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纳米颗粒疫苗研究进展 被引量:5
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作者 李鹏 郭军庆 +4 位作者 李清州 刘肖 王选年 王川庆 张改平 《河南农业科学》 CSCD 北大核心 2014年第4期21-25,共5页
纳米颗粒指小于100-1000nm的微粒,纳米颗粒疫苗不但能提高抗原的稳定性和免疫原性,而且能够靶向性递呈抗原和缓慢释放,增强机体产生免疫应答。综述了近年来纳米颗粒在疫苗发展过程中的应用,介绍了不同纳米颗粒作为运输系统或免疫佐... 纳米颗粒指小于100-1000nm的微粒,纳米颗粒疫苗不但能提高抗原的稳定性和免疫原性,而且能够靶向性递呈抗原和缓慢释放,增强机体产生免疫应答。综述了近年来纳米颗粒在疫苗发展过程中的应用,介绍了不同纳米颗粒作为运输系统或免疫佐剂与免疫细胞之间的相互作用。 展开更多
关键词 疫苗 纳米颗粒 佐剂 纳米技术
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猪圆环病毒2型靶细胞及其受体的研究进展 被引量:2
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作者 李鹏 王利平 +2 位作者 朱艳平 王选年 张改平 《中国畜牧兽医》 CAS 北大核心 2013年第1期25-28,共4页
猪圆环病毒2型(porcine circovirus type 2,PCV2)是统称为猪圆环病毒相关疾病(porcine circovirus-associated disease,PCVAD)的几个综合征的主要致病因子。目前,对PCV2配体表位和细胞受体在病毒入侵过程中的致病机理还不清楚,受体识别... 猪圆环病毒2型(porcine circovirus type 2,PCV2)是统称为猪圆环病毒相关疾病(porcine circovirus-associated disease,PCVAD)的几个综合征的主要致病因子。目前,对PCV2配体表位和细胞受体在病毒入侵过程中的致病机理还不清楚,受体识别是病毒黏附到宿主细胞表面的第一步,在病毒入侵和致病机理方面起到重要的作用。作者对近几年来PCV2侵染的靶细胞及其靶细胞受体的研究进展作一综述。 展开更多
关键词 猪圆环病毒2型 靶细胞 细胞受体
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猪圆环病毒2型重组Cap蛋白体外稳定性研究
3
作者 刘肖 金前跃 +5 位作者 郭军庆 王寅彪 张腾 李鹏 陈丽颖 张改平 《河南农业科学》 CSCD 北大核心 2015年第3期124-127,共4页
为筛选猪圆环病毒2型(PCV2)Cap蛋白在体外的稳定性条件,采用建立的PCV2双抗夹心ELISA方法,对Cap蛋白在不同贮藏条件下的抗原活性进行了检测。结果表明,Cap蛋白在25℃以下贮存时,其活性保持稳定;贮存时温度变化对蛋白质稳定性影响较大;... 为筛选猪圆环病毒2型(PCV2)Cap蛋白在体外的稳定性条件,采用建立的PCV2双抗夹心ELISA方法,对Cap蛋白在不同贮藏条件下的抗原活性进行了检测。结果表明,Cap蛋白在25℃以下贮存时,其活性保持稳定;贮存时温度变化对蛋白质稳定性影响较大;在甘氨酸和甘油2种蛋白保护剂存在条件下,蛋白质活性稳定性增强。表明,Cap蛋白的体外贮存、改造及病毒样颗粒组装应在25℃以下进行,尽量避免温度剧烈变化,同时添加蛋白质保护剂有利于蛋白质的体外稳定。 展开更多
关键词 猪圆环病毒2型 CAP蛋白 双抗夹心ELISA 稳定性
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鸡PD-1胞外区基因的克隆表达及其蛋白生物学活性鉴定 被引量:1
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作者 李博文 孙国鹏 +7 位作者 王爱国 岳锋 张艳芳 朱艳平 银梅 杨媛 郭东光 王选年 《河南农业科学》 CSCD 北大核心 2014年第10期112-116,共5页
为研究鸡程序性细胞死亡因子1(PD-1)胞外区的生物学活性,根据GenBank中的鸡PD-1基因序列,经生物信息学比对分析,设计鸡PD-1胞外区特异性克隆引物,扩增目的基因,连接原核表达载体pET-28a(+),构建重组表达载体pET-28a-PD-1,转化至Rosetta(... 为研究鸡程序性细胞死亡因子1(PD-1)胞外区的生物学活性,根据GenBank中的鸡PD-1基因序列,经生物信息学比对分析,设计鸡PD-1胞外区特异性克隆引物,扩增目的基因,连接原核表达载体pET-28a(+),构建重组表达载体pET-28a-PD-1,转化至Rosetta(DE3)大肠杆菌,并对IPTG浓度、诱导温度、诱导时间进行优化,对表达产物进行SDS-PAGE和Western blot分析,应用流式细胞术对所获得重组蛋白的生物学活性进行鉴定。结果显示,成功克隆了鸡PD-1胞外区基因;SDS-PAGE和Western blot分析结果表明,37℃、0.1mmol/L IPTG诱导4h时,PD-1胞外区融合蛋白表达量最高,以包涵体形式存在;流式细胞术分析结果表明,PD-1胞外区重组蛋白具有一定的生物学活性。 展开更多
