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沙棘籽粕抑菌肽的分离纯化及抑菌机制的初探
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作者 江峻峰 朱东亮 +6 位作者 曾琦琪 孙嘉莉 牟晓娟 吴同华 单良 王苏琪 包晓玮 《中国调味品》 北大核心 2025年第6期1-9,共9页
目的:分离纯化沙棘籽粕抑菌肽并对其抑菌机制进行初步探究。方法:以沙棘籽粕为原料,采用酶解法制备抑菌肽。以金黄色葡萄球菌为研究对象,以抑菌圈直径为评价标准,通过超滤、凝胶层析过滤(Sephadex G-25)、液相色谱与串联质谱联用(LC-MS/... 目的:分离纯化沙棘籽粕抑菌肽并对其抑菌机制进行初步探究。方法:以沙棘籽粕为原料,采用酶解法制备抑菌肽。以金黄色葡萄球菌为研究对象,以抑菌圈直径为评价标准,通过超滤、凝胶层析过滤(Sephadex G-25)、液相色谱与串联质谱联用(LC-MS/MS)对沙棘籽粕抑菌肽进行分离、纯化和肽段鉴定,并通过抑菌肽数据库(APD3)筛选出潜在抑菌肽段,结合分子对接手段分析其相互作用力和作用模式。测定抑菌肽最小抑菌浓度(MIC);结合激光共聚焦扫描显微镜、扫描电镜等方法从金黄色葡萄球菌细胞膜通透性和完整性等方面对其抑菌机制进行初步探索。结果:经超滤、凝胶层析分离后,F-Ⅲ-A组分具有较强的抑菌活性,通过LC-MS/MS结合抑菌肽数据库筛选得到8条潜在抑菌活性的肽段序列,分别为AIGVDILK、ALEACVKARNEGR、ARPAADER、IGGIGTVPVGR、ILSLSPSR、VGLAETIR、VLQLETAAGAAIR、VPTVDVSVVDLTVR。分子对接结果显示8条多肽和受体结合的分子对接能量范围为-10.0265~-7.4156 kcal/mol,平均结合能为-8.3608 kcal/mol。MIC为2.5 mg/mL,激光共聚焦显微镜观察PI单通道显示抑菌肽处理组较对照组红色荧光强度增强,扫描电镜显示抑菌肽处理后菌体表面毛糙不光滑,并出现不同程度的皱缩、塌陷,说明抑菌肽破坏了金黄色葡萄球菌细胞膜、细胞壁的完整性。结论:对沙棘籽粕抑菌肽的分离纯化和抑菌机制的探究促进了沙棘籽粕活性肽的深度开发,并为制备抑菌肽产品提供了理论依据。 展开更多
关键词 沙棘籽粕 抑菌肽 超滤 分子对接 抑菌机制
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沙棘果皮渣总黄酮体内外降血脂活性研究 被引量:6
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作者 孙嘉莉 赵文燕 +5 位作者 朱东亮 江峻峰 牟晓娟 闫思语 宗泽慧 包晓玮 《食品工业科技》 CAS 北大核心 2024年第24期353-363,共11页
为探究沙棘果皮渣总黄酮的降血脂功效及抗氧化水平,采用体外和体内试验研究沙棘果皮渣总黄酮纯化物(TFSE)降血脂功能。通过体外试验测定TFSE的抗氧化活性,并模拟人体胃肠环境,考察TFSE对三种胆酸盐的结合能力,以此来评价其体外抗氧化及... 为探究沙棘果皮渣总黄酮的降血脂功效及抗氧化水平,采用体外和体内试验研究沙棘果皮渣总黄酮纯化物(TFSE)降血脂功能。通过体外试验测定TFSE的抗氧化活性,并模拟人体胃肠环境,考察TFSE对三种胆酸盐的结合能力,以此来评价其体外抗氧化及降血脂效果;通过高脂饲料诱导C57BL/6J小鼠建立高脂血症模型,灌胃TFSE进行干预,分别比较不同剂量的TFSE对C57BL/6J小鼠的体重、血清和肝脏的血脂水平、肝功能指标及肝脏的氧化指标,并对肝脏组织进行病理学的观察。体外试验结果表明,TFSE对DPPH、ABTS+自由基清除能力较强,其IC50值分别5.20、10.24μg/mL,且具有较高的还原能力,说明其抗氧化活性好;与胆酸钠、甘氨胆酸钠、牛磺胆酸钠结合能力的IC50值分别为11.11、2.61、3.50 mg/mL,说明TFSE与胆酸盐的结合能力较强;体内动物实验结果表明,与模型组(HFD)相比,L-TFSE组和H-TFSE组能够抑制小鼠体重增加,显著降低(P<0.05)血清和肝脏中总胆固醇(TC)、三酰甘油(TG)和低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)水平,显著增加(P<0.05)高密度脂蛋白蛋白(HDL-C)水平及显著降低(P<0.05)小鼠血清中谷草转氨酶(AST)、谷丙转氨酶(ALT)、碱性磷酸酶(AKP)、乳酸脱氢酶(LDH)水平。同时,显著增加(P<0.05)小鼠肝脏中超氧化物歧化酶(SOD)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)、过氧化氢酶(CAT)水平,显著降低(P<0.05)丙二醛(MDA)含量。综上,TFSE可以改善高脂饮食对肝脏的病理损伤,并显现出良好的降血脂活性以及抗氧化活性,该研究可为提高新疆沙棘果皮渣产品的附加值提供一定的理论基础。 展开更多
