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免疫磁珠富集结合酶联免疫吸附法检测酱油中黄曲霉毒素B_1 被引量：20: 1; 作者谢芳赖卫华 +3 位作者史爱武邓省亮熊勇华余扬帆《食品科学》 EI CAS CSCD 北大核心 2013年第18期165-169,共5页; 将活泼酯法活化后的羧基化超顺磁珠与辛酸一硫酸铵法纯化的抗黄曲霉毒素B，单克隆抗体偶联，获得黄曲霉毒素B，（AFB。）免疫磁珠。比较不同粒径大小的免疫磁珠的富集效率，优化磁珠偶联抗体的条件以及富集AFB。的反应条件，初步建立了... 展开更多; 关键词免疫磁珠酱油黄曲霉毒素B1 酶联免疫吸附法; 在线阅读下载PDF 职称材料

大肠杆菌O157:H7荧光微球免疫层析试纸条的研制被引量：14: 2; 作者解泉源赖卫华 +6 位作者刘春梅孙吉昌邓省亮刘成伟魏华游兴勇熊勇华《食品科学》 EI CAS CSCD 北大核心 2013年第16期353-357,共5页; 目的:建立快速、灵敏检测大肠杆菌O157:H7荧光微球免疫层析试纸条法。方法:以羧基化荧光微球作为标记物,共价偶联抗大肠杆菌O157:H7鼠源单克隆抗体,将大肠杆菌O157:H7兔多抗和驴抗鼠抗体喷涂于硝酸纤维素膜分别作为检测线和质控线,以双... 展开更多; 关键词大肠杆菌O157 H7 荧光微球免疫层析法试纸条; 在线阅读下载PDF 职称材料

流式细胞术在食源致病菌检测中应用的研究进展被引量：12: 3; 作者李萍温平威 +4 位作者许恒毅王远兴佟平王力均刘春梅《食品工业科技》 CAS CSCD 北大核心 2013年第14期375-379,共5页; 流式细胞术是能够用来快速检测液相中悬浮粒子多种物理特性的一种现代分析方法。因其具有分析速度快和灵敏度高等优点,该方法正逐渐被应用于食源致病菌的检测。本文介绍了流式细胞术的两个主要应用平台(流式细胞仪和Luminex系统)的工作... 展开更多; 关键词流式细胞术食源致病菌快速检测研究进展; 在线阅读下载PDF 职称材料

大豆粉末磷脂同时制备甘油磷脂酰胆碱和甘油磷脂酰乙醇胺的研究被引量：3: 4; 作者孟宗周丽 +2 位作者李进伟王兴国刘元法《中国油脂》 CAS CSCD 北大核心 2013年第9期32-35,共4页; 以大豆粉末磷脂为原料,研究了甲醇钠催化其醇解反应,同时制备含有甘油磷脂酰胆碱(GPC)和甘油磷脂酰乙醇胺(GPE)的混合物。通过探讨大豆粉末磷脂与无水甲醇料液比、催化剂甲醇钠添加量、反应温度、反应时间对反应产物中GPC和GPE得率的影... 展开更多; 关键词大豆粉末磷脂甘油磷脂酰胆碱甘油磷脂酰乙醇胺甲醇钠醇解反应; 在线阅读下载PDF 职称材料

孔雀石绿单克隆抗体的制备及直接竞争ELISA方法的建立被引量：12: 5; 作者李晓丽陈雪岚 +1 位作者刘春梅熊勇华《食品科学》 EI CAS CSCD 北大核心 2009年第24期283-286,共4页; 通过合成羧基化孔雀石绿,采用活泼酯法制备孔雀石绿免疫抗原CMG-BSA、检测抗原CMG-OVA。采用CMG-BSA免疫BALB/c小鼠,经融合、筛选和克隆化获得了一株稳定的抗孔雀石绿单克隆抗体,并建立了检测孔雀石绿的直接竞争ELISA方法。ELISA方法的... 展开更多; 关键词孔雀石绿单克隆抗体直接竞争ELISA; 在线阅读下载PDF 职称材料

孔雀石绿胶体金检测样品前处理工艺的优化被引量：5: 6; 作者高海岗刘秀梵 +2 位作者王晓泉蒋春茂郑砚超《中国饲料》北大核心 2021年第9期75-78,共4页; 为建立快速筛选孔雀石绿的前处理方法,对标行标水产品中孔雀石绿的快速检测胶体金免疫层析法(KJ201701),用于水产品中药物残留的现场快速检测使用。试验采用提取、氧化、浓缩和复溶四个步骤,对氮吹、SPE柱、反萃取三种不同提取方式进行... 展开更多; 关键词孔雀石绿水产品前处理; 在线阅读下载PDF 职称材料

