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绵羊类胚胎干细胞长期培养中增殖、凋亡、多能性相关基因的表达动力学被引量：3: 1; 作者周川赵云程 +4 位作者林嘉鹏汪立芹张秀华金贤华黄俊成《中国生物化学与分子生物学报》 CAS CSCD 北大核心 2012年第6期574-579,共6页; 已报道的家畜类胚胎干细胞(embryonic stem-like cell,ESC-like)均无法实现长期培养,这制约了家畜ESC的研究.通过检测本实验室建系的绵羊类胚胎干细胞oESC-like,探究导致oESC-like无法持续培养的原因,为以后的研究打下基础.实验观察了oE... 展开更多; 关键词胚胎干细胞绵羊凋亡多能性; 在线阅读下载PDF 职称材料

bFGF培养体系中添加不同因子对绵羊类胚胎干细胞多能性的影响被引量：1: 2; 作者张秀华赵云程 +4 位作者林嘉鹏汪立芹周川石庆华黄俊成《江苏农业学报》 CSCD 北大核心 2012年第4期797-803,共7页; 为筛选出能够维持绵羊类胚胎干细胞(oESC-like)多能性的因子,以oESC-like为材料,在N2B27/CH/bFGF培养体系中,分别加入PD、PD/hLIF、PD/BPM4、PD/hLIF/BMP4,培养细胞8 d,分析绵羊类胚胎干细胞多能性,确定最适培养体系。结果显示:在N2B27/... 展开更多; 关键词绵羊类胚胎干细胞多能性调控因子体外培养候选基因; 在线阅读下载PDF 职称材料

不同电融合参数及融合液对昆明小鼠2-细胞胚胎融合及囊胚率的影响被引量：1: 3; 作者周川赵云程黄俊成《动物医学进展》 CSCD 北大核心 2012年第5期56-59,共4页; 四倍体胚胎在研究哺乳动物配子发生、发育、四倍体的发生、遗传、免疫机制等方面具有重要作用,因此提高融合及发育效率至关重要。为找出适合小鼠2-细胞胚胎融合的最佳方案,试验采用两种融合液0.3mol/L甘露醇溶液和0.3mol/L蔗糖溶液,两... 展开更多; 关键词四倍体胚胎电融合发育; 在线阅读下载PDF 职称材料

bFGF浓度对oESC-like增值、凋亡、多能性相关基因表达的影响: 4; 作者周川赵云程 +4 位作者汪立芹林嘉鹏金贤华张秀华黄俊成《生物学杂志》 CAS CSCD 2012年第5期1-5,共5页; 使用免疫荧光技术检测与增值、凋亡、多能性相关基因的表达水平。提高bFGF浓度可增强PCNA、Oct-4、Sox-2、Bax和Bcl-2的表达,同时使Bcl-2/Bax比值维持较稳定水平。结果表明提高bFGF浓度可增强oESC-like的增值能力和多能性,增强其抗凋亡... 展开更多; 关键词胚胎干细胞绵羊多能性碱性成纤维细胞生长因子; 在线阅读下载PDF 职称材料

添加不同因子对绵羊类胚胎干细胞多能性的影响: 5; 作者张秀华石庆华 +5 位作者赵云程林嘉鹏汪立芹周川金贤华黄俊成《中国草食动物》 CAS 2012年第3期25-29,共5页; 为筛选出更有利于维持绵羊类胚胎干细胞(oESC-like cell)多能性的因子,在基础培养基N2B27/CH中,分别添加PD、PD+hLIF、PD+BPM4、PD+hLIF+BMP4,通过比较分析,初步筛选出了比本实验室原培养体系(N2B27/CH+bFGF)更利于维持oESC-like多能性... 展开更多; 关键词绵羊类胚胎干细胞体外培养多能性调控因子候选基因; 在线阅读下载PDF 职称材料

不同因素对绵羊卵母细胞体外受精效果的影响被引量：5: 6; 作者汪立芹赵云程 +5 位作者陈童陈世彬左北瑶彭夏雨黄俊成郭志勤《中国畜牧兽医》 CAS 北大核心 2010年第8期84-87,共4页; 本试验研究了发情羊血清、不同个体的冷冻精液和新鲜精液、精子密度、受精时颗粒细胞的有无及不同培养液对绵羊体外受精效果的影响。结果表明,发情3d的血清与发情当天的血清相比,对卵裂率和囊胚率有极显著的影响(P<0.01);不同个体的... 展开更多; 关键词绵羊体外受精发情血清卵裂率囊胚率; 在线阅读下载PDF 职称材料

