哺乳动物成体干细胞的研究进展 被引量：3

1

作者 邓守龙 彭涛 +3 位作者 吕自力 王亮 王安江 曹文广 《中国畜牧兽医》 CAS 北大核心 2009年第10期88-93,共6页

干细胞具有自我更新能力,能够产生高度分化的功能细胞。干细胞按照发育阶段分为胚胎干细胞和成体干细胞。根据干细胞的发育潜能分为三类:全能干细胞、多能干细胞和单能干细胞。胚胎干细胞的发育等级较高,是全能干细胞,而成体干细胞的发... 干细胞具有自我更新能力,能够产生高度分化的功能细胞。干细胞按照发育阶段分为胚胎干细胞和成体干细胞。根据干细胞的发育潜能分为三类:全能干细胞、多能干细胞和单能干细胞。胚胎干细胞的发育等级较高,是全能干细胞,而成体干细胞的发育等级较低,是多能或单能干细胞。一般认为成年组织或器官内的干细胞具有组织特异性,只能分化成特定的细胞或组织,然而,研究结果表明,组织特异性干细胞同样具有分化成其他细胞或组织的潜能,这为干细胞的应用开创了更广泛的空间。作者主要综述了干细胞的研究进展及几种成体干细胞的诱导分化。 展开更多

关键词 干细胞 成体干细胞 诱导分化

在线阅读 下载PDF 职称材料

促排卵3号在荷斯坦供体母牛超排中的应用效果 被引量：9

2

作者 马学海 张伟 +7 位作者 张维忠 王建勇 仝太军 曹景萍 彭涛 王亮 王安江 张居农 《中国奶牛》 2007年第4期21-22,共2页

采用CIDR+FSH+PG法对114头进口新西兰荷斯坦供体母牛进行超排。其中LRH-A3处理60头,共回收卵651枚,回收率95.0%(651/685),可用胚362枚,头均6.0枚,可用率56.0%;对照组54头未用LRH-A3处理,共回收卵526枚,回收率93.8%(526/561),可用胚总数... 采用CIDR+FSH+PG法对114头进口新西兰荷斯坦供体母牛进行超排。其中LRH-A3处理60头,共回收卵651枚,回收率95.0%(651/685),可用胚362枚,头均6.0枚,可用率56.0%;对照组54头未用LRH-A3处理,共回收卵526枚,回收率93.8%(526/561),可用胚总数250枚,头均4.6枚,可用率47.6%。结果表明,LRH-A3对荷斯坦母牛超数排卵有显著影响。 展开更多

关键词 荷斯坦母牛 超数排卵 促排卵3号 受胎率

在线阅读 下载PDF 职称材料

哺乳动物胚胎干细胞研究进展 被引量：3

3

作者 邓守龙 彭涛 +3 位作者 吕自力 王安江 王亮 曹文广 《中国畜牧兽医》 CAS 北大核心 2009年第9期86-93,共8页

胚胎性干细胞包括从动物早期胚胎的卵裂球、囊胚内细胞团细胞分离建系的胚胎干细胞(embryonic stem cell,ESC)、从胚胎生殖嵴原始生殖细胞(primordial germ cell,PGC)分离建系的胚胎生殖细胞(embryonic germ cell,EGC)和来源于畸胎瘤中... 胚胎性干细胞包括从动物早期胚胎的卵裂球、囊胚内细胞团细胞分离建系的胚胎干细胞(embryonic stem cell,ESC)、从胚胎生殖嵴原始生殖细胞(primordial germ cell,PGC)分离建系的胚胎生殖细胞(embryonic germ cell,EGC)和来源于畸胎瘤中的胚胎性癌细胞(embryonic carcinoma cell,ECC)。ESC具有发育分化的多潜能性和无限的自我更新能力,能在体外长期培养并具有向机体各种组织细胞分化的潜能。所以,被广泛应用于胚胎发育与细胞分化调控的研究,作为修复器官与器官移植的种子细胞,并可用于转基因动物的生产。作者主要综述了干细胞的最新研究进展,ESC培养扩增诱导机制,定向分化方法。 展开更多