羊驼免疫库的制备及抗孔雀石绿纳米抗体的筛选: 7; 作者高海岗刘晓文 +4 位作者王晓泉刘秀梵查丽莎游冬李星星《中国动物检疫》 CAS 2020年第12期128-134,共7页; 孔雀石绿(malachite green,MG)是一种易溶于水和乙醇等的基础染料,可在多种行业应用,并曾用于水生动物多种疾病如真菌病、寄生虫病、细菌性疾病等的治疗。但因其具有致癌等毒副作用,目前已被禁用。然而市场上仍有在水产品违法使用MG的现... 展开更多; 关键词纳米抗体孔雀石绿噬菌体展示酶联免疫吸附测定羊驼; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名免疫磁珠富集结合酶联免疫吸附法检测酱油中黄曲霉毒素B_1 被引量：20: 1; 作者谢芳赖卫华史爱武邓省亮熊勇华余扬帆; 机构南昌大学食品科学与技术国家重点实验室无锡中德伯尔生物技术有限公司江西省科学院微生物研究所; 出处《食品科学》 EI CAS CSCD 北大核心 2013年第18期165-169,共5页; 基金 "十二五"国家科技支撑计划项目(2011BAK10B01) 江西省主要学科学术和技术带头人培养计划项目(20113BCB22007); 文摘将活泼酯法活化后的羧基化超顺磁珠与辛酸一硫酸铵法纯化的抗黄曲霉毒素B，单克隆抗体偶联，获得黄曲霉毒素B，（AFB。）免疫磁珠。比较不同粒径大小的免疫磁珠的富集效率，优化磁珠偶联抗体的条件以及富集AFB。的反应条件，初步建立了以免疫磁珠富集结合酶联免疫吸附法检测酱油基质中的AFB，的方法。结果表明：酶联免疫吸附法在0．05～0．3gg／kg范围内具有良好的线性关系，相关系数为0．9842。在酱油中添加加1-7μg／kgAFB，的平均加标回收率为83．6％～104％，相对标准偏差为7．2％～13．7％。该方法具有快速简便、设备简单、灵敏度高、准确性好等优点，可很好地应用于酱油中的AFB，的快速检测。; 关键词免疫磁珠酱油黄曲霉毒素B1 酶联免疫吸附法; Keywords immunomagnetic beads sauce aflatoxin Bt （AFB1） ELISA method; 分类号 TS207.3 [轻工技术与工程—食品科学]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名大肠杆菌O157:H7荧光微球免疫层析试纸条的研制被引量：14: 2; 作者解泉源赖卫华刘春梅孙吉昌邓省亮刘成伟魏华游兴勇熊勇华; 机构南昌大学食品科学与技术国家重点实验室无锡中德伯尔生物技术有限公司江西省疾病预防控制中心江西省科学院微生物研究所; 出处《食品科学》 EI CAS CSCD 北大核心 2013年第16期353-357,共5页; 基金科技部科技支撑计划项目(2011BAK10B06-01); 文摘目的:建立快速、灵敏检测大肠杆菌O157:H7荧光微球免疫层析试纸条法。方法:以羧基化荧光微球作为标记物,共价偶联抗大肠杆菌O157:H7鼠源单克隆抗体,将大肠杆菌O157:H7兔多抗和驴抗鼠抗体喷涂于硝酸纤维素膜分别作为检测线和质控线,以双抗体夹心反应模式制备大肠杆菌O157:H7荧光微球免疫层析试纸条。结果:通过优化实验确定偶联缓冲液为0.02mol/L pH5.0磷酸盐缓冲液,抗体偶联微球量为100μg/mg,试纸条可在加样5min后判读结果。制备的荧光微球试纸条对纯培养大肠杆菌O157:H7进行检测,肉眼观察检测限在1.2×104CFU/mL,借助荧光读取仪检测限能提高到6.1×103CFU/mL。试纸条除与金黄色葡萄球菌有微弱交叉反应外,与实验室保存的30株细菌无交叉反应。结论:大肠杆菌O157:H7荧光微球试纸条具有操作简便、快速灵敏、易于量化的特点,为该菌的检测提供了一种新型的手段。; 关键词大肠杆菌O157 H7 荧光微球免疫层析法试纸条; Keywords Escherichia coli O157：H7 fluorescent microsphere immunochromatography strip; 分类号 TS207.3 [轻工技术与工程—食品科学]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名流式细胞术在食源致病菌检测中应用的研究进展被引量：12: 3; 作者李萍温平威许恒毅王远兴佟平王力均刘春梅; 机构南昌大学食品科学与技术国家重点实验室无锡中德伯尔生物技术有限公司; 出处《食品工业科技》 CAS CSCD 北大核心 2013年第14期375-379,共5页; 基金国家自然科学基金(31271863) "十二五"国家科技支撑计划项目(2011BAK10B06) 江西省自然科学基金(20114BAB214017); 文摘流式细胞术是能够用来快速检测液相中悬浮粒子多种物理特性的一种现代分析方法。因其具有分析速度快和灵敏度高等优点,该方法正逐渐被应用于食源致病菌的检测。本文介绍了流式细胞术的两个主要应用平台(流式细胞仪和Luminex系统)的工作原理和分析流程,并着重对近年来将流式细胞术用在食源致病菌检测中的相关研究进行了调研和综述,从食源致病菌全菌分析以及细菌核酸检测等方面进行了剖析,对该方法在食源致病菌检测中应用的前景作了展望。; 关键词流式细胞术食源致病菌快速检测研究进展; Keywords flow cytometry foodborne pathogen rapid detection research progress; 分类号 TS207.4 [轻工技术与工程—食品科学]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名大豆粉末磷脂同时制备甘油磷脂酰胆碱和甘油磷脂酰乙醇胺的研究被引量：3: 4; 作者孟宗周丽李进伟王兴国刘元法; 机构江南大学食品学院无锡中德伯尔生物技术有限公司; 出处《中国油脂》 CAS CSCD 北大核心 2013年第9期32-35,共4页; 基金江苏省产学研前瞻性联合研究项目(BY2012046) "十二五"国家科技支撑计划项目(2011BAD02B04) 教育部新世纪人才计划资助项目(NCET-10-0457); 文摘以大豆粉末磷脂为原料,研究了甲醇钠催化其醇解反应,同时制备含有甘油磷脂酰胆碱(GPC)和甘油磷脂酰乙醇胺(GPE)的混合物。