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新疆软紫草提取物对HepG2细胞凋亡的影响及其抗小鼠原位肝癌的作用 被引量:2
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作者 秦冬梅 姚佳 +4 位作者 孟凌宇 侯金秋 孙文宁 蔡钢 冀祖恩 《中国药理学通报》 CAS CSCD 北大核心 2023年第7期1312-1319,共8页
目的研究新疆软紫草根[Arnebia euchroma(Royle)Johnst,AE]不同提取物诱导人肝癌细胞株(HepG2)的凋亡作用,并通过小鼠原位肝癌模型验证其抗肝癌作用,初步探究AE提取物的抗肝癌作用。方法首先采用MTT法和Annexin V-FITC/PI双染色法检测A... 目的研究新疆软紫草根[Arnebia euchroma(Royle)Johnst,AE]不同提取物诱导人肝癌细胞株(HepG2)的凋亡作用,并通过小鼠原位肝癌模型验证其抗肝癌作用,初步探究AE提取物的抗肝癌作用。方法首先采用MTT法和Annexin V-FITC/PI双染色法检测AE各提取物对HepG2细胞的抗增殖以及促凋亡作用,采用Western blot法检测了细胞中Bcl-2凋亡家族蛋白的表达水平,综合上述实验结果,筛选出促凋亡作用明显的提取物进行抗小鼠原位肝癌的实验,评价了给药前后原位肝癌小鼠的脏器指数、肝功能指标及组织切片。结果随着AE提取物极性的降低,对HepG2细胞抗增殖、促凋亡作用增强,AE石油醚部位(AEP)抗增殖和诱导凋亡的作用最明显;在AEP剂量为1.56μg·L^(-1)时,Bcl-2蛋白水平明显下降(P<0.05),且呈剂量依赖性,Bad蛋白表达水平在AEP剂量为3.125μg·L^(-1)时明显上调(P<0.05)。动物实验验证了AEP可以改善肝功能,减缓肝癌发展进程的作用。结论研究表明AEP对肝细胞癌的发展具有一定的抑制作用,发挥该作用与调节Bcl-2家族蛋白有关。 展开更多
关键词 新疆软紫草 抗肝癌 HEPG2 BCL-2家族 凋亡 原位肝癌模型
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左旋紫草素抑制NF-κB信号通路保护LPS/D-GalN诱导的小鼠急性肝损伤 被引量:7
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作者 侯金秋 邹楠 +3 位作者 袁今奇 杜梦鸽 张薇 秦冬梅 《中国药理学通报》 CAS CSCD 北大核心 2023年第1期130-138,共9页
目的探讨左旋紫草素(L-Shikonin,L-SK)对脂多糖(lipopolysaccharide,LPS)诱导的RAW264.7巨噬细胞的体外抗炎作用及其对LPS/D-GalN诱导的急性肝损伤的保护作用。方法体内实验采用LPS/D-GalN建立小鼠急性肝损伤模型,考察存活率和各组小鼠... 目的探讨左旋紫草素(L-Shikonin,L-SK)对脂多糖(lipopolysaccharide,LPS)诱导的RAW264.7巨噬细胞的体外抗炎作用及其对LPS/D-GalN诱导的急性肝损伤的保护作用。方法体内实验采用LPS/D-GalN建立小鼠急性肝损伤模型,考察存活率和各组小鼠的肝脾指数变化,测定血清中AST、ALT、AKP与肝组织匀浆中的NO含量、超氧化物歧化酶(SOD)、丙二醛(MDA)水平,HE染色观察各组小鼠肝组织病理切片。体外实验采用MTT法检测细胞存活率、Griess法检测NO含量、RT-PCR和Western blot检测分别考察L-SK对LPS诱导的RAW264.7细胞中促炎因子的mRNA和相关通路蛋白表达水平的影响。结果体内实验结果表明,L-SK可明显改善急性肝损伤小鼠的肝脾指数,血清中AST、ALT和AKP水平明显下降,肝匀浆中的NO和MDA含量明显下降,SOD活性提高,能明显改善小鼠肝组织病理性损伤。体外实验结果表明,L-SK能明显抑制LPS诱导的RAW264.7细胞中的INOS、COX2、IFN-β以及促炎因子IL-6、TNF-α和IL-1β的mRNA表达,并且明显抑制INOS、COX2蛋白表达以及NF-κB信号通路蛋白表达。结论L-SK在LPS诱导的RAW264.7细胞的体外炎症中具有良好的抗炎作用,通过抑制NF-κB信号通路中的磷酸化p65以及IKKα/β的蛋白表达,从而发挥体外抗炎作用,同时L-SK对小鼠急性肝损伤具有保护作用,其作用机制可能与抗炎作用相关。 展开更多
关键词 左旋紫草素 LPS/D-GalN 肝损伤 脂多糖 RAW264.7细胞 NF-κB