关键词 干细胞 胚胎干细胞 定向分化

在线阅读 下载PDF 职称材料

牛乳铁蛋白基因N-lobe的cDNA克隆及毕赤酵母表达载体的构建 被引量：2

4

作者 林松涛 张居农 +5 位作者 王亮 史芳芳 李卫华 张钰 吕自力 王安江 《家畜生态学报》 2008年第5期13-18,共6页

以牛乳腺组织总RAN为模板,经RT-PCR得到牛乳铁蛋白基因的N-lobe片段并将其克隆到pGM-T克隆载体上,最后将其连入表达载体pPICZαA中,构建牛乳铁蛋白基因N-lobe的酵母表达载体。结果表明:克隆片段大小为1028bp,与Gen Bank中登录的序列的... 以牛乳腺组织总RAN为模板,经RT-PCR得到牛乳铁蛋白基因的N-lobe片段并将其克隆到pGM-T克隆载体上,最后将其连入表达载体pPICZαA中,构建牛乳铁蛋白基因N-lobe的酵母表达载体。结果表明:克隆片段大小为1028bp,与Gen Bank中登录的序列的相应部位相比,所获牛乳铁蛋白N-lobe cDNA序列的同源性为99.7%;重组表达质粒经酶切和PCR鉴定构建正确,为酵母表达乳铁蛋白基因N-lobe奠定了基础。 展开更多

关键词 乳铁蛋白 N-lobe 表达载体

在线阅读 下载PDF 职称材料

应用X精子冷冻精液生产体内性控胚胎的试验 被引量：7

5

作者 马学海 张维忠 +6 位作者 王建勇 仝太军 张伟 曹景萍 王亮 王安江 张居农 《黑龙江动物繁殖》 2007年第2期6-7,共2页

采用CIDR+FSH+PG法对206头优秀荷斯坦供体母牛进行超数排卵,其中实验组73头超排后用X性控冷冻精液输精(每头3支),获可用胚310枚,头均可用胚4.25枚;对照组133头,采用常规冷冻精液输精(每头3支),获得可用胚787枚,头均可用胚5.92枚,差异不... 采用CIDR+FSH+PG法对206头优秀荷斯坦供体母牛进行超数排卵,其中实验组73头超排后用X性控冷冻精液输精(每头3支),获可用胚310枚,头均可用胚4.25枚;对照组133头,采用常规冷冻精液输精(每头3支),获得可用胚787枚,头均可用胚5.92枚,差异不显著。结果表明,用已分离的X精子冷冻精液对超排母牛进行人工授精生产体内性控胚胎是可行的。 展开更多

关键词 荷斯坦 X精子 性控胚胎

在线阅读 下载PDF 职称材料

体细胞克隆牛的研究进展 被引量：4

6

作者 邓守龙 彭涛 +3 位作者 吕自力 陆东林 王安江 王亮 《新疆畜牧业》 2008年第3期4-7,共4页

体细胞核移植是目前生物技术领域研究的热点之一,具有重大的科学意义和应用价值。牛有产奶量高等独特优势,具有巨大的应用潜力,不同国家已相继诞生了体细胞克隆牛及转基因牛。本文回顾了牛体细胞核移植简史,对体细胞核移植方法、体细胞... 体细胞核移植是目前生物技术领域研究的热点之一,具有重大的科学意义和应用价值。牛有产奶量高等独特优势,具有巨大的应用潜力,不同国家已相继诞生了体细胞克隆牛及转基因牛。本文回顾了牛体细胞核移植简史,对体细胞核移植方法、体细胞供核细胞的种类、受体卵母细胞去核方法、重构胚的激活、体外培养体系以及限制牛体细胞核移植应用的因素等进行了综述,并展望了牛体细胞核移植的应用前景。 展开更多

关键词 牛 体细胞 核移植 克隆

在线阅读 下载PDF 职称材料

乳铁蛋白肽的研究进展 被引量：3

7

作者 彭涛 吕自力 +1 位作者 王安江 王亮 《草食家畜》 2008年第3期6-10,共5页

乳铁蛋白肽(Lactoferricin,Lfcin)是动物乳汁中产生的乳铁蛋白(Lactoferrin,Lf)被酸性胃蛋白酶降解N端产生的含几十个氨基酸的小肽,它具有抗菌、抗病毒、调节免疫、抗癌等多种生物活性。因此,乳铁蛋白肽受到了广泛关注,已经成为研究与... 乳铁蛋白肽(Lactoferricin,Lfcin)是动物乳汁中产生的乳铁蛋白(Lactoferrin,Lf)被酸性胃蛋白酶降解N端产生的含几十个氨基酸的小肽,它具有抗菌、抗病毒、调节免疫、抗癌等多种生物活性。因此,乳铁蛋白肽受到了广泛关注,已经成为研究与开发的热点。本文综述了乳铁蛋白肽的结构、生物学功能、国内外利用转基因生产乳铁蛋白肽的研究动态及其应用前景,探讨了利用转基因生产乳铁蛋白肽的技术问题。 展开更多

