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猪miR-192靶向调控Wnt7a基因表达的研究
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作者 符彬彬 王东升 +4 位作者 何凡 李清春 祁梦凡 张化鹏 黄涛 《中国畜牧兽医》 CAS CSCD 北大核心 2024年第6期2300-2307,共8页
【目的】鉴定猪miR-192与Wnt家族成员7A(Wnt7a)基因之间的靶向关系,为进一步构建miR-192介导的胚胎通讯提供依据。【方法】使用miRNA pull-down鉴定miR-192和Wnt7a基因间的互作关系;利用生物信息学软件RNAhybrid 2.2预测miR-192和Wnt7a... 【目的】鉴定猪miR-192与Wnt家族成员7A(Wnt7a)基因之间的靶向关系,为进一步构建miR-192介导的胚胎通讯提供依据。【方法】使用miRNA pull-down鉴定miR-192和Wnt7a基因间的互作关系;利用生物信息学软件RNAhybrid 2.2预测miR-192和Wnt7a基因3′-UTR的结合位点,构建含有miR-192结合位点的Wnt7a基因3′-UTR野生型和突变型基因片段,克隆至双荧光素酶报告基因质粒,通过NotⅠ、XhoⅠ酶切和测序进行鉴定;鉴定成功的质粒分别与miR-192 mimics和mimics NC共转染猪子宫内膜上皮细胞,检测双荧光素酶活性;将miR-192 mimics、mimics NC、miR-192 inhibitor、inhibitor NC分别与构建的Wnt7a基因3′-UTR野生型和突变型双荧光素酶报告基因质粒共转染至猪子宫内膜上皮细胞,通过实时荧光定量PCR和Western blotting检测Wnt7a基因mRNA和蛋白的表达水平。【结果】pull-down结果显示,miR-192 mimics组与其阴性对照组相比,Wnt7a基因相对表达量极显著升高(P<0.01),miR-192 input组相对于其阴性对照组极显著降低(P<0.01);RNAhybrid 2.2软件预测到miR-192种子区与Wnt7a基因3′-UTR存在结合位点(UGACCUA);转染Wnt7a野生型质粒的miR-192 mimics和miR-192 mimics NC组相比双荧光素酶活性显著降低(P<0.05),转染Wnt7a突变型质粒的miR-192 mimics和miR-192 mimics NC组之间双荧光素酶活性无显著差异(P>0.05)。实时荧光定量PCR结果表明,miR-192 mimics组Wnt7a基因mRNA相对表达量显著低于其阴性对照组(P<0.05),miR-192 inhibitor组显著高于其阴性对照组(P<0.05)。Western blotting结果表明,过表达miR-192极显著抑制了Wnt7a蛋白的表达(P<0.01),抑制miR-192后Wnt7a蛋白的表达量极显著上升(P<0.01)。【结论】miR-192能够与Wnt7a基因3′-UTR发生靶向作用并抑制其表达。研究结果可为今后深入研究miR-192在妊娠着床过程中的调控机制提供理论依据。 展开更多
关键词 miR-192 Wnt7a基因 胚胎附植
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天康生猪育种进展
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作者 黄涛 李清春 +7 位作者 鲁慧文 黄毅 冯振华 李云鹏 赵金潭 崔浩 潘慧玲 彭刚 《中国畜禽种业》 2023年第11期26-30,共5页
随着我国规模化养猪进程的加快,选育出生产性能优秀的生猪的意义日趋重要。目前天康畜牧科技有限公司(以下简称天康畜牧)在猪育种工作方面已取得了一定的成果,该文从近些年天康生猪产业板块、天康育种工作情况、天康种猪性能和天康育种... 随着我国规模化养猪进程的加快,选育出生产性能优秀的生猪的意义日趋重要。目前天康畜牧科技有限公司(以下简称天康畜牧)在猪育种工作方面已取得了一定的成果,该文从近些年天康生猪产业板块、天康育种工作情况、天康种猪性能和天康育种研发与展望四个方面进行阐述,旨在从技术和方法层面为全国生猪种业发展提供参考。 展开更多
关键词 生猪育种 种猪 生产性能 生产性能测定
