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题名牛杀菌通透性增加蛋白N端在原核和真核细胞中的表达
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作者
姚楠
白杰
张雪梅
吴卫东
李文蓉
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机构
石河子大学医学院
新疆维吾尔自治区第二人民医院临床实验研究中心
新疆畜牧科学院生物技术中心
新疆大学生命科学学院
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出处
《石河子大学学报（自然科学版）》
CAS
2012年第5期592-597,共6页
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基金
国家自然科学基金项目(30860183)
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文摘
比较重组牛杀菌通透性增加蛋白(BPI)N端714bp编码序列的原核和真核表达载体在大肠杆菌和HEK293细胞中的表达,为进一步研究BPI蛋白N端的功能奠定基础。采用RT-PCR方法从牛的外周血中扩增出BPI蛋白N端的714bp基因片段,分别克隆至原核表达载体pGEX-4T-1和真核表达载体pLEX-MCS后,再分别转化大肠杆菌BL21菌株、感染HEK293细胞进行重组蛋白的表达。Western blotting检测重组BPI蛋白N端在原核和真核细胞中的表达。结果显示:BPI蛋白N端的原核表达载体pGEX-BPI714和真核表达载体pLEX-BPI714导入原核和真核细胞中均得到表达。Western blotting检测显示,重组GST-BPI714融合蛋白在大肠杆菌中仅能低水平表达,且大都以包涵体形式存在;相反,构建的真核表达载体pLEX-BPI714转染到HEK293细胞后,特异的目的蛋白能高效表达。本研究成功构建了牛源BPI714原核表达载体和真核表达载体,重组BPI714在大肠杆菌中表达不稳定,在HEK293细胞中能够稳定表达。
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关键词
BPI
原核表达
真核表达
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Keywords
BPI
prokaryotic expression
eukaryotic expression
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分类号
S823.2
[农业科学—畜牧学]
Q78
[生物学—分子生物学]
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