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CRISPR/Cas9技术编辑新疆甜瓜全缘叶基因
被引量：
4
1
作者
王丹
王旭辉
+1 位作者
高兴旺
李冠
《新疆农业科学》
CAS
CSCD
北大核心
2018年第2期238-245,共8页
【目的】以新疆甜瓜地方品种老汉瓜为研究材料,对其全缘叶基因进行基因编辑,构建新疆甜瓜CRISPR/Cas9敲除载体,分析甜瓜耐受潮霉素最大浓度,为研究新疆甜瓜裂叶基因的功能奠定基础。【方法】在课题组前期确定甜瓜全缘叶基因PLL的基础上...
【目的】以新疆甜瓜地方品种老汉瓜为研究材料,对其全缘叶基因进行基因编辑,构建新疆甜瓜CRISPR/Cas9敲除载体,分析甜瓜耐受潮霉素最大浓度,为研究新疆甜瓜裂叶基因的功能奠定基础。【方法】在课题组前期确定甜瓜全缘叶基因PLL的基础上,结合甜瓜基因组数据,设计PLL基因外显子的特异靶位点,构建甜瓜全缘叶基因PLL的CRISPR/Cas9敲除载体,将构建好的载体转化到大肠杆菌中,并测序验证,然后对甜瓜耐受潮霉素浓度进行分析。【结果】针对全缘叶基因PLL外显子选择一个长约20 bp的靶位点,根据靶位点设计sgRNA框,并成功将其构建到CRISPR/Cas9敲除载体上,然后将载体成功转化到大肠杆菌中。分析出甜瓜可耐受潮霉素的最大浓度为10 mg/L。【结论】成功获得甜瓜全缘叶基因PLL的敲除载体,并转化到大肠杆菌中。分析出甜瓜耐受潮霉素的最大浓度,为进一步利用CRISPR/Cas9基因编辑技术研究新疆甜瓜裂叶基因pll的功能奠定基础。
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关键词
甜瓜
全缘叶基因
PLL
CRISPR/Cas9
潮霉素
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职称材料
CRISPR-Cas9技术敲除甜瓜eIF4E基因表达载体的构建
被引量：
3
2
作者
杨晶
王旭辉
+1 位作者
王东
李冠
《新疆农业科学》
CAS
CSCD
北大核心
2018年第5期821-828,共8页
【目的】构建甜瓜e IF4E基因的CRISPR-Cas9植物基因编辑系统的gRNA表达载体。为研究eIF4E基因功能奠定基础。【方法】以新疆主栽甜瓜皇后为材料,在eIF4E基因的第一个外显子区设计gRNA引物,以载体pP1C.4为模板,扩增获得sgRNA克隆框,使用E...
【目的】构建甜瓜e IF4E基因的CRISPR-Cas9植物基因编辑系统的gRNA表达载体。为研究eIF4E基因功能奠定基础。【方法】以新疆主栽甜瓜皇后为材料,在eIF4E基因的第一个外显子区设计gRNA引物,以载体pP1C.4为模板,扩增获得sgRNA克隆框,使用EcoR I、XbaI双酶切pP1C.4载体,利用DNA重组酶构建重组载体p P1C.4-eIF4E。【结果】经菌落PCR检测和测序,gRNA已经成功连接到植物基因敲除载体pP1C.4。【结论】构建了植物基因敲除载体pP1C.4-e IF4E,pP1C.4-e IF4E能对eIF4E基因进行定向编辑。
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关键词
甜瓜
CRISPR/Cas9
EIF4E
载体构建
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职称材料
题名
CRISPR/Cas9技术编辑新疆甜瓜全缘叶基因
被引量：
4
1
作者
王丹
王旭辉
高兴旺
李冠
机构
新疆大学生物工程研究中心
新疆
农业科学院
生物
质能源
研究
所
出处
《新疆农业科学》
CAS
CSCD
北大核心
2018年第2期238-245,共8页
基金
国家自然科学基金项目"甜瓜抗白粉病基因挖掘与聚合育种"(31260258)
国家自然科学基金项目"甜瓜果实糖积累的遗传学与关键调控因子研究"(31660297)
+1 种基金