不同因素对北山羊-山羊核移植重构胚融合率的影响被引量：1: 7; 作者杨梅汪立芹 +2 位作者陈童彭夏雨郭志勤《中国畜牧兽医》 CAS 北大核心 2010年第9期158-161,共4页; 作者通过对融合方式、融合场强、体细胞与透明带切口位置及重构后是否修复等条件对北山羊—山羊体细胞核移植重构胚融合率的影响进行了研究。结果表明,不同融合方式能显著影响融合率(67.57%和42.15%,P<0.05);场强在1.3～1.9 kV/cm范... 展开更多; 关键词北山羊山羊核移植融合率; 在线阅读下载PDF 职称材料

影响转基因绵羊胚胎移植受胎率的因素被引量：5: 8; 作者汪立芹陈童 +1 位作者林嘉鹏黄俊成《西北农业学报》 CAS CSCD 北大核心 2012年第9期6-9,共4页; 为了提高并稳定转基因胚胎移植受胎率,对可能影响受胎率的供受体同期化程度、移植胚胎数量、受体处理方式、胚胎发育速度、受体注射黄体酮、供体作受体等6个方面进行研究。结果表明,(1)供受体发情时间差在±12h以内,不影响受胎率(P&... 展开更多; 关键词绵羊转基因胚胎移植受胎率; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名绵羊类胚胎干细胞长期培养中增殖、凋亡、多能性相关基因的表达动力学被引量：3: 1; 作者周川赵云程林嘉鹏汪立芹张秀华金贤华黄俊成; 机构新疆动物生物技术重点开放实验室新疆农业大学农学院; 出处《中国生物化学与分子生物学报》 CAS CSCD 北大核心 2012年第6期574-579,共6页; 基金国家转基因重大专项(No.011ZX08008-003) 新疆维吾尔自治区高新技术研究与发展计划(No.200711104 No.201111113)~~; 文摘已报道的家畜类胚胎干细胞(embryonic stem-like cell,ESC-like)均无法实现长期培养,这制约了家畜ESC的研究.通过检测本实验室建系的绵羊类胚胎干细胞oESC-like,探究导致oESC-like无法持续培养的原因,为以后的研究打下基础.实验观察了oESC-like形态变化,检测了AKP的表达,使用免疫荧光技术检测了PCNA、Bcl-2、Bax、Sox-2、Oct-4蛋白的表达,并用软件Image-Pro Plus6.0计算蛋白表达水平.结果显示,oESC-like在长期培养过程中其形态具备ESC的典型形态特征;AKP持续表达;Sox-2和Oct-4的表达有不同程度的提高,增殖能力无明显变化;Bax表达水平逐代提高,Bcl-2的表达水平在5、10代显著高于Bax的表达水平可抑制Bax的活化,而从15代开始Bcl-2表达水平下降,低于Bax的表达水平,不能有效地抑制Bax的活化;Bcl-2/Bax表达水平的比值逐代下降,说明oESC-like在长期培养过程中逐渐走向凋亡.为解决绵羊类胚胎干细胞能够体外长期培养的科学问题,针对本实验室已有研究成果和存在的问题,进行逆向思维找出突破口,为遗传育种、基因工程、医疗等方面在实践上提供理论基础.; 关键词胚胎干细胞绵羊凋亡多能性; 分类号 Q786 [生物学—分子生物学]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名bFGF培养体系中添加不同因子对绵羊类胚胎干细胞多能性的影响被引量：1: 2; 作者张秀华赵云程林嘉鹏汪立芹周川石庆华黄俊成; 机构新疆动物生物技术重点开放实验室新疆农业大学农学院; 出处《江苏农业学报》 CSCD 北大核心 2012年第4期797-803,共7页; 基金国家转基因重大专项(2011ZX08008-003) 新疆自治区科技计划项目(200711104) 新疆自治区科技计划项目(201111113); 文摘为筛选出能够维持绵羊类胚胎干细胞(oESC-like)多能性的因子,以oESC-like为材料,在N2B27/CH/bFGF培养体系中,分别加入PD、PD/hLIF、PD/BPM4、PD/hLIF/BMP4,培养细胞8 d,分析绵羊类胚胎干细胞多能性,确定最适培养体系。