关键词 乳铁蛋白肽 小肽 转基因

在线阅读 下载PDF 职称材料

性控冻精在牛场的使用效果分析 被引量：8

8

作者 李怡 吕自力 +4 位作者 李卫华 王建勇 仝太军 张伟 王安江 《新疆畜牧业》 2008年第3期14-16,共3页

该实验分为两个部分。第一部分为生产牛体内胚的研究:使用常规冻精超排了49头牛,头均可用胚为5.5枚,可用胚率为56.0%;使用性控冻精超排了50头牛,头均可用胚为4.6枚,可用胚率为49.0%。两者的差异不显著(P>0.05)。第二部分为受胎率和... 该实验分为两个部分。第一部分为生产牛体内胚的研究:使用常规冻精超排了49头牛,头均可用胚为5.5枚,可用胚率为56.0%;使用性控冻精超排了50头牛,头均可用胚为4.6枚,可用胚率为49.0%。两者的差异不显著(P>0.05)。第二部分为受胎率和性控比率的研究:使用常规冻精对936头青年牛进行了配种,受胎645头,受胎率68.9%;使用性控冻精对1131头青年牛进行了配种,受胎734头,受胎率64.9%。常规冻精的受胎率比性控冻精的高,但两者差异不显著(P>0.05)。在第二部分的研究过程中,利用B超仪对胎儿进行了性别鉴定,总共鉴定了68头妊娠55￣90d的牛,母犊率为94.1%。 展开更多

关键词 性控冻精 超数排卵 人工授精 母犊率

在线阅读 下载PDF 职称材料

哺乳动物卵母细胞孤雌激活的研究进展 被引量：3

9

作者 邓守龙 王安江 《中国奶牛》 2008年第6期34-38,共5页

本文概述了卵母细胞孤雌激活的研究历程,并从激活机制、激活方法及影响因素等方面对孤雌激活的研究意义和发展前景进行了综述。

关键词 哺乳动物 卵母细胞 孤雌激活

在线阅读 下载PDF 职称材料

转基因克隆牛的研究进展 被引量：2

10

作者 邓守龙 吕自力 +1 位作者 陆东林 王安江 《新疆畜牧业》 2008年第2期14-18,共5页

转基因动物在畜牧业生产以及生物医学上具有广阔和诱人的应用前景,生产转基因的方法也很多,本文就体细胞核移植生产转基因牛的供体细胞种类、转染方法和转基因牛的应用作一综述,同时也指出了转基因牛存在的不足,并展望了其发展前景。

关键词 牛 转基因 体细胞核移植

在线阅读 下载PDF 职称材料

转GFP基因核移植牛胚胎的研究

11

作者 邓守龙 吕自力 +2 位作者 王亮 王安江 曹文广 《中国畜牧兽医》 CAS 北大核心 2009年第8期73-78,共6页

试验采用脂质体转染法与电穿孔法,以携带绿色荧光蛋白(GFP)-新霉抗性(neo-)双标记基因的pMSCV质粒转染胎牛耳成纤维细胞为供体与体外成熟的牛卵母细胞为受体构建克隆胚。研究了体外成熟培养液中添加EGF(表皮生长因子)对转基因胚的影响,... 试验采用脂质体转染法与电穿孔法,以携带绿色荧光蛋白(GFP)-新霉抗性(neo-)双标记基因的pMSCV质粒转染胎牛耳成纤维细胞为供体与体外成熟的牛卵母细胞为受体构建克隆胚。研究了体外成熟培养液中添加EGF(表皮生长因子)对转基因胚的影响,不同转染方法构建供体细胞对重构胚发育的影响和在不同体外培养系统中的发育效果。结果显示,体外成熟培养液中添加EGF 30 ng/mL组的卵母细胞成熟率最高,但对后期转基因重构胚的囊胚发育率的影响,以添加EGF 20ng/mL组的最高;以胎牛耳成纤维细胞为供体细胞,不同转染方法转染供体细胞构建重构胚,其囊胚发育率差异不显著(P>0.05);mSOFaa+颗粒细胞单层细胞共培养体系中的转基因囊胚发育率最好,该体系更适合体细胞核移植法生产转基因牛胚胎。 展开更多