关键词 程序性细胞死亡因子 1 胞外区 克隆 原核表达 生物学活性
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猪瘟病毒E0蛋白的原核表达及鉴定 被引量:6
5
作者 郭东光 朱艳平 +6 位作者 孙国鹏 岳峰 贾文科 王军 李鹏 王自浩 王选年 《动物医学进展》 CSCD 北大核心 2014年第5期31-35,共5页
为获得猪瘟病毒(CSFV)E0重组蛋白,建立CSFV抗体快速检测方法。本研究通过扩增CSFV C株E0基因,亚克隆至原核表达载体pGEX-4T-2,构建重组原核表达质粒pGEX-4T-2-E0,转化至宿主菌Rostta(DE3)后进行诱导表达。SDS-PAGE检测表明与目的蛋白大... 为获得猪瘟病毒(CSFV)E0重组蛋白,建立CSFV抗体快速检测方法。本研究通过扩增CSFV C株E0基因,亚克隆至原核表达载体pGEX-4T-2,构建重组原核表达质粒pGEX-4T-2-E0,转化至宿主菌Rostta(DE3)后进行诱导表达。SDS-PAGE检测表明与目的蛋白大小一致,其分子质量大小为46ku。优化重组蛋白表达条件,最终获得诱导表达的最佳温度为37℃,最佳IPTG浓度为0.1mmol/L,并且目的蛋白以包涵体形式存在。Western blot表明,目的蛋白能与CSFV兔化高免血清反应,表明该融合蛋白具有良好的抗原性。本研究为CSFV抗体检测试剂盒的研究奠定了基础。 展开更多
关键词 猪瘟病毒 E0 蛋白 鉴定
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猪圆环病毒2型荧光定量PCR检测方法的建立 被引量:7
6
作者 李鹏 郭军庆 +6 位作者 金前跃 李青梅 李清州 万博 王选年 王川庆 张改平 《华北农学报》 CSCD 北大核心 2014年第2期66-70,共5页
根据PCV2 ORF1设计1对特异性引物,建立了SYBR GreenⅠReal-time PCR检测方法。该方法灵敏度可达10-100拷贝/μL,比常规PCR检测方法灵敏度高10倍,而与猪繁殖和呼吸综合征病毒(PRRSV)、猪伪狂犬病毒(PRV)、猪瘟病毒(CSFV)以及猪细... 根据PCV2 ORF1设计1对特异性引物,建立了SYBR GreenⅠReal-time PCR检测方法。该方法灵敏度可达10-100拷贝/μL,比常规PCR检测方法灵敏度高10倍,而与猪繁殖和呼吸综合征病毒(PRRSV)、猪伪狂犬病毒(PRV)、猪瘟病毒(CSFV)以及猪细小病毒(PPV)没有交叉反应,利用该方法从50份临床病料中检测出43份阳性PCV2病毒,阳性检出率为94%。与常规PCR比较结果显示,该方法具有较高的灵敏度和特异性,能够快速检测和监控PCV2的感染流行。 展开更多
关键词 猪圆环病毒2型 SYBR GreenⅠ 荧光定量PCR
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新城疫病毒xx08毒株血凝素-神经氨酸酶基因主要抗原区原核表达及鉴定 被引量:1
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作者 朱艳平 田献礼 +7 位作者 李鹏 岳锋 贾文科 张艳芳 孙国鹏 郭东光 刘卫 王选年 《河南农业科学》 CSCD 北大核心 2012年第7期134-137,154,共5页
利用基因工程技术构建新城疫病毒HN基因抗原表位集中区HNI175-K367基因片段(523-1101位)的重组表达质粒pET32-HNI175-K367。将该质粒转化大肠杆菌BL21(ED3),经IPTG诱导,SDS-PAGE鉴定表明,HNI175-K367蛋白得到高效表达,其分子量约为38kD... 利用基因工程技术构建新城疫病毒HN基因抗原表位集中区HNI175-K367基因片段(523-1101位)的重组表达质粒pET32-HNI175-K367。将该质粒转化大肠杆菌BL21(ED3),经IPTG诱导,SDS-PAGE鉴定表明,HNI175-K367蛋白得到高效表达,其分子量约为38kD。Western-blot分析证实,HNI175-K367蛋白与鸡新城疫病毒高免血清发生特异性反应,表明利用原核表达系统获得的重组蛋白具有良好的反应原性。 展开更多
关键词 新城疫病毒 HN蛋白抗原表位集中区 原核表达 多克隆抗体 鉴定
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