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Nrf2通过降低有氧糖酵解缓解CoCl_(2)诱导的大鼠肺动脉平滑肌细胞增殖和迁移
1
作者 张穗 黄家瑜 +2 位作者 何丽丽 买热甫喀·木合塔尔 罗琴 《中国病理生理杂志》 北大核心 2025年第5期919-926,共8页
目的:探究核因子E2相关因子2(nuclear factor E2-related factor 2,Nrf2)通过有氧糖酵解途径影响CoCl_(2)诱导的低氧条件下原代大鼠肺动脉平滑肌细胞(pulmonary artery smooth muscle cells,PASMCs)的增殖和迁移,并揭示其潜在的作用机... 目的:探究核因子E2相关因子2(nuclear factor E2-related factor 2,Nrf2)通过有氧糖酵解途径影响CoCl_(2)诱导的低氧条件下原代大鼠肺动脉平滑肌细胞(pulmonary artery smooth muscle cells,PASMCs)的增殖和迁移,并揭示其潜在的作用机制。方法:采用酶消化法分离原代SD大鼠PASMCs,并通过200μmol/L CoCl_(2)诱导建立化学性低氧细胞模型。实验设置0、6、24和48 h四个时点观察CoCl_(2)刺激下PASMCs中有氧糖酵解关键酶[丙酮酸激酶M2型(pyruvate kinase M2,PKM2)、乳酸脱氢酶A(lactate dehydrogenase A,LDHA)和单羧酸转运体蛋白4(monocarboxylate transporter 4,MCT4)]及增殖细胞核抗原(proliferating cell nuclera antigen,PCNA)的蛋白表达变化。通过Western blot筛选Nrf2激活剂富马酸二甲酯(dimethyl fumarate,DMF)和抑制剂ML385的最佳作用浓度,随后将细胞分为4组:常氧对照(normoxic control,NC)组、CoCl_(2)组、CoCl_(2)+DMF组及NC+ML385组,分别检测各组PASMCs的增殖和迁移能力,以及HIF-1α、Nrf2和有氧糖酵解关键酶的蛋白表达水平。结果:在CoCl_(2)诱导大鼠PASMCs低氧细胞模型中,随着低氧时间的延长,Nrf2蛋白水平显著下降(P<0.05),有氧糖酵解关键酶及PCNA蛋白水平显著升高(P<0.05),PASMCs迁移能力显著增强(P<0.05)。DMF干预后有氧糖酵解关键酶的蛋白表达与大鼠PASMCs增殖和迁移能力显著下降(P<0.05),而ML385抑制Nrf2表达后以上实验结果均出现相反变化(P<0.05)。结论:Nrf2可以通过降低有氧糖酵解缓解CoCl_(2)诱导化学性低氧原代大鼠PASMCs的增殖和迁移。 展开更多
关键词 肺动脉平滑肌细胞 有氧糖酵解 核因子E2相关因子2 细胞增殖 细胞迁移
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新疆维吾尔族代谢综合征患者血清FOS相关抗原2蛋白浓度变化及与危险因素个数的关系 被引量：3
2
作者 侯泽鑫 李思源 +5 位作者 曹国磊 胡颖 王童瑶 王丽珍 田倩倩 李军 《医学研究生学报》 CAS 北大核心 2021年第7期717-720,共4页
目的新疆维吾尔族是代谢综合征(MS)高发民族,目前关于FOS相关抗原2(FRA-2)蛋白表达与新疆维吾尔族群体MS关系的报道较少。文中旨在探讨新疆维吾尔族MS人群血清FRA-2蛋白浓度变化及与危险因素个数的关系。方法选取2020年6月至2021年4月... 目的新疆维吾尔族是代谢综合征(MS)高发民族,目前关于FOS相关抗原2(FRA-2)蛋白表达与新疆维吾尔族群体MS关系的报道较少。文中旨在探讨新疆维吾尔族MS人群血清FRA-2蛋白浓度变化及与危险因素个数的关系。方法选取2020年6月至2021年4月于石河子大学医学院第一附属医院内分泌科及心内科就诊,有MS危险因素(肥胖、高血压、高血脂、高血糖)的204例维吾尔族患者,其中有3项及以上危险因素者为MS组(n=118),有1~2项危险因素者为非MS组(n=86)。另外选取同期于我院维吾尔族健康体检者为对照组(n=96,无任何一项MS危险因素)。测定FPG、TG、稳态胰岛素评价指数(HOMA-IR)等指标;ELISA测定FRA-2蛋白表达水平;偏相关法分析指标间相关关系,多元线性分析FRA-2蛋白浓度变化与危险因素个数的关系;Logistic回归分析非MS人群发生MS的影响因素。结果与对照组比较,非MS组、MS组腰围、BMI、SBP、DBP、TG、LDL-C明显升高(P<0.05),HDL-C明显降低(P<0.05);与非MS组比较,MS组FPG、HbA1c、FINS、TC、HOMA-IR明显升高(P<0.05)。与对照组FRA-2蛋白表达[39.87(22.55,56.71)]比较,非MS组[26.23(9.78,43.98)]、MS组[9.90(7.00,16.77)]明显降低(P<0.01)。相关分析结果显示,FRA-2蛋白表达与MS危险因素个数呈负相关(r=-0.619,P=0.000);危险因素每增加一个,FRA-2蛋白表达下降6.722 ng/mL。偏相关分析结果显示:FRA-2蛋白表达水平与腰围、BMI、DBP、FPG、TG、HOMA-IR呈负相关(P<0.05),与HDL-C呈正相关(P<0.05)。FRA-2降低、WC、FPG及TG升高是非MS患者发生MS的危险因素(OR=1.10、1.14、1.26、1.88);TC降低及HDL-C升高是非MS患者发生MS的保护因素(OR=0.22、0.04)。结论新疆维吾尔族MS患者血清FRA-2浓度降低,危险因素越多,FRA-2浓度越低。FRA-2有望成为该人群MS患者病情评估的生物标志物及治疗的潜在靶点。 展开更多