关键词 牛 转基因 供体细胞转染 体外培养

在线阅读 下载PDF 职称材料

哺乳动物卵母细胞孤雌激活的研究进展 被引量：2

12

作者 邓守龙 王安江 《黑龙江动物繁殖》 2008年第3期7-10,共4页

本文主要从卵母细胞孤雌激活机制、方法及影响因素,对孤雌激活的研究意义和发展前景等方面作一综述。

关键词 哺乳动物 卵母细胞 孤雌激活

在线阅读 下载PDF 职称材料

精卵因素对母牛卵胞质内精子显微注射效果的影响

13

作者 卞江涛 赵鑫 +2 位作者 胡高博 吕自立 张居农 《中国草食动物》 2010年第3期8-11,共4页

实验探讨了精卵因素对母牛卵母细胞质内精子显微注射效果的影响。结果表明:新鲜精液组和性控冻精组ICSI对卵母细胞存活率、卵裂率和囊胚率均无显著差异(P>0.05);采用A、B、C级精子穿刺Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ级卵母细胞时,穿刺卵受精率、卵裂率... 实验探讨了精卵因素对母牛卵母细胞质内精子显微注射效果的影响。结果表明:新鲜精液组和性控冻精组ICSI对卵母细胞存活率、卵裂率和囊胚率均无显著差异(P>0.05);采用A、B、C级精子穿刺Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ级卵母细胞时,穿刺卵受精率、卵裂率和囊胚率在三者之间无显著差异(P>0.05),总体效果A>B>C、Ⅰ>Ⅱ>Ⅲ;D级精子穿刺Ⅱ级卵母细胞后的穿刺卵受精率显著低于Ⅰ级卵母细胞(P<0.05),卵裂率和囊胚率与Ⅰ级卵母细胞相比无显著差异(P>0.05),穿刺Ⅲ级卵母细胞后的穿刺受精率和囊胚率均显著低于Ⅰ级卵母细胞(P<0.05),受精卵的卵裂率与Ⅰ级卵母细胞相比则无显著差异(P>0.05)。由此可见:采用流式细胞仪分离的性控冻精与新鲜精液相比,对ICSI后的受精率和囊胚率无显著影响;精子活动力和卵子质量对ICSI的效果均有一定程度影响,且随精子活动力的降低和卵母细胞质量的下降而逐渐显著。 展开更多

关键词 精卵因素 显微注射 胞质内精子注射 母牛

在线阅读 下载PDF 职称材料

携带人Ⅰ型а1原胶原基因荷斯坦奶牛胚胎的发育研究

14

作者 彭涛 刘婷婷 王亮 《西北农业学报》 CSCD 北大核心 2009年第2期10-14,18,共6页

克隆了人Ⅰ型а1原胶原的cDNA基因,将克隆的基因连接到改造后的乳腺特异性表达载体pGC1上,经电穿孔法转染到成纤维细胞中,利用核移植技术获得携带人Ⅰ型а1原胶原基因牛胚胎。最终获得8枚转基因的囊胚,证明用核移植方法获得的携带人Ⅰ型... 克隆了人Ⅰ型а1原胶原的cDNA基因,将克隆的基因连接到改造后的乳腺特异性表达载体pGC1上,经电穿孔法转染到成纤维细胞中,利用核移植技术获得携带人Ⅰ型а1原胶原基因牛胚胎。最终获得8枚转基因的囊胚,证明用核移植方法获得的携带人Ⅰ型а1原胶原蛋白基因的荷斯坦奶牛胚胎能够正常发育。 展开更多

