弓形虫B1基因套式PCR检测技术研究 被引量：11

1

作者 糜祖煌 秦玲 《中国人兽共患病杂志》 CSCD 北大核心 1999年第2期63-64,共2页

本文以弓形虫多拷贝的Ｂ１基因为靶基因建立了套式ＰＣＲ检测技术。弓形虫ＲＨ株、新疆、上海、昆山分离株ＤＮＡ均能出现清晰条带，而人组织及其它微生物ＤＮＡ不出现任何条带，弓形虫套式ＰＣＲ较普遍ＰＣＲ敏感１００倍。昆山分离株... 本文以弓形虫多拷贝的Ｂ１基因为靶基因建立了套式ＰＣＲ检测技术。弓形虫ＲＨ株、新疆、上海、昆山分离株ＤＮＡ均能出现清晰条带，而人组织及其它微生物ＤＮＡ不出现任何条带，弓形虫套式ＰＣＲ较普遍ＰＣＲ敏感１００倍。昆山分离株经套式ＰＣＲ扩增并进行ＤＮＡ测序与ＲＨ株完全一致。８０例孕妇外周血经弓形虫套式ＰＣＲ扩增４例阳性，阳性率５％。 展开更多

关键词 弓形体病 DNA测序 B1基因 聚合酶链反应

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耐亚胺培南铜绿假单胞菌和嗜麦芽寡养单胞菌抗菌药物耐药基因研究 被引量：31

2

作者 诸葛青云 黄支密 +5 位作者 糜祖煌 仵蕾 秦玲 陈榆 吴晶 单浩 《中国抗生素杂志》 CAS CSCD 北大核心 2005年第11期677-681,共5页

目的分析浙江省湖州解放军第98医院自临床分离的耐亚胺培南铜绿假单胞菌(IRPa)和嗜麦芽寡养单胞菌(Sm)中抗菌药物相关耐药基因存在状况。方法2003年9月至2004年10月间从临床分离28株IRPa和19株Sm,采用聚合酶链反应及序列分析的方法分析... 目的分析浙江省湖州解放军第98医院自临床分离的耐亚胺培南铜绿假单胞菌(IRPa)和嗜麦芽寡养单胞菌(Sm)中抗菌药物相关耐药基因存在状况。方法2003年9月至2004年10月间从临床分离28株IRPa和19株Sm,采用聚合酶链反应及序列分析的方法分析8种β-内酰胺酶基因(blaIM P、blaV IM、blaTEM、blaSHV、blaOXA、blaPER、blaVEB和blaGES)、9种氨基糖苷类修饰酶基因(AM E s基因)[aac(3)-Ⅰ、aac(3)-Ⅱ、aac(3)-Ⅲ、aac(3)-Ⅳ、aac(6′)-Ⅰ、aac(6′)-Ⅱ、ant(3")-Ⅰ、ant(2")-Ⅰ和aph(3′)-Ⅵ]、外膜孔蛋白D 2基因(op rD)、消毒剂-磺胺耐药相关基因(qacE△1-su l1)、氯霉素乙酰转移酶基因(ca tB)、氯霉素外排蛋白基因(cm l1)。结果28株IRPa中blaTEM、blaOXA、aac(3)-Ⅱ、aac(6′)-Ⅱ、ant(3")-Ⅰ、ant(2")-Ⅰ和qacE△1-su l1基因的阳性株数(%)分别为20株(71.4%)、1株(3.6%)、23株(82.1%)、10株(35.7%)、15株(53.6%)、8株(28.6%)和24株(85.7%),AM E s基因总阳性率为89.3%,blaOXA基因经序列分析确认为blaOXA-10型超广谱β-内酰胺酶,25株(89.3%)发生op rD基因缺失突变。19株Sm中aac(6′)-Ⅱ、ant(2")-Ⅰ及qacE△1-su l1基因的阳性株数(%)均为2株(10.5%);其余基因均阴性。结论临床分离的IRPa中存在blaTEM、blaOXA-10、aac(3)-Ⅱ、aac(6′)-Ⅱ、ant(3")-Ⅰ、ant(2")-Ⅰ和qacE△1-su l1基因,op rD基因缺失突变率很高。Sm中存在aac(6′)-Ⅱ、ant(2")-Ⅰ及qacE△1-su l1基因。 展开更多