通过探讨大豆粉末磷脂与无水甲醇料液比、催化剂甲醇钠添加量、反应温度、反应时间对反应产物中GPC和GPE得率的影响规律,确定了甲醇钠催化醇解大豆粉末磷脂的最佳反应条件:料液比1∶4,催化剂甲醇钠添加量5%(以大豆粉末磷脂质量计),反应温度35℃,反应时间6 h。在最佳反应条件下,GPC得率为93.60%,GPE得率为88.69%。; 关键词大豆粉末磷脂甘油磷脂酰胆碱甘油磷脂酰乙醇胺甲醇钠醇解反应; Keywords powded soybean phospholipid glycerylphosphorylcholine glycerylphosphorylethanolamine sodium methoxide alcoholysis reaction; 分类号 TS229 [轻工技术与工程—粮食、油脂及植物蛋白工程] O54 [理学—物理]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名孔雀石绿单克隆抗体的制备及直接竞争ELISA方法的建立被引量：12: 5; 作者李晓丽陈雪岚刘春梅熊勇华; 机构南昌大学食品科学与技术国家重点实验室江西师范大学生命科学学院无锡中德伯尔生物技术有限公司; 出处《食品科学》 EI CAS CSCD 北大核心 2009年第24期283-286,共4页; 文摘通过合成羧基化孔雀石绿,采用活泼酯法制备孔雀石绿免疫抗原CMG-BSA、检测抗原CMG-OVA。采用CMG-BSA免疫BALB/c小鼠,经融合、筛选和克隆化获得了一株稳定的抗孔雀石绿单克隆抗体,并建立了检测孔雀石绿的直接竞争ELISA方法。ELISA方法的最佳操作参数:孔雀石绿抗体稀释倍数1:16000(1mg/ml),酶标抗原(CMG-HRP)使用质量浓度0.2μg/ml。该方法具有良好的灵敏度和特异性,IC50值0.3ng/ml,最低检测灵敏度达到0.05ng/ml,标准曲线方程为y=-20.888x+81.423(R2=0.9813)。; 关键词孔雀石绿单克隆抗体直接竞争ELISA; Keywords malachite green monoclonal antibody direct competitive ELISA; 分类号 R392.11 [医药卫生—免疫学] R446.61 [医药卫生—诊断学]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名孔雀石绿胶体金检测样品前处理工艺的优化被引量：5: 6; 作者高海岗刘秀梵王晓泉蒋春茂郑砚超; 机构扬州大学江苏农业职业技术学院无锡中德伯尔生物技术有限公司; 出处《中国饲料》北大核心 2021年第9期75-78,共4页; 文摘为建立快速筛选孔雀石绿的前处理方法,对标行标水产品中孔雀石绿的快速检测胶体金免疫层析法(KJ201701),用于水产品中药物残留的现场快速检测使用。试验采用提取、氧化、浓缩和复溶四个步骤,对氮吹、SPE柱、反萃取三种不同提取方式进行前处理优化和比较,通过胶体金免疫层析试纸条进行检测。结果表明:三种方法均能达到同时检测水产品中孔雀石绿的目的,检测时间为反向萃取法<SPE柱法<氮吹法。说明反向萃取法具有用时短、不需要复杂仪器、检测结果准确率高的特点,更适合用于基层快速检测。; 关键词孔雀石绿水产品前处理; Keywords malachite green aquatic products pretreatment; 分类号 S816.17 [农业科学—饲料科学]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名羊驼免疫库的制备及抗孔雀石绿纳米抗体的筛选: 7; 作者高海岗刘晓文王晓泉刘秀梵查丽莎游冬李星星; 机构扬州大学苏州市动物卫生监督所安徽农业大学无锡中德伯尔生物技术有限公司; 出处《中国动物检疫》 CAS 2020年第12期128-134,共7页; 基金 “十三五”国家重点研发计划项目(2018YFC1602800)。; 文摘孔雀石绿(malachite green,MG)是一种易溶于水和乙醇等的基础染料,可在多种行业应用,并曾用于水生动物多种疾病如真菌病、寄生虫病、细菌性疾病等的治疗。但因其具有致癌等毒副作用,目前已被禁用。然而市场上仍有在水产品违法使用MG的现象,因此需要加强对该药品残留的检测。本研究选择羊驼免疫库筛选抗MG纳米抗体,通过噬菌体ELISA筛选高亲和力和特异性的纳米抗体。通过辅助噬菌体M13的救援,使得纳米抗体基因(VHH)与噬菌体外壳蛋白基因融合表达,从而使得VHH蛋白展示在噬菌体表面,通过有限稀释筛选和多次洗脱的办法,获得含有目的基因的单个噬菌克隆;将重组质粒PMES4-VHH转化到表达细胞中,进行体外表达。最后采用NI-NTA柱进行His标签纯化,得到抗MG纳米抗体,并进行SDS-PAGE电泳鉴定。结果显示:噬菌体文库成功构建,库容为3.2×108 cfu/mL;通过ELISA筛选,得到16个具有抑制效果的噬菌体克隆,经对噬菌体基因测序并翻译,得到2种氨基酸序列;将重组质粒转化至表达菌株表达、纯化,最后得到大小约为15 kDa的抗MG纳米抗体,从而为MG的下一步检测奠定了基础。; 关键词纳米抗体孔雀石绿噬菌体展示酶联免疫吸附测定羊驼; Keywords nano-antibody MG phage display ELISA alpaca; 分类号 S852.65 [农业科学—基础兽医学]; 在线阅读下载PDF 职称材料

