绵羊季节性发情性状核心基因和关键lncRNA的筛选与分析

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作者 杨杨 李良远 +6 位作者 万鹏程 卢守亮 刘长彬 杨华 王立民 代蓉 周平 《畜牧兽医学报》 北大核心 2025年第3期1264-1277,共14页

旨在筛选与季节性发情相关的核心基因和长链非编码RNA(long non-coding RNA,lncRNA)。本研究选取2~3岁空怀的中国美利奴羊和湖羊母羊(乏情期、发情期和发情间期各3只),采集卵巢组织样本,采用RNA-seq技术筛选差异表达的基因(differential... 旨在筛选与季节性发情相关的核心基因和长链非编码RNA(long non-coding RNA,lncRNA)。本研究选取2~3岁空怀的中国美利奴羊和湖羊母羊(乏情期、发情期和发情间期各3只),采集卵巢组织样本,采用RNA-seq技术筛选差异表达的基因(differentially expressed genes,DEGs)和lncRNAs,并通过GO、KEGG富集分析、PPI分析及ceRNA网络构建鉴定与繁殖性能相关的核心基因和lncRNAs。结果,构建了6个不同生理状态下的RNA文库,筛选得到1495个差异表达基因(differentially expressed genes,DEGs)和454个差异表达lncRNAs,其中共性DEGs和lncRNAs分别为313个和435个,特有DEGs和lncRNAs分别为1182个和19个。GO和KEGG富集分析显示,共性DEGs在细胞分裂和细胞周期等方面显著富集,而差异表达的lncRNAs靶基因富集于细胞内信号转导及负调控RNA聚合酶II启动子转录等。特有DEGs在细胞迁移的正向调节中富集,lncRNAs的靶基因集中于细胞间粘附和整合素介导的信号通路等。通过PPI筛选出19个核心基因,主要富集在卵母细胞减数分裂和细胞周期信号通路。聚类分析结果显示,核心基因在乏情期表达量较高。ceRNA网络进一步揭示基因在细胞周期等信号通路的富集。RT-qPCR验证结果与高通量测序一致。筛选出19个核心基因和28个lncRNAs,并发现42个lncRNA-miRNA-mRNA靶向关系,为理解绵羊季节性繁殖的分子机制提供了潜在调控靶点。 展开更多

关键词 绵羊 季节性发情 RNA-SEQ 核心基因 lncRNA

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绵羊脂肪沉积的分子机制研究

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作者 杨鹏 蒙亚琦 徐梦思 《现代畜牧科技》 2025年第2期70-74,共5页

绵羊脂肪可广泛应用于人类日常生活中,如饮食、化妆品、工业原料等。因此了解绵羊脂肪沉积的分子机制至关重要。由于绵羊生长到一定阶段后会加剧皮下脂肪和内脏脂肪的沉积,导致其饲料转化率下降,为避免经济效益低廉的皮下脂肪和内脏脂... 绵羊脂肪可广泛应用于人类日常生活中,如饮食、化妆品、工业原料等。因此了解绵羊脂肪沉积的分子机制至关重要。由于绵羊生长到一定阶段后会加剧皮下脂肪和内脏脂肪的沉积,导致其饲料转化率下降,为避免经济效益低廉的皮下脂肪和内脏脂肪的沉积,增加提升绵羊养殖产业生产价值的肌内脂肪的沉积,该文分析品种、性别、营养水平、不同部位对绵羊脂肪沉积调控机制的影响作用,对于在绵羊脂肪沉积中发挥关键调控作用的非编码RNA及KEGG信号通路的研究进展进行阐述,以期为解析绵羊脂肪沉积的遗传机制提供理论依据。 展开更多

关键词 脂肪沉积 非编码RNA 信号通路

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绵羊支原体肺炎病原巢式PCR检测方法的建立与应用 被引量：1

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作者 杨华 周华倩 +5 位作者 黄新 齐宇 余乾 张文喆 杨永林 侯扶琴 《安徽农业科学》 CAS 2024年第4期74-77,共4页

[目的]建立一种诊断绵羊支原体肺炎病原的巢式PCR方法,确定肺炎支原体感染的靶器官。[方法]根据GenBank网站上登录的绵羊支原体16S rRNA基因序列,设计并合成2对引物,以肺炎支原体菌株基因组DNA为模板,经过PCR反应条件的优化,通过测序验... [目的]建立一种诊断绵羊支原体肺炎病原的巢式PCR方法,确定肺炎支原体感染的靶器官。[方法]根据GenBank网站上登录的绵羊支原体16S rRNA基因序列,设计并合成2对引物,以肺炎支原体菌株基因组DNA为模板,经过PCR反应条件的优化,通过测序验证扩增产物的正确性,建立了绵羊支原体肺炎病原的巢式PCR检测方法,进而应用建立的方法完成临床阳性病料肺脏、肺淋巴、心脏、肾脏、肝脏、脾脏、皮肤、小肠和外周血检测以及疑似样本肺脏组织的检测。[结果]建立的巢式PCR方法可扩增出864 bp的特异性目的片段,肺脏和肺淋巴为绵羊肺炎支原体感染的靶器官,临床样本巢式PCR检出率与支原体培养鉴定结果的符合率为100%。[结论]建立的绵羊支原体肺炎病原巢式PCR检测方法可用于临床样本的实验室诊断。 展开更多