关键词 耐亚胺培南铜绿假单胞菌 嗜麦芽寡养单胞菌 Β-内酰胺酶类 氨基糖苷类修饰酶 抗菌药物 耐药基因

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铜绿假单胞菌“泛耐株”耐药相关基因研究 被引量：27

3

作者 陈茶 黄彬 +2 位作者 蓝锴 庞雪云 糜祖煌 《中国抗生素杂志》 CAS CSCD 北大核心 2009年第2期111-113,I0001,共4页

目的研究"泛耐"铜绿假单胞菌中多种耐药基因的存在情况及耐药机制。方法采用聚合酶链反应(PCR)法检测22株"泛耐"铜绿假单胞菌的β-内酰胺酶基因、氨基糖苷类修饰酶(AMEs)基因、喹诺酮类耐药基因、耐消毒剂基因(qacE... 目的研究"泛耐"铜绿假单胞菌中多种耐药基因的存在情况及耐药机制。方法采用聚合酶链反应(PCR)法检测22株"泛耐"铜绿假单胞菌的β-内酰胺酶基因、氨基糖苷类修饰酶(AMEs)基因、喹诺酮类耐药基因、耐消毒剂基因(qacE△1-sul1)和整合酶基因。结果PCR扩增结果显示22株菌中oprD2、blaCARB、gyrA、aac(6')-Ⅰb、ant(2″)-Ⅰ和qacE△1-sul1基因均阳性;blaSHV、blaSPM、blaGIM、blaDHA、blaOXA-10、blaGES、blaPER、aac(3')-Ⅰ和aac(6')-Ⅱ基因均阴性;blaIMP、blaTEM、blaVEB、aac(3')-Ⅱ、ant(3″)-Ⅰ、intⅠ1和blaVIM阳性率分别为95.5%、77.3%、13.6%、4.5%、4.5%、4.5%和4.5%。结论oprD2基因阳性说明这些泛耐菌株中外膜蛋白并未缺失,多种耐药基因同时存在是本研究中铜绿假单胞菌"泛耐"的根本原因。 展开更多

关键词 铜绿假单胞菌 泛耐菌 耐药基因 耐药机制

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多重耐药鲍曼不动杆菌β-内酰胺酶、膜孔蛋白及β-内酰胺类靶位编码基因研究 被引量：17

4

作者 许亚丰 耿先龙 +4 位作者 王春新 陈国千 赵琪 周丽珍 糜祖煌 《中国抗生素杂志》 CAS CSCD 北大核心 2014年第1期58-64,共7页

目的研究一株多重耐药鲍曼不动杆菌(Multi-drug-resistant Acinetobacter baumannii,MDR-ABA)J65可能存在的β-内酰胺类药物耐药机制。方法 MDR-ABA J65株分离自2011年12月某三甲医院住院患者痰标本,用gyrA和parC基因PCR扩增、测序和BLA... 目的研究一株多重耐药鲍曼不动杆菌(Multi-drug-resistant Acinetobacter baumannii,MDR-ABA)J65可能存在的β-内酰胺类药物耐药机制。方法 MDR-ABA J65株分离自2011年12月某三甲医院住院患者痰标本,用gyrA和parC基因PCR扩增、测序和BLASTn比对确认菌种。用PCR法分析该菌株的PBP1a、PBP2、CarO和33种A^D类β-内酰胺酶编码基因,并对检出的β-内酰胺酶编码基因作了插入序列与β-内酰胺酶编码基因连锁检测。结果 MDR-ABA J65检出β-内酰胺酶编码基因bla TEM-1、bla ADC-62、bla OXA-23、bla OXA-66,插入序列与β-内酰胺酶编码基因连锁检测显示ISaba1-ADC-62和ISaba1-OXA-23为阳性。PBP1a、PBP2和CarO编码基因序列与鲍曼不动杆菌敏感株(SDF)相比均存在有义突变,且三维结构同源建模显示,与SDF株PBP1a、PBP2和CarO蛋白分子立体结构有明显差别。结论 MDR-ABA J65对β-内酰胺类耐药机制为PBPs和孔蛋白CarO变异及可移动遗传元件介异的β-内酰胺酶编码基因。 展开更多

关键词 鲍曼不动杆菌 Β-内酰胺酶基因 膜孔蛋白 外排泵蛋白 青霉素结合蛋白 多重耐药

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泛耐药鲍曼不动杆菌β-内酰胺类耐药机制研究 被引量：15

