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大鼠大脑皮质神经细胞氧糖剥夺再复氧(OGD/R)后自噬对凋亡的抑制作用
被引量：
4
1
作者
张磊
李阳
+5 位作者
胡玉奇
许晖
朱超
王旭
赵冬
贺昕
《细胞与分子免疫学杂志》
CAS
CSCD
北大核心
2022年第7期590-597,共8页
目的 观察大脑皮质神经元氧糖剥夺再复氧(OGD/R)后自噬对凋亡的影响。方法 取18只出生在24 h内的新生SD大鼠,采用机械分离胰蛋白酶消化法提取大脑皮质神经元培养7 d后,建立OGD/R模型,随机分为3组,正常对照组、OGD/R组、OGD/R联合巴弗洛...
目的 观察大脑皮质神经元氧糖剥夺再复氧(OGD/R)后自噬对凋亡的影响。方法 取18只出生在24 h内的新生SD大鼠,采用机械分离胰蛋白酶消化法提取大脑皮质神经元培养7 d后,建立OGD/R模型,随机分为3组,正常对照组、OGD/R组、OGD/R联合巴弗洛霉素A1(BafA1)组。采用CCK-8法和乳酸脱氢酶(LDH)实验检测细胞活力,用异硫氰酸荧光素标记的膜联素Ⅴ/碘化丙啶(annexinⅤ-FITC/PI)双标记结合流式细胞术检测细胞凋亡,采用反转录PCR法检测微管相关蛋白1轻链3(LC3)、 P62及胱天蛋白酶3(caspase-3)的mRNA表达,Western blot法检测LC3、 P62及caspase-3的蛋白表达。采用红色荧光蛋白-绿色荧光蛋白-LC3(RFP-GFP-LC3)腺病毒转染神经细胞检测自噬荧光强度,透射电子显微镜观察自噬体的超微结构变化。结果 与对照组相比,OGD/R组神经细胞活力明显降低,LDH释放水平明显升高,凋亡增加;LC3、 P62、 caspase-3的mRNA和蛋白表达增强;RFP荧光强度增加,自噬体增加且自噬溶酶体更加聚集,加用自噬晚期抑制剂BafA1后RFP荧光强度显著降低。结论 OGD/R诱导了神经元细胞的自噬和凋亡,抑制自噬后加重了神经细胞的损伤和凋亡。
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关键词
皮质神经元细胞
氧糖剥夺再复氧(OGD/R)
细胞凋亡
自噬
巴弗洛霉素A1(BafA1)
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职称材料
题名
大鼠大脑皮质神经细胞氧糖剥夺再复氧(OGD/R)后自噬对凋亡的抑制作用
被引量：
4
1
作者
张磊
李阳
胡玉奇
许晖
朱超
王旭
赵冬
贺昕
机构
石河子大学第一附属
医院
神经
外科
新疆生产建设兵团第十师北屯医院神经外科
新疆
乌鲁木齐市口腔
医院
颌面
外科
出处
《细胞与分子免疫学杂志》
CAS
CSCD
北大核心
2022年第7期590-597,共8页
基金
国家自然科学基金(81960222)
石河子大学国际科技合作促进计划(GJHZ201704)
兵团中青年科技创新领军人才(2020CB011)。
文摘
目的 观察大脑皮质神经元氧糖剥夺再复氧(OGD/R)后自噬对凋亡的影响。方法 取18只出生在24 h内的新生SD大鼠,采用机械分离胰蛋白酶消化法提取大脑皮质神经元培养7 d后,建立OGD/R模型,随机分为3组,正常对照组、OGD/R组、OGD/R联合巴弗洛霉素A1(BafA1)组。采用CCK-8法和乳酸脱氢酶(LDH)实验检测细胞活力,用异硫氰酸荧光素标记的膜联素Ⅴ/碘化丙啶(annexinⅤ-FITC/PI)双标记结合流式细胞术检测细胞凋亡,采用反转录PCR法检测微管相关蛋白1轻链3(LC3)、 P62及胱天蛋白酶3(caspase-3)的mRNA表达,Western blot法检测LC3、 P62及caspase-3的蛋白表达。采用红色荧光蛋白-绿色荧光蛋白-LC3(RFP-GFP-LC3)腺病毒转染神经细胞检测自噬荧光强度,透射电子显微镜观察自噬体的超微结构变化。结果 与对照组相比,OGD/R组神经细胞活力明显降低,LDH释放水平明显升高,凋亡增加;LC3、 P62、 caspase-3的mRNA和蛋白表达增强;RFP荧光强度增加,自噬体增加且自噬溶酶体更加聚集,加用自噬晚期抑制剂BafA1后RFP荧光强度显著降低。结论 OGD/R诱导了神经元细胞的自噬和凋亡,抑制自噬后加重了神经细胞的损伤和凋亡。
关键词
皮质神经元细胞
氧糖剥夺再复氧(OGD/R)
细胞凋亡
自噬
巴弗洛霉素A1(BafA1)
Keywords
cortical neurons
oxygen-glucose deprivation and reoxygenation(OGD/R)
apoptosis
autophagy
Bafilomycin A1(BafA1)
分类号
R965 [医药卫生—药理学]
R392-33 [医药卫生—免疫学]
R364.4 [医药卫生—病理学]
Q255 [生物学—细胞生物学]
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出处
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1
大鼠大脑皮质神经细胞氧糖剥夺再复氧(OGD/R)后自噬对凋亡的抑制作用
张磊
李阳
胡玉奇
许晖
朱超
王旭
赵冬
贺昕
《细胞与分子免疫学杂志》
CAS
CSCD
北大核心
2022
4
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