关键词 绵羊肺炎支原体 巢式PCR 检测方法

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绵羊MYL基因家族的鉴定与组织表达分析 被引量：1

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作者 杨杨 余乾 +6 位作者 刘昱成 杨华 赵卓 王立民 周平 杨庆勇 代蓉 《畜牧兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2024年第4期1551-1564,共14页

为了解肌球蛋白轻链(myosin light chain,MYL)基因家族在绵羊中的分子进化关系及表达变化,本研究利用生物信息学方法对绵羊MYL基因家族进行鉴定和系统分析。各选取了3只军垦白肉羊、新疆细毛羊和湖羊成年公羊各组织样品,采用qRT-PCR方... 为了解肌球蛋白轻链(myosin light chain,MYL)基因家族在绵羊中的分子进化关系及表达变化,本研究利用生物信息学方法对绵羊MYL基因家族进行鉴定和系统分析。各选取了3只军垦白肉羊、新疆细毛羊和湖羊成年公羊各组织样品,采用qRT-PCR方法验证家族成员MYL1、MYL6B和MYLPF基因的表达情况。结果显示,12个MYL基因分布在9条染色体上,编码由147~211氨基酸组成的亲水性蛋白质,无信号肽和跨膜结构域,二级结构以α-螺旋为主。根据基因结构、保守结构域和基序分布等特征,可以将这些基因家族成员分为3个组。共线性分析结果表明,MYL2和MYL10、MYL2和MYLPF存在片段复制,且这些片段受到较强的选择压力。蛋白互作网络显示MYH10与绵羊MYL家族成员均存在互作关系。MYLs的组织表达模式差异较大,其中MYL1、MYL2、MYL6B和MYLPF在骨骼肌组织中高水平表达。基因克隆测序结果显示,扩增得到目的基因的CDS全长,qRT-PCR结果表明,MYL1、MYL6B和MYLPF在军垦白肉羊肌肉组织中的表达水平显著高于其他组织(P<0.0001),并且在军垦白肉羊骨骼肌中的表达水平显著高于湖羊和细毛羊(P<0.0001)。以上结果为深入研究绵羊MYL基因家族的功能以及优化绵羊肉用性能提供了线索。 展开更多

关键词 绵羊 MYL 基因家族 生物信息学分析 基因表达

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绵羊骨形态发生蛋白受体-1B基因研究进展 被引量：1

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作者 杨初蕾 李星瑶 +4 位作者 张译元 唐红 郭延华 王立民 周平 《中国畜牧兽医》 CAS CSCD 北大核心 2024年第2期649-658,共10页

绵羊繁殖性能在绵羊产业中有着重要意义,除通过一些技术手段(如同期发情、人工授精、超数排卵等)之外,在目前已知的关于能够提高绵羊繁殖力的16个基因共20个突变体当中,以骨形态发生蛋白受体-1B(bone morphogenetic protein receptor ty... 绵羊繁殖性能在绵羊产业中有着重要意义,除通过一些技术手段(如同期发情、人工授精、超数排卵等)之外,在目前已知的关于能够提高绵羊繁殖力的16个基因共20个突变体当中,以骨形态发生蛋白受体-1B(bone morphogenetic protein receptor type-1B,BMPR-1B)基因对绵羊繁殖力的影响最大。BMPR-1B基因是世界上第一个被发现的多羔主效基因,其编码区的A746G突变导致蛋白质序列中第249位的谷氨酰胺被置换为精氨酸(Q249R),最终能够引起绵羊排卵数和产羔数增加。作者介绍了绵羊多羔主效基因BMPR-1B及其突变体FecB(A746G)的发现与结构,简述了该基因分子方面的作用机理,对BMP/Smad信号通路的调控以及与绵羊繁殖之间的联系,并简单分析了FecB突变后对绵羊卵巢、卵泡等组织细胞功能,激素调节和相关基因表达的影响。进一步加深对BMPR-1B基因的了解,为研究人员探明该基因诱使绵羊等动物提高产羔数的调控机制,相关配体、调控因子和上下游信号蛋白的影响以及加快哺乳动物高效育种繁殖、扩大种群规模和多胎品系的建立,增加养殖人员的经济收入等提供一些参考和帮助。 展开更多

关键词 骨形态发生蛋白受体-1B(BMPR-1B) FECB 绵羊

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绵羊GSTA2基因克隆、生物信息学分析及真核表达载体构建 被引量：1

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作者 邱丽霞 林秀 +4 位作者 曹忻 杨华 杨永林 余乾 张文喆 《中国草食动物科学》 CAS 北大核心 2024年第2期1-9,共9页

