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泡球蚴感染小鼠肝组织T-bet、GATA-3、ROR-γt和IL-17 mRNA表达水平的研究 被引量：12
1
作者 庞楠楠 丁剑冰 +5 位作者 赵慧 王晶 李博 李玉娇 姜涛 马秀敏 《中国免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2011年第5期395-399,共5页
目的:研究泡球蚴感染小鼠肝组织T-bet、GATA-3、ROR-γt和IL-17mRNA表达水平的变化特点,初步探讨Th17细胞与Th1/Th2在棘球蚴感染中的相互关系。方法:通过腹腔接种多房棘球绦虫的幼虫原头蚴混悬液制备泡球蚴感染小鼠模型,持续观察10个月... 目的:研究泡球蚴感染小鼠肝组织T-bet、GATA-3、ROR-γt和IL-17mRNA表达水平的变化特点,初步探讨Th17细胞与Th1/Th2在棘球蚴感染中的相互关系。方法:通过腹腔接种多房棘球绦虫的幼虫原头蚴混悬液制备泡球蚴感染小鼠模型,持续观察10个月,分别在感染2天、8天、1月、3月、6月和10月处死小鼠,收集肝脏组织。采用逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)方法检测各组小鼠肝脏组织T-bet、GATA-3、ROR-γt和IL-17 mRNA的表达水平。结果:T-bet mRNA的表达水平在感染早期开始增高,1月时达高峰后又开始缓缓下降至感染前水平;GATA-3 mRNA的表达水平在感染1月时明显升高,随后一直保持较高的表达水平;ROR-γt mRNA的表达水平在感染早期开始增高,感染1月时达到高峰,随后缓慢下降。IL-17 mRNA表达水平自感染早期开始持续性增高,到感染3月时达高峰,之后又逐渐降低至感染前水平。各组小鼠肝组织ROR-γt mRNA表达水平与T-bet mRNA表达水平呈正相关(r=0.67),IL-17 mRNA表达水平与ROR-γt mRNA表达水平有相关性(r=0.35),P值均<0.05。结论:泡球蚴感染宿主早期,主要以Th1型和Th17型细胞免疫为主,感染中后期出现Th1向Th2转化,机体呈现出以Th2细胞为主的优势应答。 展开更多
关键词 泡球蚴 IL-17 T-BET GATA-3 ROR-γt mRNA
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新疆包虫病手术患者生存质量量表的编制及信效度评价 被引量：3
2
作者 郭敏 邵英梅 +3 位作者 赵萍 冉博 李波霖 温浩 《中国卫生统计》 CSCD 北大核心 2015年第1期68-70,共3页
目的编制一份适合测定新疆包虫病手术患者生存质量的量表。方法利用独立样本t检验、主成分分析等方法对量表项目进行分析,最终形成正式的生存质量量表。结果效度分析结果表明,量表由生理领域、心理领域、独立性领域、社会关系领域、环... 目的编制一份适合测定新疆包虫病手术患者生存质量的量表。方法利用独立样本t检验、主成分分析等方法对量表项目进行分析,最终形成正式的生存质量量表。结果效度分析结果表明,量表由生理领域、心理领域、独立性领域、社会关系领域、环境领域5个维度构成,其累积解释变异量为58.285%;信度分析结果表明,总量表的克朗巴赫系数为0.868,各分量表的克朗巴赫系数分别为0.723、0.676、0.812、0.780、0.626。结论该量表有较高的信度和效度,可以用于包虫病手术患者生存质量的测量。 展开更多
关键词 包虫病 生存质量 量表编制
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细粒棘球蚴SmadA基因的克隆及其功能的初步鉴定 被引量：3
3
作者 李静 张传山 +4 位作者 吕国栋 王俊华 魏绪法 林仁勇 剡根强 《畜牧兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2011年第12期1756-1762,共7页
本研究旨在克隆细粒棘球蚴Smad蛋白家族基因EgSmadA,鉴定其结构及表达部位,并建立酵母双杂交体系。利用生物信息学方法,克隆及分析EgSmadA基因的DNA全长序列,采用免疫组化技术鉴定EgSmadA蛋白的表达及分布,并构建该基因酵母双杂交载体... 本研究旨在克隆细粒棘球蚴Smad蛋白家族基因EgSmadA,鉴定其结构及表达部位,并建立酵母双杂交体系。利用生物信息学方法,克隆及分析EgSmadA基因的DNA全长序列,采用免疫组化技术鉴定EgSmadA蛋白的表达及分布,并构建该基因酵母双杂交载体。结果表明,成功扩增出EgSmadA基因组序列全长4 069bp,包含4个外显子和3个内含子,开放阅读框为957bp,编码318个氨基酸,该蛋白C端含有Smad蛋白家族进化高度保守的典型结构域MH2(Mad homology),并成功构建该基因及其MH2结构域的酵母双杂交载体。免疫组化定位该蛋白主要表达于原头蚴被膜及囊泡生发层。研究结果为进一步研究EgSmadA在细粒棘球蚴生长发育中的作用奠定了基础。 展开更多
