(或手术)采取3~7日龄猪胚,分别就胚胎不同发育时期,25℃和-7℃两个冷冻起始温度,甘油、丙二醇和乙二醇3种防冻剂及6%、8%、10%3种甘油浓度进行冷冻比较。结果表明,冷冻解冻后及解冻后在M16+10%FCS... 屠宰(或手术)采取3~7日龄猪胚,分别就胚胎不同发育时期,25℃和-7℃两个冷冻起始温度,甘油、丙二醇和乙二醇3种防冻剂及6%、8%、10%3种甘油浓度进行冷冻比较。结果表明,冷冻解冻后及解冻后在M16+10%FCS中培养24小时的胚胎存活率均与胚胎发育时期有关。胚胎存活率以孵化囊胚最高,分别为58.8%和52.9%,高于体内发育(24.4%和17.1%)或体外培养发育(21.4%和17.9%)的扩张囊胚和体内发育(40.5%和28.6%)或体外培养发育(40.0%和30.0%)的孵出囊胚,而桑椹胚至囊胚、体内发育至第五天的扩张囊胚及第七天的孵出囊胚均无存活;25℃和-7℃分别作为冷冻起始温度时,冷冻解冻后胚胎存活率没有差异;3种防冻剂以甘油的防冻效果最好,其用于扩张囊胚及孵出囊胚冷冻解冻后培养24小时的存活率分别为25.0%和35.5%,丙二醇或乙二醇均在13.3%以下;在3种甘油浓度中以10%略好。 展开更多
关键词 猪胚 胚胎 发育时期 防冻剂 甘油浓度 冷冻 温度
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利用几根猪毛进行PCR扩增以检测氟烷基因的基因型 被引量:10
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作者 孙有平 小松正宪 +4 位作者 中岛惠美子 大西彰 川上和夫 武田久美子 包承玉 《江苏农业学报》 CSCD 1995年第1期1-5,共5页
采集30头日本某原种猪场杜洛克猪4根毛样,以简便的方法快速抽提DNA,并进行PCR扩增,得到特异的659bp的PCR扩增产物,其中含有C1843或T1843的位点,经过HhaⅠ和BsikhaⅠ(相当于HgiAⅠ)内切... 采集30头日本某原种猪场杜洛克猪4根毛样,以简便的方法快速抽提DNA,并进行PCR扩增,得到特异的659bp的PCR扩增产物,其中含有C1843或T1843的位点,经过HhaⅠ和BsikhaⅠ(相当于HgiAⅠ)内切酶消化,得到酶切图谱,根据带型判断其发生变异与否。结果表明:①用猪毛进行PCR扩增,方法简便,一次可大批量地处理样品,该方法是行之有效的。②用2~4根猪毛即可进行DNA诊断,不需纯化DNA。③在被检测的30头杜洛克猪中,发现3头杂合子(N/n),其余27头为正常阴性纯合子(N/N)。 展开更多
关键词 猪毛 PCR扩增 氟烷基因 应激综合征
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梅山猪血型的调查
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作者 孙有平 葛云山 +3 位作者 刘铁铮 包承玉 徐晓波 大石孝雄 《江苏农业学报》 CSCD 1993年第2期46-47,共2页
采集41头梅山猪的血液,用国际标准化抗血清调查了5个系统(A、E、K、L,O)的血型位点的变异,结果表明:梅山猪5个位点的血型都具有多态性,A系统的表型频率A为0.415、O为0.561、—为0.024;其他位点的基因频率是:E^(aeg)为0.159、E^(edg)为0.... 采集41头梅山猪的血液,用国际标准化抗血清调查了5个系统(A、E、K、L,O)的血型位点的变异,结果表明:梅山猪5个位点的血型都具有多态性,A系统的表型频率A为0.415、O为0.561、—为0.024;其他位点的基因频率是:E^(aeg)为0.159、E^(edg)为0.841、K^a为0.634、K^b为0.145、K^-为0.221、L^(hk)为0.293、L^h为0.707、O^a为0.280、O为0.726。E和K位点基因具有平衡性,符合Hardy—Weinberg定律。与美浓猪(亚州猪)相比,E、K、L.位点具有一定差异,特别是出现了K^-基因,这有待进一步研究。 展开更多
关键词 品种 梅山猪 血型
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热处理对猪胚耐低温性的影响
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作者 徐晓波 小岛敏之 +1 位作者 刘铁锋 葛云山 《江苏农业学报》 CSCD 1994年第3期42-45,共4页
手术(或屠宰)采取猪囊胚(B)、扩张囊胚(EB)、孵出囊胚(HB),分别进行热处理(HS)、蛋白合成抑制剂(CH)和低温应激(CS)试验。结果,热处理与蛋白合成抑制剂对猪胚的生存率及发育率均无影响(P>0.05);而... 手术(或屠宰)采取猪囊胚(B)、扩张囊胚(EB)、孵出囊胚(HB),分别进行热处理(HS)、蛋白合成抑制剂(CH)和低温应激(CS)试验。结果,热处理与蛋白合成抑制剂对猪胚的生存率及发育率均无影响(P>0.05);而热处理对提高猪胚的耐低温性有显著效果。热处理组经低温应激后,24小时培养的EB和HB的存活细胞数分别较对照组提高35.5%-41.3%和51.1%,差异显著(P<0.05),且蛋白合成抑制剂具有抬抗热处理的作用。上述结果显示,热处理有可能诱发猪胚产生拈抗第二次应激的应激蛋白,这为进一步研究猪胚冷冻和改进猪胚冷冻前处理提供了依据和可能途径。 展开更多
关键词 猪胚 热处理 应激蛋白 耐低温性
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猪滋养层细胞囊泡的冷冻保存
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作者 刘铁铸 小岛敏之 +1 位作者 徐晓波 葛云山 《江苏农业学报》 CSCD 1994年第2期28-32,共5页
冲洗和轻微抖动子宫角收集猪14日龄的伸展胚胎,剪成0.5mm左右节段,培养2小时,将体外形成的滋养层细胞囊泡(TrophoblasticVesiclesTRV)在含10%甘油(处理1)或10%甘油和0.2M海藻糖(处理... 冲洗和轻微抖动子宫角收集猪14日龄的伸展胚胎,剪成0.5mm左右节段,培养2小时,将体外形成的滋养层细胞囊泡(TrophoblasticVesiclesTRV)在含10%甘油(处理1)或10%甘油和0.2M海藻糖(处理2)的Hepes-M199(BSA)冷冻液中平衡并装入0.25ml的塑料细管。处理1和处理2的细管降温至-7℃后植冻并保持10分钟,再以-0.5℃/分钟的速率分别降至-25℃和-36℃后直接浸入液氮保存。细管在室温下解冻,用含0.5M蔗糖的Hepes-M199(BSA)除去抗冻剂,洗涤5次后进行培养。上述不同方法冷冻的猪TRV在解冻后24-48小时以生长囊泡计算成活率,分别为84.8%和79.3%,即可为有关研究提供稳定而可靠的猪TRV来源。该研究还对猪TRV体外培养和冷冻过程中的形态学变化及其分类进行了光镜观察和讨论。 展开更多
关键词 滋养层细胞 囊泡 冷冻保存 胚胎
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