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电泳制备家蝇幼虫抗菌肽及其性质
被引量：
23
1
作者
宫霞
乐国伟
+1 位作者
施用晖
付景春
《无锡轻工大学学报（食品与生物技术）》
CSCD
北大核心
2003年第6期25-30,38,共7页
通过体壁损伤法诱导家蝇幼虫产生免疫血淋巴,经沸水浴热变性,透析浓缩处理,后经Tricine SDS PAGE得到诱导前后家蝇幼虫血淋巴中蛋白差异表达带,将该条带电泳回收,复性,抗菌活性检测等步骤,分离纯化得到3种抗菌肽:MDL 1、MDL 2、MDL 3....
通过体壁损伤法诱导家蝇幼虫产生免疫血淋巴,经沸水浴热变性,透析浓缩处理,后经Tricine SDS PAGE得到诱导前后家蝇幼虫血淋巴中蛋白差异表达带,将该条带电泳回收,复性,抗菌活性检测等步骤,分离纯化得到3种抗菌肽:MDL 1、MDL 2、MDL 3.研究结果表明:MDL 1分子中富含Gly,相对分子质量为6200,对革兰氏阴性菌E.coli有较强抗性;MDL 2分子中富含Pro,相对分子质量为11000,对革兰氏阴性菌E.coli和革兰氏阳性菌S.aureus均有抗性;MDL 3分子中富含Gly,相对分子质量为14000,对革兰氏阳性菌S.aureus有较强抗性;3种抗菌肽具有很强的温度耐受性,均没有凝血活性和溶血活性.同时电泳制备抗菌肽的实验方法为此类微量生物活性物质的分离纯化提供了有效的途径.
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关键词
体壁损伤法诱导
家蝇幼虫
抗菌肽
电泳制备
分离
纯化
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职称材料
微囊藻毒素-LR超灵敏均相免疫分析方法的建立与优化
被引量：
2
2
作者
张艺
黄飚
+2 位作者
钮伟民
赵灿培
金坚
《中国药理学与毒理学杂志》
CAS
CSCD
北大核心
2014年第3期432-437,共6页
目的基于多克隆抗体免疫分析,构建并优化一种超灵敏、均相的光激化学发光法（AlphaLISA）,用以检测水体中微囊藻毒素（MC）-LR含量。方法采用竞争原理,MC-LR人工抗原偶联的发光微球与标准品或样品MC-LR共同竞争限量一抗,再被二抗捕获,...
目的基于多克隆抗体免疫分析,构建并优化一种超灵敏、均相的光激化学发光法（AlphaLISA）,用以检测水体中微囊藻毒素（MC）-LR含量。方法采用竞争原理,MC-LR人工抗原偶联的发光微球与标准品或样品MC-LR共同竞争限量一抗,再被二抗捕获,然后再通过生物素-亲和素与感光微球形成成免疫复合物,此时感光微球与发光微球发生接近,则产生并传递能量,发出特殊荧光。选择了合适的一抗和二抗工作稀释度,比较缓冲体系和反应时间的作用,从而优化了反应条件。结果通过优化反应条件,即筛选合适的一抗和二抗反应浓度、缓冲体系和反应时间,从而构建了MC-LR AlphaLISA检测法,其总反应时间40 min,灵敏度0.006μg·L^-1,可测线性范围0.006～5μg·L^-1,变异系数小于10%,平均添加回收率107.7%,与MC-RR和MC-RY的交叉反应率分别为13.2%和0.91%。结论本研究方法灵敏度高,特异性好,免疫反应迅速,适用于多样本量水体的MC-LR检测。
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关键词
微囊藻毒素
微囊藻毒素-LR
化学发光测定法
均相免疫分析
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职称材料
题名
电泳制备家蝇幼虫抗菌肽及其性质
被引量：
23
1
作者
宫霞
乐国伟
施用晖
付景春
机构
江南大学食品学院营养与生物技术研究室
无锡市疾病预防控制中心检验部
出处
《无锡轻工大学学报（食品与生物技术）》
CSCD
北大核心
2003年第6期25-30,38,共7页
基金
中央级科研院所基础性专项资金项目(2001DEA-20022)资助课题.