关键词 细粒棘球蚴 SmadA 基因克隆 酵母双杂交
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MicroRNA-21通过正调控ERK1/2通路促进食管鳞状细胞癌的增殖和迁移 被引量：3
4
作者 刘凤霞 张盼盼 +3 位作者 李建勇 郑树涛 卢晓梅 刘文亚 《生物技术通报》 CAS CSCD 北大核心 2013年第12期189-193,共5页
旨在对食管鳞癌(ESCC)中miR-21调控细胞增殖和侵袭的机制进行探讨。平板克隆试验和伤口愈合体外试验发现,miR-21过表达可促进细胞增殖和迁移,相反,沉默miR-21可抑制细胞增殖和迁移。同时,Western blotting试验发现,miR-21过表达的Eca10... 旨在对食管鳞癌(ESCC)中miR-21调控细胞增殖和侵袭的机制进行探讨。平板克隆试验和伤口愈合体外试验发现,miR-21过表达可促进细胞增殖和迁移,相反,沉默miR-21可抑制细胞增殖和迁移。同时,Western blotting试验发现,miR-21过表达的Eca109细胞中p-ERK1/2表达上调,而在miR-21抑制的Eca109细胞中表达下调。试验结果提示miR-21可能通过激活ERK1/2/MAPK信号通路促进ESCC细胞增殖和侵袭,而且miR-21是在转录后水平正调控ERK1/2/MAPK信号通路。 展开更多
关键词 MICRORNA-21 ERK1 2 增殖 迁移 食管鳞状细胞癌
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细粒棘球蚴原头蚴包囊和原头蚴成虫抑制差减杂交文库中差异表达基因的筛选及分析 被引量：3
5
作者 赵莉 石保新 +6 位作者 李军 张壮志 马正海 张旭 薛晶 金映红 张文宝 《畜牧兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2015年第7期1215-1223,共9页
细粒棘球绦虫原头蚴(PSC)具有双向发育的特点,本文旨在利用SSH和生物信息学方法筛选原头蚴包囊(CW)和成虫(AW)特异性的基因。将PSC-CW和PSC-AW双相发育差减cDNA文库的差减PCR产物克隆入pGEM-T载体并测序,利用CAP3sequence assembly在线... 细粒棘球绦虫原头蚴(PSC)具有双向发育的特点,本文旨在利用SSH和生物信息学方法筛选原头蚴包囊(CW)和成虫(AW)特异性的基因。将PSC-CW和PSC-AW双相发育差减cDNA文库的差减PCR产物克隆入pGEM-T载体并测序,利用CAP3sequence assembly在线软件、Blast2GO软件与GenBank数据库对测序结果进行分析,筛选原头蚴成囊和成虫特异性的基因,并探讨这些基因的功能。结果显示:对PSC-CW和PSC-AW文库进行扩增,分别得到280和200个阳性克隆,菌落PCR鉴定结果表明,这些克隆均插入200~1 000bp片段。测序结果显示从PSC-CW和PSC-AW SSH文库中分别得到16和10个特异性基因。其中PSC-CW SSH文库中得到4个出现频率较高的基因,其余12个基因仅出现1次,其中5个为未知基因,已知基因分别编码细胞色素C氧化酶Ⅰ、热休克蛋白70和铁蛋白等功能蛋白质。PSC-AW SSH文库中得到10个基因,其中2个出现频率较高基因,8个基因仅出现1次,4个为未知基因,6个已知基因分别编码基质蛋白1、延伸因子1α和脂肪酸结合蛋白等功能蛋白质。本研究筛选获得原头蚴成囊和成虫发育时差异表达的基因,对这些基因的功能进行分析表明,PSC-CW SSH文库中多是与营养和能量转运功能的相关基因,而PSC-AW SSH文库中多为发育与分化相关的基因,这些基因的差异表达可能与原头蚴处于不同的生长环境和发育方向有关,同时也为棘球蚴病免疫诊断、药物筛选和疫苗研制提供候选基因。 展开更多
关键词 细粒棘球绦虫 抑制差减杂交 特异性基因
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同一滴度不同方法转染AAV9-SERCA2a基因对大鼠的有效性和毒副作用评价 被引量：2
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作者 徐晓霞 周祁娜 +6 位作者 姜涛 王红丽 王欢 季萌 王凌鹏 张广伟 侯月梅 《中国实验动物学报》 CAS CSCD 2013年第3期1-6,I0001,I0002,共8页