结果显示:在N2B27/CH/bFGF培养体系添加PD或PD/hLIF后,oESC-like细胞生长较好;所有培养液中oESC-like细胞的AKP染色及多能性候选基因Sox2和Oct4免疫荧光蛋白染色结果均呈阳性;添加PD后,多能性候选基因Oct4与Klf4 mRNA的表达量显著高于N2B27/CH/bFGF培养体系中的(P<0.01),Nestin与Lin28的表达量显著降低(P<0.01),Sox2与c-Myc升高但差异不显著。添加PD/hLIF后,Oct4的表达量显著高于N2B27/CH/bFGF培养体系中的(P<0.01),c-Myc、Klf4、Lin28表达量升高但不显著,Nestin和Sox2表达量降低但也不显著。以上结果表明:在oESC-like培养体系中,添加PD或PD/hLIF可能有利于维持绵羊类胚胎干细胞的多能性。; 关键词绵羊类胚胎干细胞多能性调控因子体外培养候选基因; Keywords ovine embryonic stem-like cell pluripotency regulator in virto culture candidate gene; 分类号 S826.3 [农业科学—畜牧学]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名不同电融合参数及融合液对昆明小鼠2-细胞胚胎融合及囊胚率的影响被引量：1: 3; 作者周川赵云程黄俊成; 机构新疆动物生物技术重点开放实验室新疆农业大学农学院; 出处《动物医学进展》 CSCD 北大核心 2012年第5期56-59,共4页; 基金新疆维吾尔自治区高技术研究与发展计划(200711104) 新疆畜牧科学院青年科研基金(2008QJ01); 文摘四倍体胚胎在研究哺乳动物配子发生、发育、四倍体的发生、遗传、免疫机制等方面具有重要作用,因此提高融合及发育效率至关重要。为找出适合小鼠2-细胞胚胎融合的最佳方案,试验采用两种融合液0.3mol/L甘露醇溶液和0.3mol/L蔗糖溶液,两种融合液均采用了120V/mm,20μs×2、100V/mm,40μs×2、80V/mm,80μs×2三种电融合参数。其中采用0.3mol/L甘露醇溶液作为融合液且融合参数采用80V/mm,80μs×2获得了92.5%的融合率和90.6%的囊胚率,是小鼠2-细胞胚胎融合的最佳方案。; 关键词四倍体胚胎电融合发育; Keywords tetraploid embryo electrofusion development; 分类号 Q132 [生物学—普通生物学] Q343.1 [生物学—遗传学]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名bFGF浓度对oESC-like增值、凋亡、多能性相关基因表达的影响: 4; 作者周川赵云程汪立芹林嘉鹏金贤华张秀华黄俊成; 机构新疆动物生物技术重点开放实验室农业部草食家畜繁育生物技术重点开放实验室新疆农业大学农学院; 出处《生物学杂志》 CAS CSCD 2012年第5期1-5,共5页; 基金国家转基因重大专项(2011ZX08008-003) 新疆维吾尔自治区高新技术研究与发展计划(200711104 201111113); 文摘使用免疫荧光技术检测与增值、凋亡、多能性相关基因的表达水平。提高bFGF浓度可增强PCNA、Oct-4、Sox-2、Bax和Bcl-2的表达,同时使Bcl-2/Bax比值维持较稳定水平。结果表明提高bFGF浓度可增强oESC-like的增值能力和多能性,增强其抗凋亡能力以适应长期培养。