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新疆家蚕抗菌肽诱导人胃癌细胞AGS凋亡的研究 被引量:4
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作者 吴艳玲 夏丽洁 张富春 《中国药理学通报》 CAS CSCD 北大核心 2015年第2期186-193,共8页
目的探讨新疆家蚕抗菌肽(cecropinXJ)是否通过诱导人胃癌细胞AGS凋亡产生抗肿瘤的作用。方法选择0.01~1000mg·L^-1浓度范围内的cecropinXJ与人胃癌细胞AGS和人正常胃上皮细胞GES-1共培养24h,采用MTT法检测cecropinXJ对AGS细胞... 目的探讨新疆家蚕抗菌肽(cecropinXJ)是否通过诱导人胃癌细胞AGS凋亡产生抗肿瘤的作用。方法选择0.01~1000mg·L^-1浓度范围内的cecropinXJ与人胃癌细胞AGS和人正常胃上皮细胞GES-1共培养24h,采用MTT法检测cecropinXJ对AGS细胞和GES-1细胞增殖的影响;透射电镜观察细胞超微结构变化;Hoechst染色观察细胞凋亡情况;流式细胞术检测细胞内活性氧和线粒体膜电位的变化;实时荧光定量PCR(qRT-PCR)和Westernblot检测Bax、Bcl-2、caspase-3以及细胞色素CmRNA和蛋白水平的表达变化。结果CecropinXJ在体外能明显抑制胃癌AGS细胞的增殖(P〈0.05),并具有浓度依赖性,IC90值为61.19mg·L^-1,但对GES-1细胞无明显的抑制增殖作用。经cecropinXJ处理24h后,AGS细胞核固缩,呈现典型细胞凋亡特征,同时细胞内活性氧增加,线粒体膜电位下降。qRT-PCR和Westernblot结果表明,cecropinXJ能够引起Bcl-2表达下调,Bax表达上调,促进细胞色素C的释放并活化caspase-3。CecropinXJ促进caspase-3活性呈剂量依赖,经caspase-3和caspase-9特异性抑制剂处理后可降低cecropinXJ介导的AGS细胞死亡率。结论CecropinXJ可通过下调Bcl-2表达,上调Bax表达和活化caspase-3诱导AGS细胞凋亡,是其抗肿瘤机制之一。 展开更多
关键词 新疆家蚕抗菌肽(cecropinXJ) 胃癌 AGS细胞 细胞凋亡 Bcl-2 BAX CASPASE-3 抗肿瘤
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新牧一号杂花苜蓿MvNHX1基因的表达分析和提高烟草耐盐性的研究 被引量:5
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作者 张桦 张富春 +2 位作者 张雨良 张博 陈全家 《植物研究》 CAS CSCD 北大核心 2011年第5期550-557,共8页
提取新牧一号杂花苜蓿的总RNA,用特异引物RT-PCR扩增后的cDNA片段连接入pMD19-T载体,转化大肠杆菌DH5α,对阳性克隆进行序列分析,新牧一号苜蓿NHX1(MvNHX1)全长1 626 bp,Genbank登录号为:EU375310。半定量RT-PCR和实时荧光定量PCR分析表... 提取新牧一号杂花苜蓿的总RNA,用特异引物RT-PCR扩增后的cDNA片段连接入pMD19-T载体,转化大肠杆菌DH5α,对阳性克隆进行序列分析,新牧一号苜蓿NHX1(MvNHX1)全长1 626 bp,Genbank登录号为:EU375310。半定量RT-PCR和实时荧光定量PCR分析表明,在盐胁迫下MvNHX1基因的表达均上调。构建重组植物表达载体pBI121-MvNHX1后,通过农杆菌介导的叶盘法转化烟草,转基因烟草在盐胁迫下发芽率和生物量均高于非转基因烟草,表明MvNHX1能够提高转基因烟草的耐盐性。 展开更多
关键词 新牧一号苜蓿 MvNHX1 克隆 序列分析 耐盐性
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