目的研究同一滴度不同心脏基因转染方法转染携带肌浆网钙ATP酶2a(sarcoplasmic reticulumCa2+ATPase 2a,SERCA2a)基因的9型腺相关病毒(adeno-associated virus serotype 9,AAV9)即AAV9-SERCA2a对SD大鼠心肌的有效性及对机体毒副作用的... 目的研究同一滴度不同心脏基因转染方法转染携带肌浆网钙ATP酶2a(sarcoplasmic reticulumCa2+ATPase 2a,SERCA2a)基因的9型腺相关病毒(adeno-associated virus serotype 9,AAV9)即AAV9-SERCA2a对SD大鼠心肌的有效性及对机体毒副作用的影响。方法体外成功构建AAV9-SERCA2a-EGFP病毒载体系统,90只雄性SD大鼠随机分为尾静脉注射(tail vein injection,TVI)组、心肌注射(intramyocardial injection,IMI)组、心包腔注射(intrapericardial injection,IPI)组,采用相应方法在体分别转染滴度1×1011vg/mL AAV9-SERCA2a-EGFP、AAV9-EGFP、NS各200μL。转染后30 d,荧光显微镜下观察心肝肾组织绿色荧光表达情况,Western blot检测SER-CA2a基因在大鼠各组织的相对表达量,体表12导联心电图检测心律失常发生率,HE染色观察病理学变化,心脏彩色多普勒超声评价心功能,血液生化学指标检测肝肾功能。结果三组左心室可见大量绿色荧光表达,IMI组荧光局限在注射点,三组肝肾组织均可见微弱荧光;三组心肌SERCA2a蛋白相对表达量显著高于肝肾(P<0.01),TVI组和IMI组心肌SERCA2a蛋白相对表达量明显高于IPI组(P<0.01);TVI组和IPI组心电图正常,IMI组2只大鼠发生室性早搏;三组转染AAV9-EGFP、AAV9-SERCA2a-EGFP与转染NS相比,心功能、组织病理学、血液生化学指标差异均无显著性(P>0.05)。结论三种方法转染滴度1×1011vg/mL AAV9-SERCA2a基因,TVI法和IMI法在心肌的有效性优于IPI法,TVI法和IPI法对机体的毒副作用小于IMI法,综合三种方法的有效性和毒副作用评价,TVI法优于IMI法和IPI法。 展开更多
关键词 转基因 肌浆网钙ATP酶2a 9型腺相关病毒 有效性 毒副作用 大鼠 心肌
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免疫与感染细粒棘球绦虫对Beagle犬血液生理生化指标的影响
7
作者 王俊伟 张壮志 +5 位作者 赵莉 石保新 韩涛 叁都哈西 陈世军 张文宝 《动物医学进展》 北大核心 2018年第6期113-116,共4页
分析了Beagle犬免疫细粒棘球绦虫EgM家族的2个重组蛋白(EgM9和EgM123)及人工反复感染原头蚴对其血液生理生化指标造成的影响。结果显示,免疫并未引起血液各项指标出现差异;感染引致极小部分指标出现显著差异,与免疫相比结果同之。提示Eg... 分析了Beagle犬免疫细粒棘球绦虫EgM家族的2个重组蛋白(EgM9和EgM123)及人工反复感染原头蚴对其血液生理生化指标造成的影响。结果显示,免疫并未引起血液各项指标出现差异;感染引致极小部分指标出现显著差异,与免疫相比结果同之。提示EgM蛋白作为候选疫苗是安全的,驱虫药物的反复服用也没有表现出明显的毒副作用,也暗示免疫和反复感染与血液生理生化指标之间未发现确切的统计学关联性,且侧面印证了Beagle犬在封闭饲养环境下已经形成了生长期血液生理生化指标具有相对稳定性的特征。 展开更多
关键词 细粒棘球绦虫 BEAGLE犬 免疫 感染 血液生理生化指标
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四川泸州地区汉族人群食管鳞癌与COMT Vall58Met基因多态性的相关性
8
作者 黄丛改 李孟泽 +5 位作者 汪少华 万宇 王洁琼 汪澍 昝潇 卢晓梅 《实用医学杂志》 CAS 北大核心 2016年第23期3849-3852,共4页
目的:探讨四川泸州地区汉族人群儿茶酚-O-甲基转移酶(COMT)基因Vall58Met单核苷酸多态的分布及与食管鳞癌的关系。方法:检测对象共590例,193例汉族食管鳞癌患者,397例汉族健康人群。以聚合酶链反应-限制性片段长度多态性方法(PCR-RFLP)... 目的:探讨四川泸州地区汉族人群儿茶酚-O-甲基转移酶(COMT)基因Vall58Met单核苷酸多态的分布及与食管鳞癌的关系。方法:检测对象共590例,193例汉族食管鳞癌患者,397例汉族健康人群。以聚合酶链反应-限制性片段长度多态性方法(PCR-RFLP)分析COMT基因G/A(Val/Met)多态性,比较基因型和等位基因频率分布与食管鳞癌发病风险的关系。结果:COMT基因型频率分布依次为GG型90.9%,GA 3.7%,AA 5.4%;等位基因G 92.7%,A 7.3%。四川泸州地区食管鳞癌组与正常对照组COMT Vall58Met基因型及等位基因频率分布差异有统计学意义;非条件Logistic回归分析,病例组和对照组COMT基因型及等位基因频率分布差异有统计学意义;四川泸州地区汉族人群分别与新疆伊犁地区汉、维、哈三民族人群比较,COMT基因型和等位基因频率分布差异均有统计学意义;两地区汉族食管鳞癌组与对照组比较,COMT基因型及等位基因频率分布差异均有统计学意义。结论:COMT Vall58Met基因单核苷酸多态在不同地区不同民族分布有差异,可能是食管鳞癌危险性的遗传标志。 展开更多
关键词 食管鳞癌 COMT基因 基因多态性 四川泸州地区
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