为阐明绵羊谷胱甘肽S转移酶α2(Glutathione S-transferase alpha 2,GSTA2)基因功能,利用牛GSTA2基因序列设计引物,提取绵羊皮肤组织总RNA,应用RT-PCR、基因克隆、生物信息学对GSTA2基因进行研究,构建真核表达载体,转染绵羊皮肤成纤维细... 为阐明绵羊谷胱甘肽S转移酶α2(Glutathione S-transferase alpha 2,GSTA2)基因功能,利用牛GSTA2基因序列设计引物,提取绵羊皮肤组织总RNA,应用RT-PCR、基因克隆、生物信息学对GSTA2基因进行研究,构建真核表达载体,转染绵羊皮肤成纤维细胞,应用qPCR技术检测GSTA2基因的表达。结果表明,克隆到绵羊GSTA2基因672 bp编码区序列(GenBank登录号:OR440604.1),编码223个氨基酸,分子量为25.39 ku。氨基酸比对和系统进化树分析表明,绵羊与牛的GSTA2相似度最高,达87.39%。GSTA2的二级结构以α-螺旋和无规则卷曲为主。构建的真核表达载体pcDNA3.1-GSTA2转染绵羊皮肤成纤维细胞后,GSTA2基因表达量极显著上调(P <0.001)。说明成功克隆了绵羊新基因GSTA2的CDS序列,并成功构建了其真核表达载体。 展开更多

关键词 绵羊 GSTA2基因 克隆 生物信息学 真核表达载体

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多胎绵羊两年三产高频繁殖技术优化试验 被引量：1

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作者 樊文华 李国保 +8 位作者 杨华 倪建宏 周华倩 杨永林 余乾 张文喆 赵宗胜 闫佳许 王政力 《黑龙江动物繁殖》 2024年第3期8-12,共5页

为建立多胎绵羊两年三产高频繁殖技术,以404只多胎萨福克经产母羊为研究对象,通过CIDR+PMSG法同期发情、人工输精、B超早期妊娠诊断施行两年三产,比较分析子宫颈口输精和腹腔内窥镜输精母羊的妊娠率,优化操作流程,分析经济效益。结果表... 为建立多胎绵羊两年三产高频繁殖技术,以404只多胎萨福克经产母羊为研究对象,通过CIDR+PMSG法同期发情、人工输精、B超早期妊娠诊断施行两年三产,比较分析子宫颈口输精和腹腔内窥镜输精母羊的妊娠率,优化操作流程,分析经济效益。结果表明:采用CIDR+PMSG法实施同情发情母羊的发情率为95%,腹腔内窥镜输精母羊的妊娠率为87%,子宫颈口输精母羊的妊娠率为80%,腹腔内窥镜输精优于子宫颈口输精。两年三产高频繁殖技术母羊的产羔率为318%,比一年一产(212%)提高106%;同期发情及子宫颈口输精处理的成本40元/只,只均经济效益334.04元。说明两年三产高频繁殖技术可进一步提高多胎绵羊的繁殖效率,增加养殖效益。 展开更多

关键词 绵羊 两年三产 高频繁殖技术 产羔率 经济效益

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基于适配体-金属有机框架模拟酶比色检测牛妊娠相关糖蛋白9

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作者 卢春霞 刘长彬 +3 位作者 张振良 卢守亮 倪建宏 王超丽 《化学研究与应用》 北大核心 2025年第2期335-343,共9页

本研究以金属有机框架Fe-MIL-101作为过氧化物模拟酶,bPAG9适配体为识别探针,基于间接竞争原理建立了一种比色检测bPAG9方法。在方法建立过程中,将互补于适配体的生物素-cDNA固定在微孔板上,加入适配体功能化Fe-MIL-101,适配体与互补链c... 本研究以金属有机框架Fe-MIL-101作为过氧化物模拟酶,bPAG9适配体为识别探针,基于间接竞争原理建立了一种比色检测bPAG9方法。在方法建立过程中,将互补于适配体的生物素-cDNA固定在微孔板上,加入适配体功能化Fe-MIL-101,适配体与互补链cDNA杂交,当测试样品中含有bPAG9时,适配体与bPAG9结合后从互补链上脱落,然后Fe-MIL-101催化无色过氧化物酶底物产生比色输出信号,通过比色信号的变化实现对bPAG9的定性和定量分析。在优化条件下,bPAG9在缓冲液中线性检测范围为1~100 ng·mL^(-1)(R>0.996),检出限为0.25 ng·mL^(-1)。bPAG9在空白血清中加标回收率为85.2%~102.4%,相对标准偏差小于10%。将本方法应用人工受精28d的奶牛血清检测,妊娠诊断结果显示,本方法诊断敏感性、特异性和准确率分别为91.6%、92.1%和91.8%。本方法具有无创、简便、准确性高等特点,具有良好的应用前景。 展开更多

关键词 妊娠相关糖蛋白 适配体 金属有机框架 早期妊娠诊断 奶牛

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新疆食源性单增李斯特菌MLST分型及耐药性分析 被引量：9

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作者 康立超 钱晶 +6 位作者 杜冬冬 王国红 刘玉霞 殷月兰 黄新 张星星 罗瑞峰 《食品安全质量检测学报》 CAS 北大核心 2021年第15期6255-6261,共7页