; 关键词胚胎干细胞绵羊多能性碱性成纤维细胞生长因子; Keywords embryonic stem cell Ovis pluripotency bFGF; 分类号 Q812 [生物学—生物工程]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名添加不同因子对绵羊类胚胎干细胞多能性的影响: 5; 作者张秀华石庆华赵云程林嘉鹏汪立芹周川金贤华黄俊成; 机构新疆农业大学农学院新疆畜牧科学院; 出处《中国草食动物》 CAS 2012年第3期25-29,共5页; 基金新疆维吾尔自治区高技术研究与发展计划(200711104) 新疆维吾尔自治区高技术研究与发展计划(201111113) 国家转基因重大专项(2011ZX08008-003); 文摘为筛选出更有利于维持绵羊类胚胎干细胞(oESC-like cell)多能性的因子,在基础培养基N2B27/CH中,分别添加PD、PD+hLIF、PD+BPM4、PD+hLIF+BMP4,通过比较分析,初步筛选出了比本实验室原培养体系(N2B27/CH+bFGF)更利于维持oESC-like多能性的培养基添加因子。结果显示:基础培养基中添加PD、PD+hLIF后细胞生长较好,细胞之间的结合更加致密;各种培养基培养物都表达AKP与Sox2、Oct4免疫荧光蛋白等oESC-like多能性标志;4种不同培养基与bFGF相比,细胞的生长速度减慢;在基础培养基N2B27/CH中添加PD和PD+hLIF使多能性候选基因Lin28与c-Myc表达量极显著升高(P<0.01),Nestin的表达量极显著下调(P<0.01),加入PD+hLIF使Oct4表达量极显著上调(P<0.01)。因此,在oESC-like基础培养液N2B27/CH的基础上,添加PD或PD+hLIF更有利于oESC-like细胞多能性维持。; 关键词绵羊类胚胎干细胞体外培养多能性调控因子候选基因; Keywords oESC in vitro culture pluripotency regulator; 分类号 S826.3 [农业科学—畜牧学]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名不同因素对绵羊卵母细胞体外受精效果的影响被引量：5: 6; 作者汪立芹赵云程陈童陈世彬左北瑶彭夏雨黄俊成郭志勤; 机构新疆动物生物技术重点开放实验室新疆农业大学动物医学学院南京农业大学动物胚胎工程技术中心石河子大学动物科技学院; 出处《中国畜牧兽医》 CAS 北大核心 2010年第8期84-87,共4页; 基金国家支撑计划(2008BADB2B05-10) 新疆自治区科技攻关(200841122) +1 种基金新疆自治区科技计划项目(200711104); 文摘本试验研究了发情羊血清、不同个体的冷冻精液和新鲜精液、精子密度、受精时颗粒细胞的有无及不同培养液对绵羊体外受精效果的影响。结果表明,发情3d的血清与发情当天的血清相比,对卵裂率和囊胚率有极显著的影响(P<0.01);不同个体的冷冻精子对卵裂率和囊胚率都有显著的影响(P<0.05),但鲜精和冷冻精子的受精效果与个体有关;精子密度在2×106～6×106个/mL之间对受精效果没有影响(P>0.05);颗粒细胞对受精的作用不明显(P>0.05);不同的培养液对受精效果没有显著影响(P>0.05)。因此,选用好的公羊个体精子,用发情3d的发情羊血清能显著提高受精效果。; 关键词绵羊体外受精发情血清卵裂率囊胚率; Keywords sheep IVF heat serum cleavage rate blastocyst rate; 分类号 S823.34 [农业科学—畜牧学]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名不同因素对北山羊-山羊核移植重构胚融合率的影响被引量：1: 7; 作者杨梅汪立芹陈童彭夏雨郭志勤; 机构新疆动物生物技术重点开放实验室石河子大学动物科技学院大连金州区动物卫生监督管理局; 出处《中国畜牧兽医》 CAS 北大核心 2010年第9期158-161,共4页; 基金新疆维吾尔自治区科技攻关计划(200631109) 国家支撑计划(2008BADB2B05); 文摘作者通过对融合方式、融合场强、体细胞与透明带切口位置及重构后是否修复等条件对北山羊—山羊体细胞核移植重构胚融合率的影响进行了研究。