关键词 FOS相关抗原2 代谢综合征 维吾尔族 危险因素个数
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MALAT1调控miR-19b-3p/HIF-1α分子轴参与非小细胞肺癌的发生发展 被引量：2
3
作者 唐乐 李宏 +2 位作者 何丽丽 牛海文 罗琴 《华中科技大学学报（医学版）》 CAS CSCD 北大核心 2022年第5期601-606,共6页
目的探讨MALAT1调控miR-19b-3p/HIF-1α影响非小细胞肺癌(NSCLC)的发病机制。方法采用实时荧光定量PCR(qRT-PCR)检测MALAT1、miR-19b-3p在NSCLC肺癌组织和NSCLC细胞系中的表达水平。过表达miR-19b-3p和敲除MALAT1后,采用qRT-PCR和Wester... 目的探讨MALAT1调控miR-19b-3p/HIF-1α影响非小细胞肺癌(NSCLC)的发病机制。方法采用实时荧光定量PCR(qRT-PCR)检测MALAT1、miR-19b-3p在NSCLC肺癌组织和NSCLC细胞系中的表达水平。过表达miR-19b-3p和敲除MALAT1后,采用qRT-PCR和Western blot检测A549细胞中MALAT1、miR-19b-3p、缺氧诱导因子-1α(HIF-1α)和血管内皮生长因子(VEGF)表达水平的变化。采用细胞增殖毒性检测试剂盒(CCK-8)和流式细胞术检测细胞增殖、细胞周期和凋亡情况。采用Transwell实验检测细胞迁移及侵袭能力。结果在NSCLC癌组织及NSCLC细胞系中MALAT1表达升高、miR-19b-3p表达降低,并且MALAT1与miR-19b-3p表达水平呈负相关(r=-0.8969,P<0.01);过表达miR-19b-3p及敲除MALAT1可使A549细胞中miR-19b-3p基因表达升高,MALAT1、HIF-1α及VEGF基因表达下降。过表达miR-19b-3p使A549细胞增殖能力、分裂能力、侵袭迁移能力下降,凋亡率增加。结论MALAT1可能靶向miR-19b-3p调节HIF-1α/VEGF参与非小细胞肺癌发生发展。 展开更多
关键词 非小细胞肺癌 MALAT1 miR-19b-3p 缺氧诱导因子-1Α 血管内皮生长因子
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肺栓塞患者差异甲基化位点及区域分析
4
作者 曹国磊 何丽丽 +4 位作者 马荣辉 唐乐 曹嘉瑞 牛海文 罗琴 《华中科技大学学报（医学版）》 CAS CSCD 北大核心 2021年第3期292-296,共5页
目的寻找肺栓塞患者差异甲基化CpG位点、甲基化区域及其所对应的目的基因,探讨DNA甲基化在肺栓塞发生中的作用。方法收集2019年1月至2019年12月新疆医科大学附属肿瘤医院确诊的单纯肺栓塞患者和正常对照人群外周血标本各10例,提取DNA,采... 目的寻找肺栓塞患者差异甲基化CpG位点、甲基化区域及其所对应的目的基因,探讨DNA甲基化在肺栓塞发生中的作用。方法收集2019年1月至2019年12月新疆医科大学附属肿瘤医院确诊的单纯肺栓塞患者和正常对照人群外周血标本各10例,提取DNA,采用Illumina Infinium Methylation EPIC Bead Chip芯片(850K芯片)甲基化检测平台于全基因组水平检测肺栓塞组及正常对照组甲基化位点,利用R包Limma进行两组差异甲基化位点分析,采用Bumphunter的方法寻找两组差异甲基化区域。结果(1)肺栓塞组与正常对照组对比分析,共筛选到95286个有意义的差异CpG位点(P<0.05),其中37983个为高甲基化,57303个为低甲基化;对应28273个目的基因,其中13785个为高甲基化,14488个为低甲基化。显著差异CpG位点在CpG岛的分布情况为:CpG岛29%(27483)、Shore 18%(16700)、Shelf 6%(6011)、Open sea 47%(45092)。(2)采用Bumphunter的方法寻找差异甲基化区域,结果筛选出两组差异甲基化区域DMR-1、DMR-2,分别位于3号染色体(195489708-195490309)和6号染色体(49681178-49681774)上(均P<0.05)。DMR-1宽度601 bp,DMR-2宽度596 bp,DMR-1包含8个CpG位点(cg23170091、cg18918831、cg16034541等),其所属的簇包含8个CpG位点,DMR-2包含11个CpG位点(cg01706515、cg14997592、cg26715042等),其所属的簇包含11个CpG位点,且肺栓塞组DMR-1与DMR-2所有CpG位点甲基化水平均较正常对照组高。DMR-1目的基因为MUC4,DMR-2目的基因为CRISP2。结论DNA的高甲基化可能参与了肺栓塞的发生,差异较大的CpG位点cg06417478、cg18105134及其目的基因HOOK2、PROZ和DMR-1、DMR-2中包含的差异CpG位点及其目的基因MUC4、CRISP2的异常甲基化,或许在肺栓塞的发生中起到重要的作用。 展开更多