目的研究新疆食源性单增李斯特菌分型和耐药情况。方法将62株食源性和1株羔羊脑炎分离株进行多位点序列分型(multilocus sequence typing,MLST)及耐药性实验。结果 63株单增李斯特菌分为20个ST型, 16个克隆群(clonal complex groups, C... 目的研究新疆食源性单增李斯特菌分型和耐药情况。方法将62株食源性和1株羔羊脑炎分离株进行多位点序列分型(multilocus sequence typing,MLST)及耐药性实验。结果 63株单增李斯特菌分为20个ST型, 16个克隆群(clonal complex groups, CC),其中68.25%(43/63)属于谱系Ⅱ,其余属于谱系Ⅰ。优势ST型是ST8、ST9、ST121、ST87和ST378,优势CC群是CC8、CC9、CC1和CC121。对苄青霉素(penicillin, P)、氨苄西林(ampicillin, AM)、苯唑西林(oxacillin, OX1) 3种抗生素耐药率达100%;对庆大霉素(gentamicin, GM)、莫西沙星(moxifloxacin,MXF)、红霉素(erythromycin,E)、奎奴普丁/达福普丁(quinupristin,QDA)、利奈唑胺(linezolid, LNZ)、万古霉素(vancomycin, VA)、替加环素(tigecycline, TGC)、利福平(rifampin, RA)和诱导性克林霉素耐性(induced clindamycin resistance, ICR) 9种抗生素敏感率达100%;对呋喃妥因(furadantin, FT)耐药率61.90%(39/63),其中ST7、ST8、ST101、ST155和ST515对此次的3-4类药物表现出多重耐药性。结论新疆单增李斯特菌分子型别呈多样性,耐药谱变宽,存在较大的食品安全风险。 展开更多

关键词 新疆 单增李斯特菌 多位点序列分型 耐药性

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前列腺素D_(2)与F_(2α)对绵羊黄体退化的影响及其机理研究 被引量：2

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作者 杨恒 邵焱焱 +7 位作者 赵宗胜 朱梦婷 南颖 王明远 方晨辉 吴培 谢梦婷 江白慧 《畜牧兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2021年第6期1582-1593,共12页

旨在研究前列腺素(prostaglandins,PGs)D_(2)与F_( 2α)对绵羊黄体(corpus luteum,CL)组织形态、生殖激素及其关键基因与受体表达的影响,并解析其在黄体退化中的相互关系及机理,为保证母畜连续性繁育提供新的理论依据。将16只哈萨克绵... 旨在研究前列腺素(prostaglandins,PGs)D_(2)与F_( 2α)对绵羊黄体(corpus luteum,CL)组织形态、生殖激素及其关键基因与受体表达的影响,并解析其在黄体退化中的相互关系及机理,为保证母畜连续性繁育提供新的理论依据。将16只哈萨克绵羊随机分成4组,在发情周期的黄体期分别子宫肌内注射PGD_(2)、PGF_( 2α)、PGD_(2)+PGF_( 2α)及等量生理盐水(对照组),采用HE染色结合物理拍照对比处理前后黄体组织形态变化,ELISA法检测外周血清中P 4、E 2、PGD_(2)和PGF_( 2α)浓度变化;并利用qRT-PCR和Western blot检测关键合成酶基因HPGDS、PGFS及其受体DP1、CRTH2、FP的mRNA和蛋白表达水平。结果显示,与对照组相比,发现PGD_(2)+PGF_( 2α)组中黄体退化效果最明显,随后依次是PGF_( 2α)组明显大于PGD_(2)组。ELISA结果显示,随着处理后时间的推移,不同试验处理组中,P 4浓度均呈显著下降趋势(P<0.05),其中在PGD_(2)+PGF_( 2α)组中该变化趋势最显著(P<0.05);但E 2、PGD_(2)和PGF_(_( 2α))浓度均呈现不同差异性变化,其中,PGD_(2)+PGF_( 2α)组中PGD_(2)和PGF_( 2α)浓度呈显著下降(P<0.05),PGF_( 2α)组中E 2浓度呈显著升高(P<0.05)、PGD_(2)浓度呈显著下降(P<0.05),PGD_(2)组中E 2浓度呈显著下降趋势(P<0.05)、PGD_(2)浓度呈显著升高趋势(P<0.05)。qRT-PCR和Western blot结果显示,与对照组相比,PGD_(2)+PGF_( 2α)组中HPGDS mRNA和蛋白表达量显著下调(P<0.05),PGFS、CRTH2及FP mRNA和蛋白表达量显著上调(P<0.05);PGF_( 2α)组中HPGDS mRNA和蛋白表达量呈显著下调(P<0.05),其它基因mRNA和蛋白表达量呈显著上调(P<0.05);PGD_(2)组中HPGDS、DP1、PGFS及FP mRNA和蛋白表达量呈显著上调(P<0.05)。同时,在不同受体基因表达量检测时,发现PGD_(2)组中DP1受体表达量显著高于CRTH2受体(P<0.05),而PGF_( 2α)组中CRTH2表达量则显著高于DP1(P<0.05)。综上,PGD_(2)无论单独使用还是结合PGF_( 2α)使用,均能够促进CL的退化,尤其是二者结合时有明显的协同促溶效应,其作用机制可能与其体内激素水平、关键合成酶及受体类型的表达有关,这为全面认识哺乳动物CL退化的调控机制奠定了基础,也为进一步优化高效繁殖技术(尤其是PGs方案)提供了新的思路。 展开更多