5

作者 王春新 耿先龙 +4 位作者 许亚丰 陈国千 赵琪 周丽珍 糜祖煌 《中国抗生素杂志》 CAS CSCD 北大核心 2012年第5期329-334,共6页

目的调查泛耐药鲍曼不动杆菌(pandrug-resistant Acinetobacter baumannii,PDR-ABA菌)临床分离菌株中β-内酰胺酶基因和膜孔蛋白基因的存在和变异情况。方法收集2010年3月到2010年5月临床标本中分离的PDR-ABA菌20株,采用微量肉汤烯释法... 目的调查泛耐药鲍曼不动杆菌(pandrug-resistant Acinetobacter baumannii,PDR-ABA菌)临床分离菌株中β-内酰胺酶基因和膜孔蛋白基因的存在和变异情况。方法收集2010年3月到2010年5月临床标本中分离的PDR-ABA菌20株,采用微量肉汤烯释法进行抗菌药物敏感性试验,聚合酶链反应(PCR)和基因测序方法分析36种β-内酰胺酶基因和carO膜孔蛋白基因。结果本组20株PDR-ABA菌TEM-1、ADC-30-1ike、OXA-23型3种β-内酰胺酶基因全部阳性,CARB-2和DHA-1型阳性率为5.0%。在鲍曼不动杆菌中发现CARB-2型为国内首次报道。膜孔蛋carO基因突变率达100.0%。结论本组PDR-ABA菌对多种β-内酰胺类药物耐药与产TEM、ADC-30-like、OXA-23、CARB-2、DHA-1型5种13-内酰胺酶相关外,还与膜孔蛋白编码基因carO突变有关。 展开更多

关键词 鲍曼不动杆菌 Β-内酰胺酶基因 膜孔蛋白 carO基因 泛耐药

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大肠埃希菌连续分离株氨基糖苷类修饰酶aac(6＇)-Ⅰb基因分型研究 被引量：12

6

作者 王伟 糜祖煌 +1 位作者 毛剑锋 徐伟珍 《中国人兽共患病学报》 CAS CSCD 北大核心 2008年第5期486-486,共1页

关键词 氨基糖苷类药物 大肠埃希菌 分离株 基因分型 喹诺酮类药物 修饰作用 DNA测序

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颅脑外伤者痰标本鲍曼不动杆菌多重耐药性及机制研究 被引量：14

7

作者 黄支密 糜祖煌 +4 位作者 金辉 陈榆 吴晶 仵蕾 单浩 《中国抗生素杂志》 CAS CSCD 北大核心 2006年第9期540-545,562,共7页

目的了解浙江湖州解放军第98医院分离自颅脑外伤者痰标本鲍曼不动杆菌的(Acinetobacter baumannii)多重耐药性以及耐药机制。方法收集自2000年7月至2002年12月所分离到的27株鲍曼不动杆菌,采用ATB药敏试验条板微量肉汤法测定14种抗菌药... 目的了解浙江湖州解放军第98医院分离自颅脑外伤者痰标本鲍曼不动杆菌的(Acinetobacter baumannii)多重耐药性以及耐药机制。方法收集自2000年7月至2002年12月所分离到的27株鲍曼不动杆菌,采用ATB药敏试验条板微量肉汤法测定14种抗菌药物的敏感性,采用聚合酶链反应及序列分析的方法检测16种耐药相关基因,采用Average法对耐药基因进行聚类分析。结果除1号株外,其余26株均同时耐经典β-内酰胺类、氨基糖苷类和环丙沙星等抗生素,这些菌株在其染色体编码基因(gyrA基因)存在突变的同时还获得了1～2种β-内酰胺酶基因和1～4种氨基糖苷类修饰酶基因。根据耐药基因的聚类分析该27株鲍曼不动杆菌可分三群,为院内感染所致。结论鲍曼不动杆菌已呈多重耐药,β-内酰胺酶基因、氨基糖苷类修饰酶基因携带率较高,gyrA基因突变是对环丙沙星耐药的主要原因。 展开更多

关键词 不动杆菌属 Β-内酰胺酶类 基因 聚类分析

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鲍曼不动杆菌ADC型AmpC β-内酰胺酶基因研究 被引量：9

8

作者 黄支密 储秋菊 +4 位作者 糜祖煌 单浩 杨海燕 仵蕾 秦玲 《中国抗生素杂志》 CAS CSCD 北大核心 2008年第6期369-374,383,共7页