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母猪妊娠早期唾液、尿液和血浆生殖激素变化规律及唾液结晶分析 被引量:1
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作者 任玉军 张庆泽 +4 位作者 韩飞 陆勤 赵月麒 何凡 黄涛 《猪业科学》 2024年第1期90-93,共4页
传统的血液样本采集时易对母猪造成较大的应激,对于妊娠期母猪采集易造成胚胎损失,而在采集唾液和尿液时母猪处于主动状态,降低了应激对检测结果的影响。同时口腔分泌的唾液中含有多种矿物质和微量元素,有研究发现在人类孕期不同阶段唾... 传统的血液样本采集时易对母猪造成较大的应激,对于妊娠期母猪采集易造成胚胎损失,而在采集唾液和尿液时母猪处于主动状态,降低了应激对检测结果的影响。同时口腔分泌的唾液中含有多种矿物质和微量元素,有研究发现在人类孕期不同阶段唾液中氯离子的含量与血液中孕激素的含量呈负相关。前期有研究对水牛在卵泡破裂后采集唾液中雌二醇含量和雌二醇/孕酮的比率均显著高于发情期和休情期。 展开更多
关键词 母猪妊娠 生殖激素 休情期 矿物质和微量元素 样本采集 卵泡破裂 孕激素 唾液
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母猪妊娠早期血液中差异表达蛋白的鉴定 被引量:1
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作者 祁梦凡 谢苏 +8 位作者 高若男 孙义姗 孙晓梅 和军飞 鲁慧文 卢世豪 陈鑫 李清春 黄涛 《畜牧兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2022年第4期1109-1121,共13页
为了研究母猪妊娠早期外周血液中蛋白质的表达情况,寻找潜在的母猪妊娠早期生物标志物,本试验采集了8头健康、生产表现正常且体况相近的配种后15 d妊娠与非妊娠的长大二元经产母猪外周血液,分离蛋白,利用iTRAQ技术及生物信息学方法筛选... 为了研究母猪妊娠早期外周血液中蛋白质的表达情况,寻找潜在的母猪妊娠早期生物标志物,本试验采集了8头健康、生产表现正常且体况相近的配种后15 d妊娠与非妊娠的长大二元经产母猪外周血液,分离蛋白,利用iTRAQ技术及生物信息学方法筛选与胚胎附植相关的差异表达蛋白,用ELISA验证其表达情况,并进行ROC曲线分析。结果显示,筛选到配种后15 d妊娠与非妊娠母猪外周血中的24个差异表达蛋白(妊娠母猪中19个上调,5个下调),主要富集的信号通路包括PI3K-Akt、p53、MAPK、Estrogen和mTOR等重要信号通路。ELISA结果验证其表达趋势与iTRAQ检测结果一致。ROC曲线分析发现,配种后15 d血液中的FLNC、ADIPOQ、HP和TERF2以及FLNC-ADIPOQ、ADIPOQ-HP联合使用均可作为母猪早期妊娠潜在的生物标志物,且准确性与特异性较好。本研究鉴定了配种后15 d母猪血液中差异表达蛋白,且发现FLNC、ADIPOQ、HP和TERF2可作为母猪妊娠早期的潜在生物标志物,并为母猪胚胎附植机制研究提供新视角。 展开更多
关键词 ITRAQ 蛋白组学 早期妊娠 生物标志物
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抗冻蛋白对猪精液保存影响的应用
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作者 艾子凯 何仁伟 黄涛 《猪业科学》 2023年第12期103-106,共4页
目前新疆生猪养殖行业中,其核心养殖场的首要问题为种公猪精液利用率不足,大多数猪场人工授精所用精液多数来自当天采集,或来自17℃存储1~2 d的精液;市场上中效、中长效和长效等猪鲜精稀释粉大部分被养猪发达国家所垄断,价格较高,给生... 目前新疆生猪养殖行业中,其核心养殖场的首要问题为种公猪精液利用率不足,大多数猪场人工授精所用精液多数来自当天采集,或来自17℃存储1~2 d的精液;市场上中效、中长效和长效等猪鲜精稀释粉大部分被养猪发达国家所垄断,价格较高,给生猪养殖业带来较大经济压力,增加了企业生产成本。 展开更多
关键词 精液保存 生猪养殖业 种公猪精液 抗冻蛋白 稀释粉 鲜精 人工授精 养殖场
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