关键词 人Ⅰ型а1原胶原 核移植 转基因

在线阅读 下载PDF 职称材料

获能液及精子密度对牛性控精子体外受精成功率的影响 被引量：2

15

作者 倪明 林松涛 +5 位作者 韩光 马学海 吕自立 王安江 邓守龙 张居农 《中国奶牛》 2008年第12期30-32,共3页

本实验探讨了不同的精子获能添加物、精子密度、精子获能液对牛性别分离精子体外受精(IVF)的影响。结果表明:受精液中同时添加10μg/mL的肝素与5mmol/L的咖啡因,能促进牛性控精子体外获能与受精。精子密度在1.0×106个/mL时其囊胚... 本实验探讨了不同的精子获能添加物、精子密度、精子获能液对牛性别分离精子体外受精(IVF)的影响。结果表明:受精液中同时添加10μg/mL的肝素与5mmol/L的咖啡因,能促进牛性控精子体外获能与受精。精子密度在1.0×106个/mL时其囊胚发育率最高。用BO液和mTyrode’s液对牛性控精子进行获能和受精处理,其受精效果差异不显著(P>0.05),但BO液作用时间短对早期胚胎的发育影响较小,比较适合牛性控精子IVF。 展开更多

关键词 体外受精 体外获能 性控精子

在线阅读 下载PDF 职称材料

抗菌肽牛乳铁蛋白肽衍生肽在毕赤酵母中的表达及活性鉴定 被引量：1

16

作者 李忠清 王亮 《生物技术通报》 CAS CSCD 北大核心 2011年第6期145-149,共5页

利用巴斯德毕赤酵母系统表达抗菌肽牛乳铁蛋白肽衍生肽简称LfcinBD,获得的表达产物具有较强的抗菌活性。将人工设计的用化学合成法合成的以酵母偏爱密码子编码的LfcinBD基因片段克隆到巴斯德毕赤酵母分泌型表达载体pPIC9K中,获得的重组... 利用巴斯德毕赤酵母系统表达抗菌肽牛乳铁蛋白肽衍生肽简称LfcinBD,获得的表达产物具有较强的抗菌活性。将人工设计的用化学合成法合成的以酵母偏爱密码子编码的LfcinBD基因片段克隆到巴斯德毕赤酵母分泌型表达载体pPIC9K中,获得的重组质粒pPIC9K-LfcinBD通过限制性内切酶SacⅠ酶切线性化,电击法转化毕赤酵母GS115宿主菌,G418抗性筛选,得到高拷贝转化子。经PCR检测,LfcinBD基因与毕赤酵母染色体稳定整合。阳性克隆经甲醇诱导表达LfcinBD,诱导表达5 d,每24 h取上清1 mL,进行抑菌试验。结果表明,抗菌肽牛乳铁多肽衍生肽基因已整合到酵母细胞基因组中并获得表达,经0.5%甲醇在30℃诱导48 h可产生较强抗菌活性的抗菌肽,而且对氨苄青霉素抗性的大肠杆菌亦有较强的抑菌作用。 展开更多

关键词 牛乳铁蛋白肽衍生肽(LfcinBD) 毕赤酵母表达系统 抗菌活性

在线阅读 下载PDF 职称材料

人Ⅰ型胶原基因脂质体转染牛耳细胞克隆筛选方法 被引量：2

17

作者 刘婷婷 王亮 +2 位作者 吕自力 彭涛 王安江 《西北农业学报》 CAS CSCD 北大核心 2009年第4期10-16,共7页

构建连接有人Ⅰ型胶原基因的质粒（PGC1-collagen）,利用脂质体介导的方法转染荷斯坦奶牛耳成纤维细胞,优化一系列转染条件以提高转染效率,再利用G418和GFP荧光的表达来筛选稳定转染的细胞,最后以未转染的成纤维细胞作为阴性对照组,PGC1... 构建连接有人Ⅰ型胶原基因的质粒（PGC1-collagen）,利用脂质体介导的方法转染荷斯坦奶牛耳成纤维细胞,优化一系列转染条件以提高转染效率,再利用G418和GFP荧光的表达来筛选稳定转染的细胞,最后以未转染的成纤维细胞作为阴性对照组,PGC1-collagen作为阳性对照组对转染的细胞进行PCR验证。结果显示：在6孔培养板中细胞融合度达到50%~60%左右介导1~3μg重组质粒转染24 h,转染效率可达25%~30%,筛选单克隆细胞在荧光显微镜观察检测到绿色荧光蛋白的表达。在使用800 U的G418筛选效果最好,维持浓度300~600 U,获得25个稳定表达的阳性细胞系,从中选取6个克隆进行PCR验证。成功利用脂质体转染方法将人Ⅰ型胶原基因成功转染到荷斯坦奶牛耳成纤维细胞,PCR验证结果正确。 展开更多