目的了解浙江湖州解放军第98医院自临床分离的鲍曼不动杆菌（Acinetobacter baumannii）中ADC型AmpC β-内酰胺酶基因（blaADC）存在状况。方法收集2000年7月-2002年12月所分离到的60株鲍曼不动杆菌，采用聚合酶链反应及序列分析的方法... 目的了解浙江湖州解放军第98医院自临床分离的鲍曼不动杆菌（Acinetobacter baumannii）中ADC型AmpC β-内酰胺酶基因（blaADC）存在状况。方法收集2000年7月-2002年12月所分离到的60株鲍曼不动杆菌，采用聚合酶链反应及序列分析的方法分析blaADC基因。结果60株中有59株blaADC基因呈阳性（98．3％），序列分析表明4号菌株（原始编号HZB3944）blaADC基因为-新亚型，其核酸序列已登录GenBank（注册号EF569589）。结论鲍曼不动杆菌中blaADC基因阳性率很高，产ADC型AmpC β-内酰胺酶是本组菌株对β-内酰胺类抗生素耐药的重要原因之一。 展开更多

关键词 鲍曼不动杆菌 ADC型 AMPC Β-内酰胺酶

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可移动遗传元件:耐药基因的载体 被引量：38

9

作者 翁幸鐾 糜祖煌 《中国人兽共患病学报》 CAS CSCD 北大核心 2013年第4期389-397,共9页

细菌通过各种可移动遗传元件(质粒、转座子、整合子、噬菌体、插入序列共同区等),以基因水平转移的方式从其它细菌获得外源性耐药基因,整合在自身基因组上而产生获得性耐药。本文主要阐述各种可移动遗传元件介导获得性耐药的机制,理解... 细菌通过各种可移动遗传元件(质粒、转座子、整合子、噬菌体、插入序列共同区等),以基因水平转移的方式从其它细菌获得外源性耐药基因,整合在自身基因组上而产生获得性耐药。本文主要阐述各种可移动遗传元件介导获得性耐药的机制,理解可移动遗传元件在耐药性发展和传播上的作用,是设计和执行干预方法来减少细菌感染威胁的前提条件。本文还介绍了一种新发现的可移动遗传元件:基因转移因子,它与细菌耐药基因水平转移的关系值得研究。 展开更多

关键词 获得性耐药 基因水平转移 质粒 转座子 整合子 噬菌体 插入序列共同区 基因转移因子

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36株多重耐药鲍曼不动杆菌对氨基糖苷类药物耐药基因的流行病学研究 被引量：14

10

作者 邢丽丹 糜祖煌 +7 位作者 徐鑫鑫 汪汀 田莎莎 原鸿雁 张盼 纪晓昀 苏兆亮 许化溪 《中国感染与化疗杂志》 CAS 北大核心 2013年第6期442-445,共4页

目的了解多重耐药鲍曼不动杆菌中氨基糖苷类耐药基因的存在情况。方法收集2012年8—11月江苏大学附属医院和镇江市第一人民医院住院患者的临床标本中分离到的多重耐药鲍曼不动杆菌菌株36株。应用K-B纸片扩散法检测多重耐药鲍曼不动杆菌... 目的了解多重耐药鲍曼不动杆菌中氨基糖苷类耐药基因的存在情况。方法收集2012年8—11月江苏大学附属医院和镇江市第一人民医院住院患者的临床标本中分离到的多重耐药鲍曼不动杆菌菌株36株。应用K-B纸片扩散法检测多重耐药鲍曼不动杆菌对抗菌药物的敏感性、应用PCR检测细菌对氨基糖苷类药物的耐药基因。结果 36株多重耐药鲍曼不动杆菌对头孢哌酮-舒巴坦有较高的敏感率(33.3%),对其他抗菌药物的敏感率均较低(<20.0%)。36株多重耐药鲍曼不动杆菌中氨基糖苷类耐药基因aac(3)-I、aac(6’)-Ib、aph(3’)-I和16S rRNA甲基化酶基因armA的阳性率分别为72.2%(26株)、72.2%(26株)、80.6%(29株)和80.6%(29株)。结论本组多重耐药鲍曼不动杆菌多耐药情况比较严重,其对氨基糖苷类药物耐药与氨基糖苷类耐药基因的存在密切相关。 展开更多