关键词 绵羊 黄体退化 PGD_(2) PGF_(2α)

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新疆阿勒泰垦区规模化羊群弓形虫病血清流行病学调查 被引量：2

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作者 李伟 侯小林 +6 位作者 王正荣 韩猛立 黄佐兴 蒲新竹 李守江 张宾 黄新 《中国动物检疫》 CAS 2018年第3期20-24,共5页

为摸清新疆阿勒泰垦区兵团第十师北屯市规模化羊群的弓形虫感染情况,采用间接血凝试验(IHA),对采集自第十师所属7个团场的890份羊血清进行了弓形虫血清抗体检测。结果显示:该地区规模化羊群的弓形虫血清抗体平均阳性率为6.18%(55/890);... 为摸清新疆阿勒泰垦区兵团第十师北屯市规模化羊群的弓形虫感染情况,采用间接血凝试验(IHA),对采集自第十师所属7个团场的890份羊血清进行了弓形虫血清抗体检测。结果显示:该地区规模化羊群的弓形虫血清抗体平均阳性率为6.18%(55/890);不同羊群均有感染,表明感染分布广泛;母羊群感染率较高,为9.36%;羊群感染率随羊年龄增加而升高。这些情况需引起足够重视。 展开更多

关键词 羊 弓形虫 血清流行病学

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新疆生产建设兵团第十师羊小反刍兽疫抗体监测与评价 被引量：3

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作者 李军 黄佐兴 +5 位作者 李伟 侯小林 黄新 张宾 韩猛立 吴桐忠 《草食家畜》 2021年第2期31-36,共6页

为了评估新疆生产建设兵团第十师北屯市(以下简称师市)羊群小反刍兽疫强制免疫效果,应用酶联免疫吸附试验(ELISA)对2017-2020年全师8个农牧团场采集的4 010份血清进行小反刍兽疫抗体检测,并按单位、年份、类别对检测结果进行了统计分析... 为了评估新疆生产建设兵团第十师北屯市(以下简称师市)羊群小反刍兽疫强制免疫效果,应用酶联免疫吸附试验(ELISA)对2017-2020年全师8个农牧团场采集的4 010份血清进行小反刍兽疫抗体检测,并按单位、年份、类别对检测结果进行了统计分析。结果表明,2018-2020年全师8个农牧团场小反刍兽疫血清抗体平均合格率为84.69%(3 396/4 010),均符合国家农业农村部相关规定,高于平均值的三家单位是E 87.22%(157/180)、G 86.45%(268/310)、H 88.67%(798/900),合格率最低的是D 76.11%(137/180);养殖合作社的抗体合格率为84.81%(1 340/1 580),养殖大户为84.65%(2 057/2 430)均接近于平均合格率,两者差异不显著(P>0.05)。总体来看,师市羊群小反刍兽疫免疫效果较好,为确保师市辖区内重大动物疫病免疫无疫提供技术保障。 展开更多

关键词 羊 小反刍兽疫 抗体监测

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FecB 基因在绵羊繁殖性能上的研究进展 被引量：11

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作者 杨初蕾 张译元 +4 位作者 唐红 郭延华 任秀美奥 王立民 周平 《畜牧兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2023年第4期1370-1380,共11页

绵羊的繁殖性能是一种十分重要的经济性状,绵羊产羔数与每次的排卵数直接相关,绵羊卵子的生长发育受到卵巢内分泌及旁分泌的相互作用。FecB基因是羊上首个被发现的多胎主效基因,携带该基因的绵羊卵巢中BMP信号通路受到损害而活性降低,T... 绵羊的繁殖性能是一种十分重要的经济性状,绵羊产羔数与每次的排卵数直接相关,绵羊卵子的生长发育受到卵巢内分泌及旁分泌的相互作用。FecB基因是羊上首个被发现的多胎主效基因,携带该基因的绵羊卵巢中BMP信号通路受到损害而活性降低,TGF-β家族部分成员失活,抑制GCs增殖并提高FSH的敏感性,有效提高绵羊的排卵率和产羔率,有利于扩大养殖规模,提高经济效益。本文对FecB基因的发现、作用机制及其对卵泡发育、繁殖能力和后代生长发育的影响,以及育种方面的应用进行综述,以期为绵羊繁殖性能提升的机理研究和育种工作等提供参考和借鉴。 展开更多

关键词 绵羊 FECB 繁殖性能

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新疆某地区3个牧场布鲁氏菌病流行状况调查及分析 被引量：10

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作者 杨琴 邓肖玉 +5 位作者 张欢 易继海 王勇 张倩 王震 陈创夫 《动物医学进展》 北大核心 2021年第8期126-131,共6页