关键词 肺栓塞 DNA甲基化 CPG 甲基化位点 甲基化区域
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FRA-2 mRNA表达及DNA甲基化水平与代谢综合征的相关性研究 被引量：1
5
作者 杜晴晴 侯泽鑫 +3 位作者 李军 胡颖 曹国磊 李思源 《上海交通大学学报（医学版）》 CAS CSCD 北大核心 2022年第3期350-356,共7页
目的·探讨Fos相关抗原-2(Fos-related antigen-2,FRA-2)mRNA表达水平及DNA甲基化水平与代谢综合征(metabolic syndrome,MS)的关系。方法·采用病例-对照研究方法,纳入2020年6月—2021年6月于石河子大学医学院第一附属医院内分... 目的·探讨Fos相关抗原-2(Fos-related antigen-2,FRA-2)mRNA表达水平及DNA甲基化水平与代谢综合征(metabolic syndrome,MS)的关系。方法·采用病例-对照研究方法,纳入2020年6月—2021年6月于石河子大学医学院第一附属医院内分泌代谢科就诊的有MS危险因素(肥胖、高血脂、高血压、高血糖)的患者160例,分为MS组(危险因素≥3项,n=80)和非MS组(危险因素1~2项,n=80);另选取同期健康体检者纳入对照组(危险因素0项,n=80)。收集并记录年龄、体质量指数(body mass index,BMI)、腰围(waist circumference,WC)、舒张压(diastolic blood pressure,DBP)、收缩压(systolic blood pressure,SBP)等一般资料,测定空腹血糖(fasting plasma glucose,FPG)、三酰甘油(triacylglycerol,TAG)、总胆固醇(total cholesterol,TC)、低密度脂蛋白胆固醇(low density lipoprotein cholesterol,LDLC)、高密度脂蛋白胆固醇(high density lipoprotein cholesterol,HDL-C)、空腹胰岛素(fasting serum insulin,FINS)、胰岛素抵抗指数(homeostasis model assessment-insulin resistance,HOMA-IR)等临床生化指标,反转录-聚合酶链式反应(reverse transcription-polymerase chain reaction,RT-PCR)检测FRA-2 mRNA表达水平,碱基特异性裂解和基质辅助激光解析电离时间飞行质谱仪(matrix-assisted laser desorption/ionisation time-of-flight mass spectrometry,MALDI-TOF-MS)测定FRA-2 DNA甲基化水平。3组之间性别比较采用Kruskal-Wallis H检验,年龄比较采用方差分析,临床生化指标、FRA-2 mRNA表达水平、FRA-2 DNA甲基化水平比较采用协方差分析;Spearman法分析FRA-2 DNA CpG单元甲基化水平与MS相关临床生化指标之间、FRA-2 mRNA表达水平与FRA-2 DNA甲基化水平之间的相关关系;采用线性回归分析FRA-2 DNA甲基化水平与MS危险因素个数的关系。结果·与对照组及非MS组相比,MS组年龄、BMI、WC、DBP、SBP、FPG、TAG、TC、LDL-C、HOMA-IR上升(均P<0.05),HDL-C降低(P=0.000),FRA-2 mRNA表达水平下降(F=49.155,P=0.000)。与对照组相比,非MS组和MS组4个FRA-2 DNA CpG单元甲基化水平上升(均P<0.05);与非MS组相比,MS组5个FRA-2 DNA CpG单元甲基化水平上升(均P<0.05)。线性回归分析结果显示,MS危险因素个数与FRA-2 DNA甲基化水平呈正相关(β=0.012,P=0.000)。Spearman法分析结果显示,测定的10个FRA-2 DNA CpG单元中CpG 3、CpG 8、CpG 9.10、CpG 12.13.14、CpG 19与WC、SBP、DBP、FPG、TAG、HDL-C之间都存在相关性(均P<0.05);FRA-2 mRNA表达水平与FRA-2 DNA甲基化水平呈负相关(r=−0.607,P=0.000)。结论·FRA-2基因甲基化水平与MS的发生有一定的相关性,FRA-2 DNA甲基化水平增高从而下调mRNA表达可能在MS发生中发挥作用。 展开更多
关键词 代谢综合征 Fos相关抗原-2 甲基化 相关性
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