关键词 鲍曼不动杆菌 多重耐药 氨基糖苷类耐药基因

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泛耐药鲍氏不动杆菌获得性耐药相关基因与可移动遗传元件检测指标的聚类分析 被引量：9

11

作者 王春新 耿先龙 +5 位作者 许亚丰 陈国千 赵琪 周丽珍 糜祖煌 金辉 《南京医科大学学报（自然科学版）》 CAS CSCD 北大核心 2012年第1期115-118,共4页

目的 :调查泛耐药鲍氏不动杆菌(pandrug-resistant Acinetobacter baumannii,PDR-ABA)中获得性耐药相关基因和可移动遗传元件遗传标记的存在状况,以及两者的相关性。方法:收集2010年3月到2010年5月临床标本中分离的PDR-ABA菌20株,采用... 目的 :调查泛耐药鲍氏不动杆菌(pandrug-resistant Acinetobacter baumannii,PDR-ABA)中获得性耐药相关基因和可移动遗传元件遗传标记的存在状况,以及两者的相关性。方法:收集2010年3月到2010年5月临床标本中分离的PDR-ABA菌20株,采用聚合酶链反应(PCR)的方法检测37种β-内酰胺类获得性耐药基因、15种氨基糖苷类获得性耐药基因、5种喹诺酮类获得性耐药基因和8种可移动遗传元件,并用指标聚类分析(SPSS法)分析获得性耐药相关基因和可移动遗传元件遗传标记的相关性。结果:20株PDR-ABA菌共检出5种β-酰胺类获得性耐药基因、4种氨基糖苷类获得性耐药基因、1种喹诺酮类获得性耐药基因、5种可移动遗传元件。指标聚类分析显示获得性耐药基因与多种可移动遗传元件相关联:TEM-1、ADC-like、OXA-23、aac(6′)-Ⅰb、ant(2")-Ⅰ、ant(3")-Ⅰ、aphA1、adeB与tnpU、ISCR1、IS26、ISaba1高度关联,DHA-1、CARB与IS903关联。结论:本组PDR-ABA携带获得性耐药相关基因导致对相关药物耐药,且获得性耐药相关基因和可移动遗传元件密切相关。 展开更多

关键词 鲍氏不动杆菌 获得性耐药基因 可移动遗传元件 指标聚类分析 泛耐药

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耐药鲍曼不动杆菌ADC型β-内酰胺酶基因分子流行病学研究 被引量：9

12

作者 苏兆亮 糜祖煌 +5 位作者 朱海涛 邢丽丹 陈建国 林新 刘月琴 许化溪 《中国抗生素杂志》 CAS CSCD 北大核心 2013年第9期700-704,共5页

目的了解临床分离的92株耐药鲍曼不动杆菌ADC型β-内酰胺酶基因存在状况以及其基因进化分析。方法 92株耐药鲍曼不动杆菌分离自某省级医院痰液标本,药敏纸片法检测其药物敏感性,聚合酶链反应(PCR)及序列分析的方法分析ADC型β-内酰胺酶... 目的了解临床分离的92株耐药鲍曼不动杆菌ADC型β-内酰胺酶基因存在状况以及其基因进化分析。方法 92株耐药鲍曼不动杆菌分离自某省级医院痰液标本,药敏纸片法检测其药物敏感性,聚合酶链反应(PCR)及序列分析的方法分析ADC型β-内酰胺酶基因。结果 92株鲍曼不动杆菌对头孢噻肟、头孢他啶、头孢吡肟、亚胺培南、美罗培南、哌拉西林/三唑巴坦、阿米卡星、左氧氟沙星、米渃环素、复方磺胺甲噁唑的耐药率分别为:91.3%、91.3%、91.3%、89.1%、89.1%、90.2%、67.4%、83.7%、58.7%、84.7%;ADC型β-内酰胺酶的阳性率为93.5%;ADC型β-内酰胺酶基因分子进化显示,可分为4个簇群。结论 ADC型β-内酰胺酶基因在多重耐药的鲍曼不动杆菌中广泛存在,这有可能是造成青霉素、第一至第三代头孢类药物和单环类β-内酰胺类药物耐药的主要原因。 展开更多

关键词 鲍曼不动杆菌 多药耐药 ADC型β-内酰胺酶

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多重耐药大肠埃希菌16SrRNA甲基化酶、氨基糖苷类修饰酶基因研究 被引量：13