为调查新疆某地区牛、羊布鲁氏菌感染情况,收集该地区3个牧场共3223份样本,其中牛血液样本1404份、羊血液样本1590份、牛流产胎儿样本66份、羊流产胎儿样本75份、牛生鲜乳样本65份及羊生鲜乳样本23份。血液样本经血清分离后进行虎红平... 为调查新疆某地区牛、羊布鲁氏菌感染情况,收集该地区3个牧场共3223份样本,其中牛血液样本1404份、羊血液样本1590份、牛流产胎儿样本66份、羊流产胎儿样本75份、牛生鲜乳样本65份及羊生鲜乳样本23份。血液样本经血清分离后进行虎红平板凝集试验(RBPT),流产胎儿样本的部分脏器及生鲜乳样经DNA提取后进行聚合酶链反应(PCR).将PCR结果为阳性的样本进一步进行PCR扩增及系统进化树分析。RBPT结果显示,3个牧场RBPT平均阳性率为牛6.8%,羊9.5%;其中牧场A阳性率为牛7.1%,羊9.1%;牧场B阳性率为牛11.7%,羊10.8%;牧场C阳性率为牛4.2%,羊9.1%。经PCR共鉴定出54份布鲁氏菌阳性样本,其中包括牛流产胎儿22份、羊流产胎儿30份、羊生鲜乳1份及牛生鲜乳1份,其余均为阴性。从上述PCR阳性样本中共鉴定出38份为羊种布鲁氏菌,其中包括牛流产胎儿16份、羊流产胎儿20份、牛生鲜乳1份及羊生鲜乳1份。系统进化树分析表明,鉴定出的羊种布鲁氏菌与内蒙古地区、挪威及印度等国分离的羊种布鲁氏菌生物3型菌株亲缘关系非常接近。综上所述,羊种布鲁氏菌是引起该地区牛、羊布鲁氏菌病的主要病原菌。研究结果为新疆地区控制和预防布鲁氏菌的感染提供了流行病学依据。 展开更多

关键词 布鲁氏菌病 牛 羊 调查

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新疆食源性单增李斯特菌监测及血清型分析 被引量：7

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作者 钱晶 杜冬冬 +6 位作者 刘玉霞 殷月兰 王国红 罗瑞峰 黄新 张星星 康立超 《食品安全质量检测学报》 CAS 2020年第20期7391-7396,共6页

目的了解新疆食品中单增李斯特菌的污染状况,为食源性疾病的监测提供科学依据。方法按照GB4789.30-2016《食品安全国家标准食品微生物学检验单核细胞增生李斯特氏菌检验》,共监测分析了2013~2019年的3329份样品。结果在3329份样品中共检... 目的了解新疆食品中单增李斯特菌的污染状况,为食源性疾病的监测提供科学依据。方法按照GB4789.30-2016《食品安全国家标准食品微生物学检验单核细胞增生李斯特氏菌检验》,共监测分析了2013~2019年的3329份样品。结果在3329份样品中共检出59份单增李斯特菌阳性样品,检出率为1.77%;共分离得到63株单增李斯特菌,分为4个血清型(1/2a、1/2b、1/2c和4b),优势血清型为1/2a,占57.14%(36株)。食品中存在不同血清型混合污染。在即食食品中监测到4b型。结论新疆食品中存在单增李斯特菌的污染,卫生监督部门尤其要加强肉制品和即食食品的监管力度。 展开更多

关键词 新疆 食源性致病菌 单增李斯特菌 血清型

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miR-449b对绵羊早期胚胎发育的影响 被引量：2

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作者 任秀美奥 姚旭东 +6 位作者 蒙亚琦 郭延华 唐红 张译元 赵兴旺 王立民 周平 《中国畜牧兽医》 CAS 北大核心 2022年第7期2661-2668,共8页

【目的】研究miR-449b对绵羊早期胚胎发育的影响。【方法】采用Percoll密度梯度离心法获得纯化绵羊精子,将绵羊卵丘-卵母细胞复合体(COCs)在培养箱中培养16~18 h获得成熟卵母细胞,从1月龄纯种萨福克绵羊耳组织分离成纤维细胞,通过实时... 【目的】研究miR-449b对绵羊早期胚胎发育的影响。【方法】采用Percoll密度梯度离心法获得纯化绵羊精子,将绵羊卵丘-卵母细胞复合体(COCs)在培养箱中培养16~18 h获得成熟卵母细胞,从1月龄纯种萨福克绵羊耳组织分离成纤维细胞,通过实时荧光定量PCR比较绵羊精子、成熟卵母细胞与成纤维细胞中miR-449b的相对表达量;给成熟卵母细胞分别显微注射0.9%生理盐水(Con组)、miR-449b模拟物对照(NC mimic)与miR-449b模拟物(miR-449b mimic),注射后进行孤雌激活,分别于激活的第2、7天统计胚胎卵裂率与囊胚率;将成熟卵母细胞进行体外受精(IVF),收集IVF、Con、NC mimic与miR-449b mimic组2-细胞胚胎,采用免疫荧光法比较组蛋白H3K9me3的变化。【结果】miR-449b在精子中的表达显著高于成熟卵母细胞和成纤维细胞(P<0.05);与Con组相比,miR-449b mimic和NC mimic组胚胎的卵裂率均显著降低(P<0.05),NC mimic组胚胎卵裂率显著低于miR-449b mimic组(P<0,05);miR-449b mimic组胚胎囊胚率提高,但差异不显著(P>0.05);IVF、Con、NC mimic与miR-449b mimic组2-细胞胚胎均表达组蛋白H3K9me3,且都在细胞核表达。与Con组相比,NC mimic组2-细胞胚胎组蛋白H3K9me3的表达水平显著增加(P<0.05),miR-449b mimic组显著降低(P<0.05);NC mimic组2-细胞胚胎组蛋白H3K9me3的表达水平显著高于miR-449b mimic组(P<0.05),miR-449b mimic与IVF组无显著差异(P>0.05)。【结论】miR-449b能显著提高绵羊早期胚胎的发育率,且降低早期胚胎中H3K9me3的表达水平。 展开更多