新疆维吾尔自治区自然科学基金项目"哈密瓜抗白粉病
霜霉病新种质的分子选育"(2016D01C066)~~
文摘
【目的】以新疆甜瓜地方品种老汉瓜为研究材料,对其全缘叶基因进行基因编辑,构建新疆甜瓜CRISPR/Cas9敲除载体,分析甜瓜耐受潮霉素最大浓度,为研究新疆甜瓜裂叶基因的功能奠定基础。【方法】在课题组前期确定甜瓜全缘叶基因PLL的基础上,结合甜瓜基因组数据,设计PLL基因外显子的特异靶位点,构建甜瓜全缘叶基因PLL的CRISPR/Cas9敲除载体,将构建好的载体转化到大肠杆菌中,并测序验证,然后对甜瓜耐受潮霉素浓度进行分析。【结果】针对全缘叶基因PLL外显子选择一个长约20 bp的靶位点,根据靶位点设计sgRNA框,并成功将其构建到CRISPR/Cas9敲除载体上,然后将载体成功转化到大肠杆菌中。分析出甜瓜可耐受潮霉素的最大浓度为10 mg/L。【结论】成功获得甜瓜全缘叶基因PLL的敲除载体,并转化到大肠杆菌中。分析出甜瓜耐受潮霉素的最大浓度,为进一步利用CRISPR/Cas9基因编辑技术研究新疆甜瓜裂叶基因pll的功能奠定基础。
关键词
甜瓜
全缘叶基因
PLL
CRISPR/Cas9
潮霉素
Keywords
melon
Entive leafgene gene
PIL
CRISPR/Cas9
Hygromycin
分类号
S188 [农业科学—农业基础科学]
S652 [农业科学—果树学]
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职称材料
题名
CRISPR-Cas9技术敲除甜瓜eIF4E基因表达载体的构建
被引量：
3
2
作者
杨晶
王旭辉
王东
李冠
机构
新疆大学生物工程研究中心
新疆
农业科学院
生物
质能源
研究
所
新疆
喀什
大学
出处
《新疆农业科学》
CAS
CSCD
北大核心
2018年第5期821-828,共8页
基金
国家自然科学基金项目"甜瓜抗白粉病基因挖掘与聚合育种"(31260258)
国家自然科学基金项目"甜瓜果实糖积累的遗传学与关键调控因子研究"(31660297)
+1 种基金
自治区自然科学基金项目"哈密瓜抗白粉病
霜霉病新种质的分子选育"(2016D01C066)~~
文摘
【目的】构建甜瓜e IF4E基因的CRISPR-Cas9植物基因编辑系统的gRNA表达载体。为研究eIF4E基因功能奠定基础。【方法】以新疆主栽甜瓜皇后为材料,在eIF4E基因的第一个外显子区设计gRNA引物,以载体pP1C.4为模板,扩增获得sgRNA克隆框,使用EcoR I、XbaI双酶切pP1C.4载体,利用DNA重组酶构建重组载体p P1C.4-eIF4E。【结果】经菌落PCR检测和测序,gRNA已经成功连接到植物基因敲除载体pP1C.4。【结论】构建了植物基因敲除载体pP1C.4-e IF4E,pP1C.4-e IF4E能对eIF4E基因进行定向编辑。
关键词
甜瓜
CRISPR/Cas9
EIF4E
载体构建
Keywords
melon
CRISPR/Cas9
eIF4E
vector construction
分类号
S652 [农业科学—果树学]
S503.52 [农业科学—作物学]
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职称材料
题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
CRISPR/Cas9技术编辑新疆甜瓜全缘叶基因
王丹
王旭辉
高兴旺
李冠
《新疆农业科学》
CAS
CSCD
北大核心
2018
4
在线阅读
下载PDF
职称材料
2
CRISPR-Cas9技术敲除甜瓜eIF4E基因表达载体的构建
杨晶
王旭辉
王东
李冠
《新疆农业科学》
CAS
CSCD
北大核心
2018
3
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职称材料
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