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分泌型磷蛋白1、髓样分化因子88在二乙酰吗啡致心肌细胞凋亡中的作用
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作者 刘静宇 戴晨璐 +8 位作者 季敏 苏丽萍 梁敏 程明 刘轩铭 张琳琳 郜玉洁 陈少帅 蒲红伟 《实用医学杂志》 北大核心 2025年第22期3510-3519,共10页
目的探究分泌型磷蛋白1(SPP1)和髓样分化因子88(MYD88)在二乙酰吗啡(DAM)致心肌凋亡中的作用。方法建立DAM成瘾SD大鼠动物模型,将12只SD大鼠随机分为NS组、DAM组,通过组织病理学检测方法,观察并比较两组大鼠心肌组织的形态学变化特征;通... 目的探究分泌型磷蛋白1(SPP1)和髓样分化因子88(MYD88)在二乙酰吗啡(DAM)致心肌凋亡中的作用。方法建立DAM成瘾SD大鼠动物模型,将12只SD大鼠随机分为NS组、DAM组,通过组织病理学检测方法,观察并比较两组大鼠心肌组织的形态学变化特征;通过TUNEL染色法观察各组心肌凋亡细胞数量;采用免疫组化检测SPP1和MYD88表达变化;RT-qPCR和Western blot检测SPP1、MYD88、Bcl2相关X蛋白(Bax)、B细胞淋巴瘤-2蛋白(Bcl2)、胱天蛋白酶(Caspase)-3、Caspase-9 mRNA和蛋白表达变化,同时Western blot检测活化的Caspase-3(Cleaved Caspase-3)和Cleaved Caspase-9蛋白表达变化;敲低原代SD大鼠乳鼠心肌细胞(NRCMs)SPP1表达,分组为CON组、DA组和shSPP1#3+DA组。采用CCK-8法检测NRCMs细胞活力;流式细胞术检测NRCMs细胞凋亡率。结果成瘾SD大鼠心肌组织HE染色和TUNEL染色显示:与NS组相比,DAM组肌原纤维丝局部出现断裂;凋亡细胞数量明显增加(P<0.05);RT-qPCR和Western blot结果显示:SPP1、MYD88、Bax、Caspase-3和Caspase-9 mRNA和蛋白表达均升高,同时Cleaved Caspase-3和Cleaved Caspase-9的蛋白表达水平增加,相反的是,Bcl2的mRNA和蛋白表达降低,差异均有统计学意义(P<0.05);DAM干预NRCMs后,与CON组相比,DA组的细胞活力明显降低(P<0.05),凋亡率明显升高(P<0.05),RT-q PCR和Western blot结果显示:DA组中SPP1、MYD88、Bax、Caspase-3和Caspase-9的m RNA和蛋白表达均升高(P<0.05),同时Cleaved Caspase-3和Cleaved Caspase-9的蛋白表达水平增加,Bcl2的mRNA和蛋白表达降低(P<0.05),然而shSPP1#3+DA组与DA组相反(P<0.05)。结论SPP1、MYD88在DAM诱导心肌细胞凋亡中发挥重要作用,降低SPP1的表达可降低DAM干预后心肌细胞的凋亡水平。 展开更多
关键词 心肌细胞 凋亡 二乙酰吗啡 分泌型磷蛋白1 髓样分化因子88
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GRP75和VDAC1在海洛因致心律失常中的作用
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作者 管雅玲 苏丽萍 +4 位作者 刘丽 季敏 庄梦婕 朱森森 蒲红伟 《中国医科大学学报》 北大核心 2025年第8期720-726,共7页
目的探讨葡萄糖调节蛋白75(GRP75)和电压依赖性阴离子通道1(VDAC1)在海洛因致心律失常中的作用。方法基于本课题组前期获得的海洛因干预原代心肌细胞转录组数据和基因表达数据库(GEO)下载的GSE31821数据集,利用R语言筛选出共同的差异表... 目的探讨葡萄糖调节蛋白75(GRP75)和电压依赖性阴离子通道1(VDAC1)在海洛因致心律失常中的作用。方法基于本课题组前期获得的海洛因干预原代心肌细胞转录组数据和基因表达数据库(GEO)下载的GSE31821数据集,利用R语言筛选出共同的差异表达基因(DEGs),对DEGs进行富集分析。利用STRING数据库构建蛋白质-蛋白质相互作用(PPI)网络,使用Cytoscape软件筛选关键基因。利用HDOCK软件对关键基因进行分子对接预测,进行体内实验验证。将60只SD大鼠随机分为对照组、模型组、模型+7 d组、模型+14 d组、模型+21 d组,每组12只。构建海洛因成瘾大鼠模型,通过免疫组织化学染色、实时定量PCR检测心肌组织中差异基因的表达水平。结果筛选出51个DEGs,主要富集在横纹肌细胞发育、肌节、肌动蛋白结合过程等功能以及心律失常性右心室心肌病、钙信号通路、凋亡等方面。结合PPI和Cytoscape的结果,筛选出GRP75、VDAC1这2个关键基因。分子对接结果显示,GRP75与VDAC1存在相互作用关系,相互作用力强,能够形成稳定结构。免疫组织化学染色和实时定量PCR结果显示,与对照组相比,模型组大鼠GRP75、VDAC1表达水平显著升高(P<0.05),且随着海洛因干预时间的延长,GRP75、VDAC1的表达呈时间依赖性方式显著升高(P<0.05)。结论GRP75和VDAC1可能参与海洛因致心律失常的过程。 展开更多
关键词 海洛因 心律失常 葡萄糖调节蛋白75 电压依赖性阴离子通道1
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