【目的】建立一种有效的巴旦木花药总RNA提取方法,为巴旦木花粉SFB基因克隆和自交不亲和机制研究奠定基础。【方法】利用改良的CTAB法从巴旦木(Amygdalus communis L.)花药中提取高质量的总RNA。【结果】该方法获得的巴旦木花药总RNA...【目的】建立一种有效的巴旦木花药总RNA提取方法,为巴旦木花粉SFB基因克隆和自交不亲和机制研究奠定基础。【方法】利用改良的CTAB法从巴旦木(Amygdalus communis L.)花药中提取高质量的总RNA。【结果】该方法获得的巴旦木花药总RNA完整性好、无多糖和蛋白质的污染,产量较高(鲜花药为283.44μg/g),OD260/OD280在1.89-1.99,OD260/OD230〉2.0。提取的巴旦木花药总RNA反转录成cDNA,以SFB(S-haplotype-specific F-box gene)基因简并引物PCR扩增,获得了目的片段。【结论】改良的CTAB法是一种简单、快速有效的巴旦木花药总RNA提取方法,提取的花药总RNA能够满足巴旦木进一步的分子生物学研究。展开更多
文摘【目的】建立一种有效的巴旦木花药总RNA提取方法,为巴旦木花粉SFB基因克隆和自交不亲和机制研究奠定基础。【方法】利用改良的CTAB法从巴旦木(Amygdalus communis L.)花药中提取高质量的总RNA。【结果】该方法获得的巴旦木花药总RNA完整性好、无多糖和蛋白质的污染,产量较高(鲜花药为283.44μg/g),OD260/OD280在1.89-1.99,OD260/OD230〉2.0。提取的巴旦木花药总RNA反转录成cDNA,以SFB(S-haplotype-specific F-box gene)基因简并引物PCR扩增,获得了目的片段。【结论】改良的CTAB法是一种简单、快速有效的巴旦木花药总RNA提取方法,提取的花药总RNA能够满足巴旦木进一步的分子生物学研究。