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miR-34a-5p对KSHV感染的神经细胞增殖和迁移能力的影响
被引量：
3
1
作者
吴淑媛
曹冬冬
+5 位作者
李冬梅
张晓艳
徐慧玲
李英
潘泽民
李冬妹
《石河子大学学报（自然科学版）》
CAS
北大核心
2021年第2期218-224,共7页
目的研究miR-34a-5p对卡波氏肉瘤相关疱疹病毒(Kaposi's sarcoma-associated herpesvirus,KSHV)感染的神经细胞增殖和迁移能力的影响。方法选择KSHV感染的SH-SY5Y神经细胞(SK-RG)和SH-SY5Y细胞,进行差异表达的miRNA转录组测序和生...
目的研究miR-34a-5p对卡波氏肉瘤相关疱疹病毒(Kaposi's sarcoma-associated herpesvirus,KSHV)感染的神经细胞增殖和迁移能力的影响。方法选择KSHV感染的SH-SY5Y神经细胞(SK-RG)和SH-SY5Y细胞,进行差异表达的miRNA转录组测序和生物信息学分析,通过qRT-PCR法验证SH-SY5Y、SK-RG中miR-34a-5p表达水平。采用Lipofectamine 2000分别将miR-34a-5p mimics与miR-NC转染至SK-RG细胞,qRT-PCR检测转染效果。采用MTT法及平板克隆实验检测细胞增殖能力。通过Transwell及划痕实验比较两组细胞的迁移能力。采用TargetScan分析miR-34a-5p与候选靶基因c-fos基因3'UTR区的结合位点,采用双荧光素酶报告基因实验检测miR-34a-5p和c-fos 3'UTR区的靶向调控关系以分析其作用机制。采用Western blot在转染miR-34a-5p mimics与miR-NC的细胞中检测靶基因c-fos的表达。结果转录组测序结果及qRT-PCR验证均提示,SK-RG细胞中miR-34a-5p的水平低于SH-SY5Y细胞(P<0.05)。于SK-RG细胞中过量表达miR-34a-5p后,MTT和平板克隆实验结果表明miR-34a-5p组细胞增殖能力低于miR-NC对照组(P<0.05)。Transwell和细胞划痕实验结果表明,miR-34a-5p组细胞迁移能力低于miR-NC对照组(P<0.05)。双荧光素酶报告基因实验结果提示miR-34a-5p可通过3'UTR区调控c-fos的表达。Western blot结果显示,miR-34a-5p可负向调控c-fos表达。结论miR-34a-5p可能通过抑制c-fos的表达而抑制KSHV感染的神经细胞的增殖和迁移能力,可能成为治疗KSHV感染相关疾病的小分子miRNA候选药物。
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关键词
KSHV
miR-34a-5p
C-FOS
神经细胞
增殖
迁移
在线阅读
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职称材料
干扰FOS表达对KSHV感染的神经元细胞增殖的影响
被引量：
3
2
作者
徐慧玲
曹冬冬
+5 位作者
李英
张晓艳
吴淑媛
王晓露
潘泽民
李冬妹
《石河子大学学报（自然科学版）》
CAS
北大核心
2020年第3期359-364,共6页
目的探讨在卡波氏肉瘤相关疱疹病毒(Kaposi’s sarcoma associated herpesvirus,KSHV)感染的神经元细胞中干扰FOS基因表达,对细胞增殖和KSHV病毒的影响。方法采用强力霉素和丁酸钠诱导islk.219细胞的病毒r KSHV.219进入裂解态并提取病毒...
