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皮肤组织工程支架及其材料在创面修复领域中的研究进展 被引量:3
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作者 张思宇 马诗淇 +2 位作者 王梦慈 李晓艺 冯树梅 《协和医学杂志》 CSCD 2023年第3期603-610,共8页
近年来,皮肤组织工程技术为大面积创面修复提供了新的治疗思路。皮肤组织再生主要基于使用合适的组织支架,支架可细分为多孔、纤维、微球、水凝胶、脱细胞等几种类型,而支架材料又分为天然和合成两种,单一材料具有局限性,目前临床大多... 近年来,皮肤组织工程技术为大面积创面修复提供了新的治疗思路。皮肤组织再生主要基于使用合适的组织支架,支架可细分为多孔、纤维、微球、水凝胶、脱细胞等几种类型,而支架材料又分为天然和合成两种,单一材料具有局限性,目前临床大多采用由两种及以上材料构成的复合材料。深入认识当前各种生物材料和支架的性能、优缺点,探索构建性能更佳的生物材料和支架,是未来皮肤组织工程研究的重要方向。本文对不同组织支架及支架材料在皮肤组织工程中的研究进展以及应用价值进行综述,以期为创面修复领域临床应用与研发提供参考。 展开更多
关键词 支架 生物材料 合成 天然 聚合物 皮肤 伤口愈合 组织工程
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建立一种简便的大鼠背根神经节神经元原代培养方法的建立
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作者 郭琼 李甜 +1 位作者 冯树梅 王磊 《神经解剖学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2014年第2期167-172,共6页
目的:建立一种简便易行地获取大鼠背根神经节(dorsal root ganglion,DRG)神经元原代培养的方法。方法:窒息法处死大鼠,打开胸腔经心脏放血后,从背部取出一段脊柱。将脊柱稍加修剪后,从中轴线处打开脊柱,暴露脊髓,在其两侧找到椎间孔内的... 目的:建立一种简便易行地获取大鼠背根神经节(dorsal root ganglion,DRG)神经元原代培养的方法。方法:窒息法处死大鼠,打开胸腔经心脏放血后,从背部取出一段脊柱。将脊柱稍加修剪后,从中轴线处打开脊柱,暴露脊髓,在其两侧找到椎间孔内的为DRG,用器械离断神经纤维,取出DRG。Ⅰ胶原酶联合Trypsin-EDTA先消化DRG,再用吹法DRG以获得单个神经元;用TNB-100 basal Medium的复合培养液在经过0.1 mg/ml PolyD-lysine hydrobromide和0.01 mg/ml lamina包被的培养皿内,于5%CO2,37℃孵箱内培养48 h。免疫组织化学方法检测神经元内标志物BetaⅢTubulin的表达,用Alexa flour 488标记的二抗进行显色,倒置荧光显微镜下观察。结果:获得了单层贴壁的神经元,其胞体形状多样,突起生长良好,细胞之间正在逐步形成网络连接;免疫荧光染色显示,细胞的胞体和突起中均可高表达BetaⅢTubulin,且荧光染色较强。结论:运用该方法可以简便地从大鼠DRG内获得单层贴壁的原代神经元。 展开更多
关键词 背根神经节(DRG) 原代培养 BetaⅢTubulin 大鼠
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miR-125b-5p靶向ΔNp63α对角质形成细胞分化的影响及其机制
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作者 丁毅 李敏 +2 位作者 陈龙 张美林 冯树梅 《解放军医学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2022年第2期128-135,共8页
目的探讨mi R-125b-5p靶向ΔNp63α对角质形成细胞分化的影响及其机制。方法用1.8 mmol/L氯化钙诱导角质形成细胞Ha Ca T,于氯化钙处理0、1、5、7 d,采用q RT-PCR检测mi R-125b-5p、ΔNp63α、细胞角蛋白10(CK10)、外皮蛋白(Inv)、谷氨... 目的探讨mi R-125b-5p靶向ΔNp63α对角质形成细胞分化的影响及其机制。方法用1.8 mmol/L氯化钙诱导角质形成细胞Ha Ca T,于氯化钙处理0、1、5、7 d,采用q RT-PCR检测mi R-125b-5p、ΔNp63α、细胞角蛋白10(CK10)、外皮蛋白(Inv)、谷氨酰胺转移酶1(TG1)、磷脂酰肌醇3-激酶(PI3K)、蛋白激酶B(Akt)和哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(m TOR)的m RNA表达水平。于氯化钙处理0、5 d采用细胞免疫荧光分析ΔNp63α的表达情况。利用bibiserv网站预测mi R-125b-5p与ΔNp63α的结合位点。用mi R-125b-5p模拟物/抑制剂和阴性对照模拟物/抑制剂转染Ha Ca T细胞,培养5 d后,采用q RT-PCR和Western blotting检测ΔNp63α、CK10、Inv、TG1、PI3K、Akt和m TOR的m RNA和蛋白相对表达水平。结果与氯化钙处理0 d时相比,处理1、5、7 d时mi R-125b-5p相对表达水平明显下降(0.17±0.02、0.08±0.01、0.07±0.02 vs.1.00±0.02,P<0.001),而ΔNp63α、CK10、Inv、TG1、PI3K、Akt和m TOR m RNA相对表达水平逐渐升高(P<0.05)。细胞免疫荧光分析结果显示,与氯化钙处理0 d时相比,氯化钙处理5d时角质形成细胞中ΔNp63α阳性细胞率增高(96.9%±0.9%vs.43.2%±8.2%,P<0.001)。bibiserv网站预测结果显示,miR-125b-5p可与ΔNp63α的3?-UTR位点相结合。与阴性对照模拟物组相比,mi R-125b-5p模拟物组ΔNp63α、CK10、Inv、TG1、PI3K、Akt和m TOR m RNA相对表达水平明显降低,且ΔNp63α、CK10、Inv、TG1、PI3K、Akt、p-Akt、m TOR和p-m TOR蛋白表达水平也明显降低(P<0.05),而抑制mi R-125b-5p的表达可逆转上述效应(P<0.05)。结论 miR-125b-5p靶向ΔNp63α可通过下调PI3K/Akt/m TOR信号通路抑制角质形成细胞的分化。 展开更多
关键词 miR-125b-5p ΔNp63α 细胞分化 角质形成细胞
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