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毛菊苣正丁醇萃取物中母菊素含量测定及其对大鼠肝纤维化保护作用 被引量:3
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作者 苏林洁 吕博 +3 位作者 马斌 罗恒磊 秦冬梅 张薇 《中国药理学通报》 CAS CSCD 北大核心 2023年第9期1731-1739,共9页
目的研究毛菊苣正丁醇萃取部位(Cichorium glandulosum N-butanol extraction site,CGE)对大鼠肝纤维化(hepatic fibrosis,HF)的保护作用并测定其主要有效成分母菊素的含量。方法采用HPLC法测定CGE中母菊素的含量及方法学考察;大鼠随机... 目的研究毛菊苣正丁醇萃取部位(Cichorium glandulosum N-butanol extraction site,CGE)对大鼠肝纤维化(hepatic fibrosis,HF)的保护作用并测定其主要有效成分母菊素的含量。方法采用HPLC法测定CGE中母菊素的含量及方法学考察;大鼠随机分为正常组,模型组,CGE低、中、高剂量组,姜黄素组,除正常组大鼠背部sc生理盐水外,其余各组大鼠按体质量剂量sc 40%CCl 4橄榄油溶液建立HF模型,每周2次,连续12周,于第5周起,对相应给药组的大鼠在每日同一时间ig相应剂量的药物。12周后取肝脾组织及血清,检测肝脾指数及相关血清指标;观察肝脏病理组织学变化;采用免疫组化染色法和Western blot法考察肝组织TGF-β1、Smad3、Smad7及α-SMA的蛋白表达。结果母菊素在CGE中的含量为7.69%;模型组大鼠肝功能严重受损,出现炎症细胞浸润及纤维蛋白,提示HF模型建立成功;与模型组比较,各给药组可明显降低肝脾指数及血清中的AST、ALT、LDH、γ-GT、AKP和MDA水平,明显改善肝组织病理损伤程度,能够有效抑制HF大鼠肝组织的TGF-β1、Smad3、α-SMA的蛋白表达,上调Smad7蛋白表达。结论CGE主要成分是母菊素,CGE对CCl 4诱导的大鼠HF具有保护作用,其作用机制可能与阻断TGF-β1/Smads信号转导通路有关。 展开更多
关键词 毛菊苣 母菊素 正丁醇萃取部位 HPLC 肝纤维化 TGF-β1/Smads
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咖啡酸四聚体异构体基于MAPK/NF-κB信号通路的体外抗炎作用机制研究 被引量:3
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作者 侯金秋 吕博 +2 位作者 孟凌宇 张薇 秦冬梅 《石河子大学学报(自然科学版)》 CAS 北大核心 2022年第4期445-452,共8页
目的探讨从新疆软紫草中提取分离得到的咖啡酸四聚体同分异构体(KC-Ⅱ)对脂多糖(LPS)诱导的RAW264.7巨噬细胞的体外抗炎作用研究。方法采用MTT比色法检测细胞活力、Griess法检测细胞中NO含量、RT-PCR检测KC-Ⅱ对LPS诱导的RAW264.7细胞... 目的探讨从新疆软紫草中提取分离得到的咖啡酸四聚体同分异构体(KC-Ⅱ)对脂多糖(LPS)诱导的RAW264.7巨噬细胞的体外抗炎作用研究。方法采用MTT比色法检测细胞活力、Griess法检测细胞中NO含量、RT-PCR检测KC-Ⅱ对LPS诱导的RAW264.7细胞中促炎因子的mRNA表达影响,Western Blot检测INOS和COX-2以及Akt、MAPK/NF-κB信号通路的蛋白表达水平,细胞免疫荧光法检测了P-Erk1/2和P-P65蛋白在细胞中的分布以及荧光强度。结果MTT结果显示,KC-Ⅱ浓度低于300μmol·L^(-1)时细胞增殖差异无统计学意义;RT-PCR结果显示,与模型组比较,KC-Ⅱ处理组能显著抑制LPS诱导的RAW264.7细胞中INOS、COX2、IFN-β以及促炎因子IL-6、TNF-α和IL-1β的表达;Western Blot结果表明,KC-Ⅱ处理组明显抑制INOS、COX2的表达以及MAPK/NF-κB信号通路中Erk1/2、Jnk、P65以及IKKα/β的表达。结论KC-Ⅱ化合物通过抑制MAPK/NF-κB信号通路的Erk1/2、Jnk、NF-κB以及IKKα/β的蛋白磷酸化表达,从而在LPS诱导的RAW264.7细胞中发挥抗炎作用。 展开更多
关键词 新疆软紫草 脂多糖 RAW264.7细胞 MAPK/NF-κB 抗炎作用
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