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hsa-miR-448过表达下调HIF-1α对结肠癌细胞SW480作用及机制研究
被引量：
7
1
作者
歧红阳
王云溪
+4 位作者
肖占宇
王志民
吴凤丽
董志超
王蕾
《中国免疫学杂志》
CAS
CSCD
北大核心
2019年第19期2350-2356,共7页
目的:本研究旨在探讨小RNA-448(miR-448)在结肠癌发生和发展中的作用及其潜在的分子机制。方法:先用基因预测软件:miRanda、TarBase和TargetScan预测miR-448的靶基因,并用荧光素实验验证靶向关系;然后miR-448 mimic与pcDNA-HIF-1α单独...
目的:本研究旨在探讨小RNA-448(miR-448)在结肠癌发生和发展中的作用及其潜在的分子机制。方法:先用基因预测软件:miRanda、TarBase和TargetScan预测miR-448的靶基因,并用荧光素实验验证靶向关系;然后miR-448 mimic与pcDNA-HIF-1α单独或联合转染SW480细胞,并用RT-PCR检测miR-448和缺氧诱导因子1α(HIF-1α)的表达,Transwell检测细胞侵袭情况,划痕实验检测细胞的迁移能力,蛋白印迹检测HIF-1α、E-cadherin、Vimentin、N-cadherin;P38和Hsp27的蛋白表达;miR-448 inhibitor转染结肠癌细胞SW480、10μmol/L SB203580处理结肠癌细胞SW480单独或联合进行,RT-PCR检测miR-448的表达,蛋白印迹检测HIF-1α、P38和Hsp27的表达,Transwell检测细胞侵袭;裸鼠皮下注射miR-448 mimic转染结肠癌细胞SW480,检测30 d时移植瘤重量,RT-PCR检测miR-448和HIF-1α的表达,免疫组化检测Vimentin的表达,蛋白印迹法检测P38和Hsp27的表达。结果:miR-448与HIF-1α在3′UTR区存在结合位点,miR-448和HIF-1α存在靶向关系,并且miR-448对HIF-1α表达具有抑制作用;SW480细胞过表达miR-448后,HIF-1α表达量下调,细胞侵袭和迁移速度减慢,E-cadherin的表达显著上调,而N-cadherin和Vimentin的表达显著下调;低表达miR-448后,HIF-1α、P38和Hsp27表达量显著增加,细胞侵袭数目显著增多;小鼠转染MIR-448 mimic后,移植瘤重量显著减轻,miR-448表达量显著上调,HIF-1α表达量显著下调,Vimentin阳性比率明显降低,P38和Hsp27表达量显著下调。结论:在结肠癌细胞SW480中,过表达hsa-miR-448下调HIF-1α来减弱细胞的侵袭迁移能力以及抑制上皮间质转化,从而抑制结肠癌的发生和发展。
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关键词
miR-448
HIF-1Α
结肠癌
侵袭
迁移
EMT
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职称材料
题名
hsa-miR-448过表达下调HIF-1α对结肠癌细胞SW480作用及机制研究
被引量：
7
1
作者
歧红阳
王云溪
肖占宇
王志民
吴凤丽
董志超
王蕾
机构
新乡市
中心
医院
消化内
科
新乡市第一人民医院体检科
郑州大学
第一
附属
医院
出处
《中国免疫学杂志》
CAS
CSCD
北大核心
2019年第19期2350-2356,共7页
基金
河南省自然科学基金面上项目(No.162300410220)
文摘
目的:本研究旨在探讨小RNA-448(miR-448)在结肠癌发生和发展中的作用及其潜在的分子机制。方法:先用基因预测软件:miRanda、TarBase和TargetScan预测miR-448的靶基因,并用荧光素实验验证靶向关系;然后miR-448 mimic与pcDNA-HIF-1α单独或联合转染SW480细胞,并用RT-PCR检测miR-448和缺氧诱导因子1α(HIF-1α)的表达,Transwell检测细胞侵袭情况,划痕实验检测细胞的迁移能力,蛋白印迹检测HIF-1α、E-cadherin、Vimentin、N-cadherin;P38和Hsp27的蛋白表达;miR-448 inhibitor转染结肠癌细胞SW480、10μmol/L SB203580处理结肠癌细胞SW480单独或联合进行,RT-PCR检测miR-448的表达,蛋白印迹检测HIF-1α、P38和Hsp27的表达,Transwell检测细胞侵袭;裸鼠皮下注射miR-448 mimic转染结肠癌细胞SW480,检测30 d时移植瘤重量,RT-PCR检测miR-448和HIF-1α的表达,免疫组化检测Vimentin的表达,蛋白印迹法检测P38和Hsp27的表达。结果:miR-448与HIF-1α在3′UTR区存在结合位点,miR-448和HIF-1α存在靶向关系,并且miR-448对HIF-1α表达具有抑制作用;SW480细胞过表达miR-448后,HIF-1α表达量下调,细胞侵袭和迁移速度减慢,E-cadherin的表达显著上调,而N-cadherin和Vimentin的表达显著下调;低表达miR-448后,HIF-1α、P38和Hsp27表达量显著增加,细胞侵袭数目显著增多;小鼠转染MIR-448 mimic后,移植瘤重量显著减轻,miR-448表达量显著上调,HIF-1α表达量显著下调,Vimentin阳性比率明显降低,P38和Hsp27表达量显著下调。结论:在结肠癌细胞SW480中,过表达hsa-miR-448下调HIF-1α来减弱细胞的侵袭迁移能力以及抑制上皮间质转化,从而抑制结肠癌的发生和发展。
关键词
miR-448
HIF-1Α
结肠癌
侵袭
迁移
EMT
Keywords
miR-448
HIF-1α
Colon cancer
Invasion
Migration
EMT
分类号
R734.2 [医药卫生—肿瘤]
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题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
hsa-miR-448过表达下调HIF-1α对结肠癌细胞SW480作用及机制研究
歧红阳
王云溪
肖占宇
王志民
吴凤丽
董志超
王蕾
《中国免疫学杂志》
CAS
CSCD
北大核心
2019
7
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