目的探讨在卡波氏肉瘤相关疱疹病毒(Kaposi’s sarcoma associated herpesvirus,KSHV)感染的神经元细胞中干扰FOS基因表达,对细胞增殖和KSHV病毒的影响。方法采用强力霉素和丁酸钠诱导islk.219细胞的病毒r KSHV.219进入裂解态并提取病毒,采用病毒提取液感染SH-SY5Y细胞,采用荧光显微镜观察GFP确定感染成功,采用real time-PCR检测KSHV感染与未感染SH-SY5Y细胞FOS基因的表达;构建FOS基因的干扰质粒;并与KSHV感染的SH-SY5Y细胞中干扰FOS的表达,采用real time-PCR和Western blot确定干扰效率,采用real time-PCR检测干扰与未干扰细胞中KSHV病毒因子LANA、RTA以及K8.1的mRNA表达情况,采用MTT法检测细胞增殖能力,PI染色结合流式细胞技术检测细胞周期;结果重组病毒r KSHV.219能够成功感染SH-SY5Y细胞,FOS基因在KSHV感染的SH-SY5Y细胞中表达上调(P<0.05);干扰FOS基因后,FOS基因的mRNA和蛋白表达水平明显降低(P<0.05);KSHV病毒因子LANA、RTA以及K8.1的mRNA表达水平均有降低(P<0.05);MTT结果提示,干扰FOS表达抑制了KSHV感染的SH-SY5Y细胞增殖(P<0.05);干扰48 h后感染细胞周期被阻滞在G0/G1期(P<0.05)。结论 KSHV能够感染神经元细胞SH-SY5Y,干扰FOS表达能抑制感染细胞的增殖,阻滞细胞周期G0/G1期的进程,靶向干扰FOS在KSHV感染引起的神经系统疾病的治疗中具有一定的价值。
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关键词
卡波氏肉瘤相关疱疹病毒
FOS
神经元细胞
增殖
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职称材料
题名
miR-34a-5p对KSHV感染的神经细胞增殖和迁移能力的影响
被引量：
3
1
作者
吴淑媛
曹冬冬
李冬梅
张晓艳
徐慧玲
李英
潘泽民
李冬妹
机构
石河子
大学医学
院
生物化学教研室/
新疆
地方与民族高发病教育部重点实验室
新疆生产建设兵团第八师石河子市妇幼保健院
出处
《石河子大学学报（自然科学版）》
CAS
北大核心
2021年第2期218-224,共7页
基金
国家自然科学基金项目(81760362),自治区研究生科研创新项目(XJ2019G1013,XJ2020G124),石河子大学科研项目(ZZZC202021A)。
文摘
目的研究miR-34a-5p对卡波氏肉瘤相关疱疹病毒(Kaposi's sarcoma-associated herpesvirus,KSHV)感染的神经细胞增殖和迁移能力的影响。方法选择KSHV感染的SH-SY5Y神经细胞(SK-RG)和SH-SY5Y细胞,进行差异表达的miRNA转录组测序和生物信息学分析,通过qRT-PCR法验证SH-SY5Y、SK-RG中miR-34a-5p表达水平。采用Lipofectamine 2000分别将miR-34a-5p mimics与miR-NC转染至SK-RG细胞,qRT-PCR检测转染效果。采用MTT法及平板克隆实验检测细胞增殖能力。通过Transwell及划痕实验比较两组细胞的迁移能力。采用TargetScan分析miR-34a-5p与候选靶基因c-fos基因3'UTR区的结合位点,采用双荧光素酶报告基因实验检测miR-34a-5p和c-fos 3'UTR区的靶向调控关系以分析其作用机制。采用Western blot在转染miR-34a-5p mimics与miR-NC的细胞中检测靶基因c-fos的表达。结果转录组测序结果及qRT-PCR验证均提示,SK-RG细胞中miR-34a-5p的水平低于SH-SY5Y细胞(P<0.05)。于SK-RG细胞中过量表达miR-34a-5p后,MTT和平板克隆实验结果表明miR-34a-5p组细胞增殖能力低于miR-NC对照组(P<0.05)。Transwell和细胞划痕实验结果表明,miR-34a-5p组细胞迁移能力低于miR-NC对照组(P<0.05)。双荧光素酶报告基因实验结果提示miR-34a-5p可通过3'UTR区调控c-fos的表达。Western blot结果显示,miR-34a-5p可负向调控c-fos表达。结论miR-34a-5p可能通过抑制c-fos的表达而抑制KSHV感染的神经细胞的增殖和迁移能力,可能成为治疗KSHV感染相关疾病的小分子miRNA候选药物。
