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PRRSV新疆株N基因原核表达条件的优化及蛋白纯化
1
作者
沙娜瓦尔.塔希
王传锋
+2 位作者
买买提艾力.斯迪克
张伟
冉多良
《新疆农业科学》
CAS
CSCD
北大核心
2011年第6期1110-1114,共5页
【目的】获得重组表达质粒pGEX-6P-N在大肠杆菌BL21中高效表达,分析表达蛋白的免疫学活性及纯化后蛋白的浓度。【方法】通过优化诱导剂终浓度和诱导时间来实现融合蛋白的高效表达,使用BCA法测定蛋白浓度,利用Western blotting分析融合...
【目的】获得重组表达质粒pGEX-6P-N在大肠杆菌BL21中高效表达,分析表达蛋白的免疫学活性及纯化后蛋白的浓度。【方法】通过优化诱导剂终浓度和诱导时间来实现融合蛋白的高效表达,使用BCA法测定蛋白浓度,利用Western blotting分析融合蛋白的免疫学活性。【结果】融合蛋白在37℃条件下,经终浓度为1.2 mmol/L的IPTG诱导表达4.5 h后获得了较高的表达水平。纯化后的融合蛋白经BCA法测定蛋白浓度达到0.587 mg/mL。Western blotting试验表明,GST-N蛋白能与抗PRRSV阳性血清发生特异性反应。【结论】为建立N特异性抗体的间接ELISA检测方法及PRRS诊断试剂盒的研制奠定了基础,为新疆PRRS的防控提供了理论支持。
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关键词
PRRSV
N基因
条件优化
融合蛋白纯化
免疫印迹
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职称材料
题名
PRRSV新疆株N基因原核表达条件的优化及蛋白纯化
1
作者
沙娜瓦尔.塔希
王传锋
买买提艾力.斯迪克
张伟
冉多良
机构
新疆维吾尔自治区动物卫生监督总站
新疆
农业大学
动物
医学学院
伊犁职业技术学院
新疆
天康畜牧生物技术有限公司
出处
《新疆农业科学》
CAS
CSCD
北大核心
2011年第6期1110-1114,共5页
基金
新疆农业大学校内前期课题
文摘
【目的】获得重组表达质粒pGEX-6P-N在大肠杆菌BL21中高效表达,分析表达蛋白的免疫学活性及纯化后蛋白的浓度。【方法】通过优化诱导剂终浓度和诱导时间来实现融合蛋白的高效表达,使用BCA法测定蛋白浓度,利用Western blotting分析融合蛋白的免疫学活性。【结果】融合蛋白在37℃条件下,经终浓度为1.2 mmol/L的IPTG诱导表达4.5 h后获得了较高的表达水平。纯化后的融合蛋白经BCA法测定蛋白浓度达到0.587 mg/mL。Western blotting试验表明,GST-N蛋白能与抗PRRSV阳性血清发生特异性反应。【结论】为建立N特异性抗体的间接ELISA检测方法及PRRS诊断试剂盒的研制奠定了基础,为新疆PRRS的防控提供了理论支持。
关键词
PRRSV
N基因
条件优化
融合蛋白纯化
免疫印迹
Keywords
PRRSV
N gene
optimize condition
purification of N protein
western blotting
分类号
S852.651 [农业科学—基础兽医学]
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题名
作者
出处
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被引量
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1
PRRSV新疆株N基因原核表达条件的优化及蛋白纯化
沙娜瓦尔.塔希
王传锋
买买提艾力.斯迪克
张伟
冉多良
《新疆农业科学》
CAS
CSCD
北大核心
2011
0
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