关键词 miR-449b 早期胚胎 H3K9me3 精子

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绵羊胚胎FGF5基因单碱基突变体系的建立 被引量：1

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作者 蒙亚琦 姚旭东 +5 位作者 任秀美奥 郭延华 唐红 张译元 王立民 周平 《中国畜牧兽医》 CAS 北大核心 2021年第10期3533-3544,共12页

研究旨在利用单碱基编辑技术定点修饰绵羊(Ovis aries)成纤维细胞生长因子5(fibroblast growth factor 5,FGF5)基因第1外显子以引入终止密码子,获得定点编辑类型的绵羊胚胎,为培育具有长毛性状的绵羊提供试验材料。首先设计合成4个单导... 研究旨在利用单碱基编辑技术定点修饰绵羊(Ovis aries)成纤维细胞生长因子5(fibroblast growth factor 5,FGF5)基因第1外显子以引入终止密码子,获得定点编辑类型的绵羊胚胎,为培育具有长毛性状的绵羊提供试验材料。首先设计合成4个单导向RNA(single guide RNA,sgRNA)寡核苷酸链(sgRNA-T1~sgRNA-T4),构建4组不同的重组表达载体;将构建好的pGL3-U6-sgRNA-PGK-puromycin和pCMV-AncBE4max-P2A-GFP质粒以共转染的方法分别转入4组绵羊成纤维细胞,随后用CruiserTM酶对转染的细胞进行活性检测并在胚胎水平进行测序验证。结果显示,sgRNA-T1和sgRNA-T4组细胞的PCR产物可被CruiserTM酶酶切,且测序结果表明都具有靶向效果,编辑效率分别为68.75%和47.37%。利用显微注射技术将不同浓度的AncBE4max mRNA与有效sgRNA混合注射到绵羊孤雌激活胚胎中,并检测胚胎卵裂率、囊胚率和编辑效率,结果显示,胚胎水平的最佳注射浓度组合为AncBE4max(ng/μL)∶sgRNA(ng/μL)=100∶50,从该浓度组中随机挑选的单枚胚胎测序结果显示,引入终止密码子的编辑效率为80%。而sgRNA-T1在不同浓度组合的注射胚胎中均未检测到编辑。本研究针对FGF5基因的第1外显子,通过在成纤维细胞转染表达载体,成功筛选到高效靶向绵羊FGF5基因的2个sgRNA(T1、T4);通过显微注射绵羊孤雌激活胚胎,成功在胚胎上实现FGF5基因第1外显子打靶位点C→T的转变,为后期FGF5基因定点编辑羊的生产奠定基础。 展开更多

关键词 绵羊 成纤维细胞生长因子5(FGF5) 单碱基编辑

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绵羊周岁体重与血液生理生化指标的回归分析 被引量：2

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作者 魏巧兰 杨华 +3 位作者 郭学义 杨永林 余乾 张宾 《中国草食动物科学》 CAS 2022年第6期14-18,36,共6页

为研究绵羊周岁体重与血液生理生化指标的相关性,筛选可反映绵羊生长发育的关键生理生化指标,以便为品系的选育提高提供理论基础。以154只周岁多胎萨福克羊为研究对象,称量体重,应用全自动血液细胞分析仪和生化检测仪测定绵羊外周血中2... 为研究绵羊周岁体重与血液生理生化指标的相关性,筛选可反映绵羊生长发育的关键生理生化指标,以便为品系的选育提高提供理论基础。以154只周岁多胎萨福克羊为研究对象,称量体重,应用全自动血液细胞分析仪和生化检测仪测定绵羊外周血中23个生理指标和11个生化指标的含量,分析性别间体重、生理生化指标含量的差异,并通过多元回归分析周岁体重与生理生化指标的相关性。结果表明,公羊的周岁体重和血液中Neu、Neu%均极显著高于母羊(P<0.01),Eos%、Lymph%和MCV均极显著低于母羊(P<0.01),Mon和RDW-CV均显著高于母羊(P<0.05),Lymph和HCT均显著低于母羊(P<0.05)。相关分析表明,绵羊周岁体重与生理指标Neu、Neu%之间存在极显著正相关(P<0.01),与HGB之间存在显著正相关(P<0.05);周岁体重与生化指标ALT、ALP和γ-GT之间均存在极显著正相关(P<0.01)。多元回归分析表明,血液生理生化指标对周岁体重的回归方程为Y=0.260X_(1)+0.246X_(2)+0.473X_(3)-0.547X_(4)-0.280X_(5)+0.265X_(6)+0.229X_(7)+33.365,Neu、Neu%、ALT、TP和γ-GT的含量可间接评价周岁体重。说明绵羊性别、体重以及血液生理生化指标三者之间具有一定程度的相关性,在多胎萨福克羊选育过程中可考虑Neu、Neu%、ALT和γ-GT作为间接选种的生理生化指标。 展开更多