	题名	作者	出处	发文年	被引量	操作
1	免疫磁珠富集结合酶联免疫吸附法检测酱油中黄曲霉毒素B_1	谢芳赖卫华史爱武邓省亮熊勇华余扬帆	《食品科学》 EI CAS CSCD 北大核心	2013	20	在线阅读下载PDF 职称材料
2	大肠杆菌O157:H7荧光微球免疫层析试纸条的研制	解泉源赖卫华刘春梅孙吉昌邓省亮刘成伟魏华游兴勇熊勇华	《食品科学》 EI CAS CSCD 北大核心	2013	14	在线阅读下载PDF 职称材料
3	流式细胞术在食源致病菌检测中应用的研究进展	李萍温平威许恒毅王远兴佟平王力均刘春梅	《食品工业科技》 CAS CSCD 北大核心	2013	12	在线阅读下载PDF 职称材料
4	大豆粉末磷脂同时制备甘油磷脂酰胆碱和甘油磷脂酰乙醇胺的研究	孟宗周丽李进伟王兴国刘元法	《中国油脂》 CAS CSCD 北大核心	2013	3	在线阅读下载PDF 职称材料
5	孔雀石绿单克隆抗体的制备及直接竞争ELISA方法的建立	李晓丽陈雪岚刘春梅熊勇华	《食品科学》 EI CAS CSCD 北大核心	2009	12	在线阅读下载PDF 职称材料
6	孔雀石绿胶体金检测样品前处理工艺的优化	高海岗刘秀梵王晓泉蒋春茂郑砚超	《中国饲料》北大核心	2021	5	在线阅读下载PDF 职称材料
7	羊驼免疫库的制备及抗孔雀石绿纳米抗体的筛选	高海岗刘晓文王晓泉刘秀梵查丽莎游冬李星星	《中国动物检疫》 CAS	2020	0	在线阅读下载PDF 职称材料