13

作者 林宁 孙海平 糜祖煌 《中国抗生素杂志》 CAS CSCD 北大核心 2008年第9期536-539,共4页

目的了解多重耐药大肠埃希菌(ECO)氨基糖苷类药物耐药机制。方法采用PCR检测20株多重耐药ECO菌11种16S rRNA甲基化酶和氨基糖苷类修饰酶基因。结果1株检出16S rRNA甲基化酶基因(5.0%),并为新亚型;16株检出氨基糖苷类修饰酶基因(80.0%)... 目的了解多重耐药大肠埃希菌(ECO)氨基糖苷类药物耐药机制。方法采用PCR检测20株多重耐药ECO菌11种16S rRNA甲基化酶和氨基糖苷类修饰酶基因。结果1株检出16S rRNA甲基化酶基因(5.0%),并为新亚型;16株检出氨基糖苷类修饰酶基因(80.0%)。15号株rmtB基因测得序列翻译成氨基酸序列与美国核酸库(GenBank)已登录的rmtB氨基酸不同,为新亚型。结论本组多重耐药ECO菌氨基糖苷类耐药机制与产16S rRNA甲基化酶和产氨基糖苷类修饰酶相关。多重耐药ECO菌存在新的氨基糖苷类药物耐药机制。 展开更多

关键词 大肠埃希菌 16S rRNA甲基化酶 氨基糖苷类修饰酶

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中国部分地区铜绿假单胞菌β-内酰胺酶基因型研究 被引量：10

14

作者 王春新 糜祖煌 +3 位作者 黄支密 钱小毛 常东 李智山 《中国抗生素杂志》 CAS CSCD 北大核心 2008年第3期164-167,共4页

目的调查中国部分地区临床分离铜绿假单胞菌β-内酰胺酶(β-lactamases,BLAs)基因型分布。方法收集北京、浙江、江苏及湖北等地区5家医院临床分离的165株铜绿假单胞菌,PCR及测序方法检测10种BLAs。结果165株铜绿假单胞菌114株检出BLAs... 目的调查中国部分地区临床分离铜绿假单胞菌β-内酰胺酶(β-lactamases,BLAs)基因型分布。方法收集北京、浙江、江苏及湖北等地区5家医院临床分离的165株铜绿假单胞菌,PCR及测序方法检测10种BLAs。结果165株铜绿假单胞菌114株检出BLAs的基因,总检出率为69.10%,其中TEM、CARB、OXA、PER、VIM、IMP、GES、DHA型的检出率分别为41.21%、15.15%、13.94%、6.67%、5.45%、4.85%、4.85%和3.03%,未检出SHV型和VEB型BLAs的基因。19株(16.81%)同时产两种BLAs的基因,12株(10.62%)同时产3种BLAs的基因。各地区BLAs的基因型有较大差别。结论中国部分地区铜绿假单胞菌携带BLAs的基因型主要是TEM型,部分菌株同时产两种及两种以上BLAs的基因;各地区BLAs的基因型有较大差别。 展开更多

关键词 铜绿假单胞菌 Β-内酰胺酶 基因型

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肺炎克雷伯菌β-内酰胺酶、氨基糖苷类修饰酶、氯己定-磺胺耐药基因研究 被引量：13

15

作者 周军 史伟峰 糜祖煌 《中国抗生素杂志》 CAS CSCD 北大核心 2007年第10期627-630,共4页

目的了解20株对亚胺培南敏感的肺炎克雷伯菌(Kpn)β-内酰胺酶、氨基糖苷类修饰酶、氯己定-磺胺耐药基因存在状况。方法对20株Kpn菌进行了16种β-内酰胺酶基因、6种氨基糖苷类修饰酶基因、氯己定-磺胺耐药基因检测。结果20株Kpn菌检出bla... 目的了解20株对亚胺培南敏感的肺炎克雷伯菌(Kpn)β-内酰胺酶、氨基糖苷类修饰酶、氯己定-磺胺耐药基因存在状况。方法对20株Kpn菌进行了16种β-内酰胺酶基因、6种氨基糖苷类修饰酶基因、氯己定-磺胺耐药基因检测。结果20株Kpn菌检出blaTEM、blaSHV、blaCTX-M-1群、blaCTX-M-9群、blaOXA-1群和blaDHA等6种β-内酰胺酶基因,阳性率分别为85%、25%、25%、20%、25%和70%。20株中有19株至少检出1种β-内酰胺酶基因,最多同时检出6种β-内酰胺酶基因;有19株检出氨基糖苷类修饰酶基因(95%);18株检出qacE△1-sul1基因(90%)。结论该20株Kpn菌对β-内酰胺类、氨基糖苷类抗菌药物耐药与产β-内酰胺酶和氨基糖苷类修饰酶密切相关。 展开更多