关键词 绵羊 体重 生理生化指标 多元回归

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绵羊大肠埃希菌生物被膜形成及相关基因的检测

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作者 柴迎锦 邬琴 +5 位作者 顾晓晓 郭强强 周霞 韩猛立 张星星 黄新 《动物医学进展》 北大核心 2019年第11期36-39,共4页

检测绵羊大肠埃希菌中的XJ10生物被膜(biofilm,BF)形成情况并确定与BF形成相关基因的携带情况。采用96孔聚苯乙烯微孔板培养XJ10观察BF的形态和测定OD值分析XJ10BF在不同的时间段形成的情况,采用PCR方法检测BF 12种形成相关基因的分布... 检测绵羊大肠埃希菌中的XJ10生物被膜(biofilm,BF)形成情况并确定与BF形成相关基因的携带情况。采用96孔聚苯乙烯微孔板培养XJ10观察BF的形态和测定OD值分析XJ10BF在不同的时间段形成的情况,采用PCR方法检测BF 12种形成相关基因的分布情况。结果表明,在37℃,BF的OD值从2 h开始逐渐升高,24 h左右接近最高峰,维持至36 h后,OD值开始缓慢下降,直至72 h仍维持较高水平,在整个检测时间段内XJ10BF OD值显著高于对照组,且差异显著(P<0.05);6 h时BF形成初具形态,8 h^10 h呈现不完整的网格结构,12 h时BF形成较明显的网状结构,24 h^36 h形成有序的较为密集的网格结构,48 h后网状结构开始解离和脱落。同时在XJ10中检测到了其中8种与BF形成相关的基因,测序结果与GenBank公布的相应序列同源性为97.2%以上。试验表明XJ10具有形成BF的能力,但形成能力较弱,且携带8个与BF形成相关的基因。 展开更多

关键词 绵羊大肠埃希菌 生物被膜 生物被膜形成相关基因

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多胎萨福克羊与哈萨克羊级进杂交后代生长性能、屠宰性能、肉品质及血液生理生化指标分析 被引量：1

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作者 余乾 杨永林 +3 位作者 杨华 王苗苗 张宾 张文喆 《中国畜牧兽医》 CSCD 北大核心 2024年第1期125-134,共10页

【目的】了解天然放牧条件下多胎萨福克羊与哈萨克羊级进杂交羔羊的生长性能、屠宰性能和肉品质等,评估多胎萨福克羊对哈萨克羊的级进杂交改良效果。【方法】试验以3月龄体况、体型基本一致的多胎萨福克羊及其与哈萨克羊级进杂交F1、F2... 【目的】了解天然放牧条件下多胎萨福克羊与哈萨克羊级进杂交羔羊的生长性能、屠宰性能和肉品质等,评估多胎萨福克羊对哈萨克羊的级进杂交改良效果。【方法】试验以3月龄体况、体型基本一致的多胎萨福克羊及其与哈萨克羊级进杂交F1、F2代和哈萨克公羊为研究对象,天然放牧条件下饲养,试验预试期10 d,正试期90 d。试验结束后选择接近组内平均体重羔羊各10只,屠宰前测定各试验羊体尺指标,屠宰后分别测定屠宰性能、肉品质、营养成分及血液生理生化指标。【结果】(1)多胎萨福克羊、级进杂交F1和F2代羔羊的体高、胸深、宰前活重、胴体重、屠宰率、肉骨比、眼肌面积均显著高于哈萨克羊(P<0.05);级进杂交F1代羔羊和哈萨克羊的背脂厚度、尾脂重显著高于多胎萨福克羊和级进杂交F2代羔羊(P<0.05)。(2)级进杂交F1代羔羊背最长肌水分含量显著高于多胎萨福克羊、级进杂交F2代羔羊和哈萨克羊(P<0.05);哈萨克羊背最长肌中铁、锌、镁和粗脂肪含量均显著高于多胎萨福克羊、级进杂交F1和F2代(P<0.05)。(3)多胎萨福克羊、级进杂交F1和F2代羔羊血液中白细胞数、嗜碱性粒细胞数、中性粒细胞数、嗜酸性粒细胞数、淋巴细胞数等显著高于哈萨克羊,嗜碱性粒细胞百分比、嗜酸性粒细胞百分比、血小板总数、平均血小板体积等均显著低于哈萨克羊(P<0.05)。(4)多胎萨福克羊、级进杂交F1和F2代羔羊血清中碱性磷酸酶活性显著高于哈萨克羊,总蛋白含量显著低于哈萨克羊(P<0.05);级进杂交F1代羔羊血清中谷丙转氨酶活性、铁含量均显著低于哈萨克羊(P<0.05);多胎萨福克羊血清白蛋白含量显著高于级进杂交F1、F2代和哈萨克羊(P<0.05)。【结论】天然放牧条件下,多胎萨福克羊及其级进杂交后代的产肉性能高于哈萨克羊,随着杂交代数的增加,屠宰性能明显提升、肉品质得到改善。 展开更多

关键词 多胎萨福克羊 哈萨克羊 级进杂交 屠宰性能 肉品质 生理生化指标

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