文摘
通过体壁损伤法诱导家蝇幼虫产生免疫血淋巴,经沸水浴热变性,透析浓缩处理,后经Tricine SDS PAGE得到诱导前后家蝇幼虫血淋巴中蛋白差异表达带,将该条带电泳回收,复性,抗菌活性检测等步骤,分离纯化得到3种抗菌肽:MDL 1、MDL 2、MDL 3.研究结果表明:MDL 1分子中富含Gly,相对分子质量为6200,对革兰氏阴性菌E.coli有较强抗性;MDL 2分子中富含Pro,相对分子质量为11000,对革兰氏阴性菌E.coli和革兰氏阳性菌S.aureus均有抗性;MDL 3分子中富含Gly,相对分子质量为14000,对革兰氏阳性菌S.aureus有较强抗性;3种抗菌肽具有很强的温度耐受性,均没有凝血活性和溶血活性.同时电泳制备抗菌肽的实验方法为此类微量生物活性物质的分离纯化提供了有效的途径.
关键词
体壁损伤法诱导
家蝇幼虫
抗菌肽
电泳制备
分离
纯化
Keywords
Musca domestica Larvae
antibacterial peptides
electrophoretic preparation
分类号
Q963 [生物学—昆虫学]
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职称材料
题名
微囊藻毒素-LR超灵敏均相免疫分析方法的建立与优化
被引量：
2
2
作者
张艺
黄飚
钮伟民
赵灿培
金坚
机构
江南大学药学院药物设计与分子药理室
江苏省原子医学研究所卫生
部
核医学重点实验室
无锡市疾病预防控制中心检验部
出处
《中国药理学与毒理学杂志》
CAS
CSCD
北大核心
2014年第3期432-437,共6页
基金
江苏省“333高层次人才培养工程”(BRA20122209)~~
文摘
目的基于多克隆抗体免疫分析,构建并优化一种超灵敏、均相的光激化学发光法（AlphaLISA）,用以检测水体中微囊藻毒素（MC）-LR含量。方法采用竞争原理,MC-LR人工抗原偶联的发光微球与标准品或样品MC-LR共同竞争限量一抗,再被二抗捕获,然后再通过生物素-亲和素与感光微球形成成免疫复合物,此时感光微球与发光微球发生接近,则产生并传递能量,发出特殊荧光。选择了合适的一抗和二抗工作稀释度,比较缓冲体系和反应时间的作用,从而优化了反应条件。结果通过优化反应条件,即筛选合适的一抗和二抗反应浓度、缓冲体系和反应时间,从而构建了MC-LR AlphaLISA检测法,其总反应时间40 min,灵敏度0.006μg·L^-1,可测线性范围0.006～5μg·L^-1,变异系数小于10%,平均添加回收率107.7%,与MC-RR和MC-RY的交叉反应率分别为13.2%和0.91%。结论本研究方法灵敏度高,特异性好,免疫反应迅速,适用于多样本量水体的MC-LR检测。
关键词
微囊藻毒素
微囊藻毒素-LR
化学发光测定法
均相免疫分析
Keywords
microcystin
microcystin-LR
chemiluminescent measurments
homogeneous immunoassay
分类号
R392 [医药卫生—免疫学]
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职称材料
题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
电泳制备家蝇幼虫抗菌肽及其性质
宫霞
乐国伟
施用晖
付景春
《无锡轻工大学学报（食品与生物技术）》
CSCD
北大核心
2003
23
在线阅读
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职称材料
2
微囊藻毒素-LR超灵敏均相免疫分析方法的建立与优化
张艺
黄飚
钮伟民
赵灿培
金坚
《中国药理学与毒理学杂志》
CAS
CSCD
北大核心
2014
2
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职称材料
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