关键词 肺炎克雷伯菌 Β-内酰胺酶 氨基糖苷类修饰酶

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医院感染铜绿假单胞菌对抗菌药物多重耐药基因的研究 被引量：7

16

作者 王继东 王晓岚 +4 位作者 周丽珍 宫玲玲 唐丽凤 郁敏 糜祖煌 《中国感染控制杂志》 CAS 2007年第2期77-82,共6页

目的了解某院铜绿假单胞菌(PA)医院感染菌株的多重耐药情况和有关机制。方法采用微量肉汤法对分离自临床标本的37株PA进行药敏试验;应用聚合酶链反应(PCR)法对多重耐药的PA进行β-内酰胺酶基因、氨基糖苷类修饰酶基因、耐消毒剂和磺胺... 目的了解某院铜绿假单胞菌(PA)医院感染菌株的多重耐药情况和有关机制。方法采用微量肉汤法对分离自临床标本的37株PA进行药敏试验;应用聚合酶链反应(PCR)法对多重耐药的PA进行β-内酰胺酶基因、氨基糖苷类修饰酶基因、耐消毒剂和磺胺基因检测,并对耐药基因进行测序。结果β-内酰胺酶基因TEM、CARB、VIM的阳性率分别为24.32%(9/37)、43.24%(16/37)、5.41%(2/37),而SHV、CTX-M、OXA-10group、PER、GES、VEB、DHA、IMP均阴性,oprD2缺失率为86.49%(32/37);氨基糖苷类修饰酶基因aac(6′)-Ⅰ、aac(6′)-Ⅱ、ant(3″)-Ⅰ和ant(2″)-Ⅰ阳性率分别为8.11%(3/37)、43.24%(16/37)、18.92%(7/37)、40.54%(15/37);耐消毒剂和磺胺基因qacE△1-sul1阳性达51.35%(19/37)。结论医院感染PA存在多种耐药基因,严重影响临床的抗感染疗效,应采取有效措施控制耐药菌株的出现。 展开更多

关键词 医院感染 铜绿假单胞菌 多重耐药 基因 抗药性 微生物

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耐环丙沙星的产超广谱β-内酰胺酶大肠埃希菌gyrA基因突变研究 被引量：8

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作者 丁云芳 糜祖煌 +1 位作者 秦玲 陶云珍 《临床儿科杂志》 CAS CSCD 北大核心 2005年第6期368-370,共3页

目的为了解耐环丙沙星产超广谱β_内酰胺酶大肠埃希菌的gyrA基因突变状况。方法在大肠埃希菌gyrA基因喹诺酮耐药决定区(QRDR)序列的两侧自行设计引物并建立PCR扩增和产物直接测序体系,对11株耐环丙沙星产超广谱β_内酰胺酶大肠埃希菌和... 目的为了解耐环丙沙星产超广谱β_内酰胺酶大肠埃希菌的gyrA基因突变状况。方法在大肠埃希菌gyrA基因喹诺酮耐药决定区(QRDR)序列的两侧自行设计引物并建立PCR扩增和产物直接测序体系,对11株耐环丙沙星产超广谱β_内酰胺酶大肠埃希菌和1株环丙沙星敏感的TEM2型大肠埃希菌的QRDR序列进行检测。结果11株耐环丙沙星的大肠埃希菌均存在第83位和87位的氨基酸密码子的错义突变:TCG(丝氨酸)→TTC(亮氨酸);GAC(天冬氨酸)→AAC(天冬酰胺);其中3株菌株还同时存在第85位氨基酸密码子的同义突变:GTC(缬氨酸)→GTT(缬氨酸)。而环丙沙星敏感的TEM2型大肠埃希菌则无突变。结论耐环丙沙星表型的产超广谱β_内酰胺酶大肠埃希菌存在gyrA基因QRDR区的突变。表明ESBLs菌同时耐喹诺酮类药物的表型有其基因改变的基础。 展开更多