结果表明,不同融合方式能显著影响融合率(67.57%和42.15%,P<0.05);场强在1.3～1.9 kV/cm范围内对融合率和死亡率都没有影响;体细胞在透明带的切口处对融合率影响不显著,但融合过程中死亡率高于对照组(8.25%和2.3%,P>0.05);重构后立即融合与修复2 h后再融合对融合率没有影响(67.29%和68.33%,P>0.05)。; 关键词北山羊山羊核移植融合率; Keywords Capra ibex goat nuclear transfer fusion rate; 分类号 S816.32 [农业科学—饲料科学]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名影响转基因绵羊胚胎移植受胎率的因素被引量：5: 8; 作者汪立芹陈童林嘉鹏黄俊成; 机构新疆动物生物技术重点开放实验室; 出处《西北农业学报》 CAS CSCD 北大核心 2012年第9期6-9,共4页; 基金国家转基因重大专项(2011ZX08008-003) 自治区科技计划项目(201111113); 文摘为了提高并稳定转基因胚胎移植受胎率,对可能影响受胎率的供受体同期化程度、移植胚胎数量、受体处理方式、胚胎发育速度、受体注射黄体酮、供体作受体等6个方面进行研究。结果表明,(1)供受体发情时间差在±12h以内,不影响受胎率(P>0.05);(2)每只受体移植2～3枚转基因胚胎的受胎率极显著高于移植1枚的受胎率(P<0.01);(3)在繁殖季节里,受体采用自然发情、肌肉注射PGF2α、肌肉注射PMSG+PGF2α等方式,三者受胎率间差异不显著(P>0.05);(4)发育迟缓的胚胎移植后,受胎率显著低于正常发育胚胎的受胎率(P<0.01);(5)移植后的受体注射2mg黄体酮,不能提高受胎率(P>0.05);(6)供体当作受体使用,不影响受胎率(P>0.05)。; 关键词绵羊转基因胚胎移植受胎率; Keywords Sheep Transgenic Embryo transfer Pregnancy rate; 分类号 S826 [农业科学—畜牧学]; 在线阅读下载PDF 职称材料

	题名	作者	出处	发文年	被引量	操作
1	绵羊类胚胎干细胞长期培养中增殖、凋亡、多能性相关基因的表达动力学	周川赵云程林嘉鹏汪立芹张秀华金贤华黄俊成	《中国生物化学与分子生物学报》 CAS CSCD 北大核心	2012	3	在线阅读下载PDF 职称材料
2	bFGF培养体系中添加不同因子对绵羊类胚胎干细胞多能性的影响	张秀华赵云程林嘉鹏汪立芹周川石庆华黄俊成	《江苏农业学报》 CSCD 北大核心	2012	1	在线阅读下载PDF 职称材料
3	不同电融合参数及融合液对昆明小鼠2-细胞胚胎融合及囊胚率的影响	周川赵云程黄俊成	《动物医学进展》 CSCD 北大核心	2012	1	在线阅读下载PDF 职称材料
4	bFGF浓度对oESC-like增值、凋亡、多能性相关基因表达的影响	周川赵云程汪立芹林嘉鹏金贤华张秀华黄俊成	《生物学杂志》 CAS CSCD	2012	0	在线阅读下载PDF 职称材料
5	添加不同因子对绵羊类胚胎干细胞多能性的影响	张秀华石庆华赵云程林嘉鹏汪立芹周川金贤华黄俊成	《中国草食动物》 CAS	2012	0	在线阅读下载PDF 职称材料
6	不同因素对绵羊卵母细胞体外受精效果的影响	汪立芹赵云程陈童陈世彬左北瑶彭夏雨黄俊成郭志勤	《中国畜牧兽医》 CAS 北大核心	2010	5	在线阅读下载PDF 职称材料
7	不同因素对北山羊-山羊核移植重构胚融合率的影响	杨梅汪立芹陈童彭夏雨郭志勤	《中国畜牧兽医》 CAS 北大核心	2010	1	在线阅读下载PDF 职称材料
8	影响转基因绵羊胚胎移植受胎率的因素	汪立芹陈童林嘉鹏黄俊成	《西北农业学报》 CAS CSCD 北大核心	2012	5	在线阅读下载PDF 职称材料