关键词 胶原基因 转染 成纤维细胞 阳性克隆

在线阅读 下载PDF 职称材料

SX-MOFLO流式细胞仪分离牛精子的特征及生产效率分析 被引量：2

18

作者 吕自力 帅志强 +5 位作者 张云梅 张志国 白晶 朱海 王亮 王安江 《黑龙江动物繁殖》 2008年第3期25-27,37,共4页

以X精子和Y精子的DNA含量差别为基础的流式细胞仪分离精子技术是目前最有效的哺乳动物性别控制方法之一。本文从精子分离的生产工艺和生产实践出发,阐明精子分离的一些具体特征和分离工艺的效率,进而探讨提出了该技术的应用瓶颈及发展... 以X精子和Y精子的DNA含量差别为基础的流式细胞仪分离精子技术是目前最有效的哺乳动物性别控制方法之一。本文从精子分离的生产工艺和生产实践出发,阐明精子分离的一些具体特征和分离工艺的效率,进而探讨提出了该技术的应用瓶颈及发展方向。 展开更多

关键词 SX—MOFLO流式细胞仪 性别控制 精子分离 效率分析

在线阅读 下载PDF 职称材料

甘露寡糖饲喂奶牛的试验效果分析 被引量：4

19

作者 李卫华 吕自力 +6 位作者 刘丽娟 王安江 王菊芳 陈学义 魏殿辉 韩尚国 刘建设 《草食家畜》 2008年第4期25-26,共2页

本试验测试了甘露寡糖对奶牛的产奶量以及牛奶的蛋白含量和脂肪含量的影响。结果如下:对照组的平均产奶量:869.17kg,试验组的平均产奶量:816.96kg,两者差异不显著(P>0.05);对照组的平均蛋白含量:3.52,试验组的平均蛋白含量:3.46,两... 本试验测试了甘露寡糖对奶牛的产奶量以及牛奶的蛋白含量和脂肪含量的影响。结果如下:对照组的平均产奶量:869.17kg,试验组的平均产奶量:816.96kg,两者差异不显著(P>0.05);对照组的平均蛋白含量:3.52,试验组的平均蛋白含量:3.46,两者差异不显著(P>0.05);对照组的平均脂肪含量:3.97,试验组的平均脂肪含量:4.01,两者差异不显著(P>0.05)。 展开更多

关键词 甘露寡糖 产奶量 蛋白含量 脂肪含量

在线阅读 下载PDF 职称材料

克隆荷斯坦牛的生长、繁育和生产性能 被引量：2

20

作者 陆东林 魏殿辉 +2 位作者 王鹏 王菊芳 朱兵山 《中国奶牛》 2008年第9期21-24,共4页

本文报道了12头加系荷斯坦克隆母牛的生长发育、配种繁殖和生产性能状况,比较了克隆牛和非克隆牛的部分生产指标。结果表明,在良好的饲养管理条件下,克隆牛的平均初生重、6月龄、18月龄和1产后体重分别达41.6、191.8、520.8和651.1kg;第... 本文报道了12头加系荷斯坦克隆母牛的生长发育、配种繁殖和生产性能状况,比较了克隆牛和非克隆牛的部分生产指标。结果表明,在良好的饲养管理条件下,克隆牛的平均初生重、6月龄、18月龄和1产后体重分别达41.6、191.8、520.8和651.1kg;第1次配种月龄为16.7个月,受孕月龄为19.2个月,产犊月龄为28.6个月;第1泌乳期305d产奶量为7029.7kg,乳脂率3.73%,乳蛋白率3.27%,符合加系荷斯坦牛的生产性能指标。克隆牛生长发育和产奶量指标均略高于非克隆牛,但产间距比非克隆牛长。克隆牛疾病发生情况、类别、治疗效果和非克隆牛相似;有2头克隆牛死于心脏病,其原因有待作深入研究。 展开更多

关键词 克隆牛 生长发育 繁殖 生产性能

在线阅读 下载PDF 职称材料