关键词
KSHV
miR-34a-5p
C-FOS
神经细胞
增殖
迁移
Keywords
Kaposi's sarcoma-associated herpesvirus
c-fos
miR-34a-5p
neuronal cells
proliferation
migration
分类号
R73.3 [医药卫生—肿瘤]
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职称材料
题名
干扰FOS表达对KSHV感染的神经元细胞增殖的影响
被引量：
3
2
作者
徐慧玲
曹冬冬
李英
张晓艳
吴淑媛
王晓露
潘泽民
李冬妹
机构
石河子
大学医学
院
生物化学教研室/
新疆
地方与民族高发病教育部重点实验室
新疆生产建设兵团第八师石河子市妇幼保健院
出处
《石河子大学学报（自然科学版）》
CAS
北大核心
2020年第3期359-364,共6页
基金
国家自然科学基金项目(81760362)
自治区研究生科研创新项目(XJ2019G103)。
文摘
目的探讨在卡波氏肉瘤相关疱疹病毒(Kaposi’s sarcoma associated herpesvirus,KSHV)感染的神经元细胞中干扰FOS基因表达,对细胞增殖和KSHV病毒的影响。方法采用强力霉素和丁酸钠诱导islk.219细胞的病毒r KSHV.219进入裂解态并提取病毒,采用病毒提取液感染SH-SY5Y细胞,采用荧光显微镜观察GFP确定感染成功,采用real time-PCR检测KSHV感染与未感染SH-SY5Y细胞FOS基因的表达;构建FOS基因的干扰质粒;并与KSHV感染的SH-SY5Y细胞中干扰FOS的表达,采用real time-PCR和Western blot确定干扰效率,采用real time-PCR检测干扰与未干扰细胞中KSHV病毒因子LANA、RTA以及K8.1的mRNA表达情况,采用MTT法检测细胞增殖能力,PI染色结合流式细胞技术检测细胞周期;结果重组病毒r KSHV.219能够成功感染SH-SY5Y细胞,FOS基因在KSHV感染的SH-SY5Y细胞中表达上调(P<0.05);干扰FOS基因后,FOS基因的mRNA和蛋白表达水平明显降低(P<0.05);KSHV病毒因子LANA、RTA以及K8.1的mRNA表达水平均有降低(P<0.05);MTT结果提示,干扰FOS表达抑制了KSHV感染的SH-SY5Y细胞增殖(P<0.05);干扰48 h后感染细胞周期被阻滞在G0/G1期(P<0.05)。结论 KSHV能够感染神经元细胞SH-SY5Y,干扰FOS表达能抑制感染细胞的增殖,阻滞细胞周期G0/G1期的进程,靶向干扰FOS在KSHV感染引起的神经系统疾病的治疗中具有一定的价值。
关键词
卡波氏肉瘤相关疱疹病毒
FOS
神经元细胞
增殖
Keywords
Kapo's sarcoma-associated herpesvirus
FOS
neuronal cells
proliferation
分类号
R738 [医药卫生—肿瘤]
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职称材料
题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
miR-34a-5p对KSHV感染的神经细胞增殖和迁移能力的影响
吴淑媛
曹冬冬
李冬梅
张晓艳
徐慧玲
李英
潘泽民
李冬妹
《石河子大学学报（自然科学版）》
CAS
北大核心
2021
3
在线阅读
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职称材料
2
干扰FOS表达对KSHV感染的神经元细胞增殖的影响
徐慧玲
曹冬冬
李英
张晓艳
吴淑媛
王晓露
潘泽民
李冬妹
《石河子大学学报（自然科学版）》
CAS
北大核心
2020
3
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引证文献
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