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题名莲藕根尖染色体制片与免疫荧光染色技术的优化
被引量：3
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作者
王海燕
朱之轩
金晶
丁毅
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机构
新疆教育学院科学教育学院
武汉大学生命科学学院遗传学系
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出处
《生物技术通报》
CAS
CSCD
北大核心
2016年第4期74-79,共6页
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基金
国家自然科学基金资助项目(31271310)
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文摘
在细胞遗传学研究中,莲藕根尖染色体制片比较困难,研究了莲藕根尖染色体制片过程中适宜取材的根尖长度、有丝分裂指数、预处理试剂和处理时间、固定时间、酶解与低渗时间等相关因素,并对莲制片进行了免疫荧光染色。结果表明:根尖长为1.5 cm左右时有丝分裂指数最高,预处理采用冰水冷冻处理24 h分裂相较多,染色体形态清晰;用4%多聚甲醛固定1h,染色体形态较好;采用2.5%纤维素酶和2.5%果胶酶混合液37℃消化30 min,酶解较彻底,细胞质残留少,染色体分散良好;1×PBS低渗30 min,染色体形态较好;免疫荧光染色后经检测可观察到较强的信号。
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关键词
莲藕根尖细胞
预处理
有丝分裂指数
染色体制片
DAPI染色
免疫荧光
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Keywords
root tip cells of Nelumbo nucifera
pretreatment
mitotic index
chromosome preparations
DAPI staining
immunofluorescence
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分类号
S645.1
[农业科学—蔬菜学]
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