关键词 大肠埃希菌 耐药 GYRA基因

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儿童肺炎链球菌分离株红霉素耐药性与相关耐药基因研究 被引量：9

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作者 张建华 丁云芳 +3 位作者 糜祖煌 秦玲 盛锦云 赵根明 《临床儿科杂志》 CAS CSCD 北大核心 2006年第7期561-563,共3页

目的检测儿童肺炎链球菌(SP)红霉素耐药性和相关耐药基因。方法对肺炎儿童进行痰培养,分离、鉴定SP菌株,经红霉素药敏试验检测SP药敏,通过PCR检测红霉素核糖体甲基化酶基因(ermB、ermA/B)、主动外排转运基因(mefA)3种基因表达。结果临... 目的检测儿童肺炎链球菌(SP)红霉素耐药性和相关耐药基因。方法对肺炎儿童进行痰培养,分离、鉴定SP菌株,经红霉素药敏试验检测SP药敏,通过PCR检测红霉素核糖体甲基化酶基因(ermB、ermA/B)、主动外排转运基因(mefA)3种基因表达。结果临床分离的31株SP,29株对红霉素耐药(93.5%),ermB基因阳性12株(38.7%),ermA/B基因阳性19株(61.3%),mefA基因阳性7株(22.6%),24株检出erm或和mef基因(77.4%),其中1株ermA/B、mefA基因表达均为阳性,1株ermB、ermA/B、mefA基因表达均为阳性。结论erm基因在SP有高表达,mef基因也有相当的表达,SP对红霉素具有高度耐药。 展开更多

关键词 儿童 肺炎链球菌 红霉素 耐药基因

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肺炎衣原体套式聚合酶链式反应检测研究 被引量：10

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作者 秦玲 糜祖煌 陆亚华 《中国人兽共患病杂志》 CSCD 北大核心 2000年第2期84-86,共3页

目的探讨肺炎衣原体（Cpn）的套式聚合酶链式反应（nPCR）检测技术。方法根据Campbell克隆的CpnDNA序列设计套式引物，并建立nPCR反应体系。结果Cpn经nPCR扩增出现378bp的阳性条带，而沙眼衣原体和鹦鹉热衣原体以及其他用作特异性试验... 目的探讨肺炎衣原体（Cpn）的套式聚合酶链式反应（nPCR）检测技术。方法根据Campbell克隆的CpnDNA序列设计套式引物，并建立nPCR反应体系。结果Cpn经nPCR扩增出现378bp的阳性条带，而沙眼衣原体和鹦鹉热衣原体以及其他用作特异性试验的微生物均不能扩增。3例阳性标本经DNA测序与Cpn（CWL—29）序对完全一致。CpnnPCR之灵敏度比传统PCR高100倍。各种呼吸系统病患儿咽拭子CpnnPCR阳性率明显高于健康儿童（P均＜0．01）。结论nPCR检测可能是Cpn感染的灵敏、特异、快速的诊断方法。 展开更多

关键词 肺炎衣原体 聚合酶链反应 nPCR 诊断

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肺部炎性疾病者生殖支原体套式PCR检测研究 被引量：9

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作者 糜祖煌 陆亚华 秦玲 《中国人兽共患病杂志》 CSCD 北大核心 1999年第6期52-53,共2页

目的　探讨生殖支原体（Ｍｇ）与肺部炎性疾病的关系。方法　应用原核生物通用引物ＰＣＲ直接测序克隆Ｍｇ１６ＳｒＲＮＡ基因片段序列，自行建立Ｍｇ 套式ＰＣＲ扩增法，检测健康儿童和肺部炎性疾病患儿咽拭子标本中的Ｍｇ－ ＤＮＡ。... 目的　探讨生殖支原体（Ｍｇ）与肺部炎性疾病的关系。方法　应用原核生物通用引物ＰＣＲ直接测序克隆Ｍｇ１６ＳｒＲＮＡ基因片段序列，自行建立Ｍｇ 套式ＰＣＲ扩增法，检测健康儿童和肺部炎性疾病患儿咽拭子标本中的Ｍｇ－ ＤＮＡ。结果　健康儿童Ｍｇ 阳性率为５％ ，儿童肺炎、儿童支气管炎、新生儿肺炎者阳性率分别为２１．６％ 、２８．６％ 、２０％ （Ｐ均＜ ０．０１）。结论　Ｍｇ 展开更多

关键词 生殖支原体 套式PCR 肺炎 诊断

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