关键词 沙棘果皮渣 总黄酮 抗氧化活性 胆酸盐结合能力 降血脂活性
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刺山柑正丁醇部位对MH7A细胞增殖、凋亡的作用 被引量:4
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作者 金渭荃 包晓玮 +2 位作者 朱东亮 白栋文 刘晓禄 《中成药》 CAS CSCD 北大核心 2022年第2期578-581,共4页
目的研究刺山柑正丁醇部位对类风湿关节炎滑膜成纤维细胞系MH7A细胞增殖和凋亡的影响,以及对MMP-1、MMP-9、MMP-13、p-JNK及p-STAT3蛋白表达的影响。方法采用CCK-8法检测MH7A细胞增殖抑制率,使用流式细胞术检测MH7A凋亡,采用Western blo... 目的研究刺山柑正丁醇部位对类风湿关节炎滑膜成纤维细胞系MH7A细胞增殖和凋亡的影响,以及对MMP-1、MMP-9、MMP-13、p-JNK及p-STAT3蛋白表达的影响。方法采用CCK-8法检测MH7A细胞增殖抑制率,使用流式细胞术检测MH7A凋亡,采用Western blot法检测MMP-1、MMP-9、MMP-13、p-JNK及p-STAT3蛋白表达。结果刺山柑正丁醇部位能抑制MH7A细胞增殖率(P<0.01),并能诱导细胞凋亡(P<0.01),降低MMP-1、MMP-9、MMP-13、p-JNK及p-STAT3蛋白表达。结论刺山柑正丁醇部位可抑制MH7A细胞增殖,诱导细胞凋亡,可能通过p-JNK和p-STAT3信号通路进行调节。 展开更多
关键词 刺山柑 MH7A 增殖 凋亡 JNK STAT3
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HPLC法同时测定刺山柑果实正丁醇部位中3种成分及该部位抑菌活性 被引量:7
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作者 包晓玮 赵文燕 +2 位作者 曾兰君 魏晨业 金渭荃 《中成药》 CAS CSCD 北大核心 2021年第9期2567-2569,共3页
目的建立HPLC法同时测定刺山柑Capparis spinosa L.果实正丁醇部位中3种成分的含量,并评价该部位抑菌活性。方法该药材正丁醇部位的分析采用岛津Inertsil ODS-3色谱柱(4.6 mm×250 mm,5μm);流动相乙腈(含0.1%甲酸)-乙酸铵(含0.1%甲... 目的建立HPLC法同时测定刺山柑Capparis spinosa L.果实正丁醇部位中3种成分的含量,并评价该部位抑菌活性。方法该药材正丁醇部位的分析采用岛津Inertsil ODS-3色谱柱(4.6 mm×250 mm,5μm);流动相乙腈(含0.1%甲酸)-乙酸铵(含0.1%甲酸)(25∶75);体积流量0.8 mL/min;柱温40℃;检测波长280 nm。采用试管二倍稀释法,测定该部位对大肠杆菌、金黄色葡萄球菌、枯草芽孢杆菌的最小抑菌浓度和最低杀菌浓度。结果芦丁、对羟基苯甲酸、异槲皮苷分别在0.5~16μg/mL(r=0.9994)、1~32μg/mL(r=0.9998)、0.5~16μg/mL(r=0.9981)范围线性关系良好,平均加样回收率分别为90.62%、100.84%、91.82%,RSD分别为3.45%、3.02%、4.62%。正丁醇部位对3种细菌的最小抑菌浓度分别为25、25、6.25 mg/mL,最小杀菌浓度分别为50、50、12.5 mg/mL。讨论该方法稳定可靠,可用于刺山柑的质量控制,而且其正丁醇部位对金黄色葡萄球菌、大肠杆菌、枯草芽孢杆菌均有一定抑菌活性。 展开更多
关键词 刺山柑果实 正丁醇部位 芦丁 对羟基苯甲酸 异槲皮苷 抑菌活性 HPLC 试管二倍稀释法
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