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鸡PD-1胞外区基因的克隆表达及其蛋白生物学活性鉴定
被引量：
1
1
作者
李博文
孙国鹏
+7 位作者
王爱国
岳锋
张艳芳
朱艳平
银梅
杨媛
郭东光
王选年
《河南农业科学》
CSCD
北大核心
2014年第10期112-116,共5页
为研究鸡程序性细胞死亡因子1(PD-1)胞外区的生物学活性,根据GenBank中的鸡PD-1基因序列,经生物信息学比对分析,设计鸡PD-1胞外区特异性克隆引物,扩增目的基因,连接原核表达载体pET-28a(+),构建重组表达载体pET-28a-PD-1,转化至Rosetta(...
为研究鸡程序性细胞死亡因子1(PD-1)胞外区的生物学活性,根据GenBank中的鸡PD-1基因序列,经生物信息学比对分析,设计鸡PD-1胞外区特异性克隆引物,扩增目的基因,连接原核表达载体pET-28a(+),构建重组表达载体pET-28a-PD-1,转化至Rosetta(DE3)大肠杆菌,并对IPTG浓度、诱导温度、诱导时间进行优化,对表达产物进行SDS-PAGE和Western blot分析,应用流式细胞术对所获得重组蛋白的生物学活性进行鉴定。结果显示,成功克隆了鸡PD-1胞外区基因;SDS-PAGE和Western blot分析结果表明,37℃、0.1mmol/L IPTG诱导4h时,PD-1胞外区融合蛋白表达量最高,以包涵体形式存在;流式细胞术分析结果表明,PD-1胞外区重组蛋白具有一定的生物学活性。
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关键词
鸡
程序性细胞死亡因子
1
胞外区
克隆
原核表达
生物学活性
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职称材料
题名
鸡PD-1胞外区基因的克隆表达及其蛋白生物学活性鉴定
被引量：
1
1
作者
李博文
孙国鹏
王爱国
岳锋
张艳芳
朱艳平
银梅
杨媛
郭东光
王选年
机构
新乡学院生命科学与技术系/生物技术研究中心
河南科技
学院
动物
科学
学院
出处
《河南农业科学》
CSCD
北大核心
2014年第10期112-116,共5页
基金
国家自然科学基金项目(31272539)
文摘
为研究鸡程序性细胞死亡因子1(PD-1)胞外区的生物学活性,根据GenBank中的鸡PD-1基因序列,经生物信息学比对分析,设计鸡PD-1胞外区特异性克隆引物,扩增目的基因,连接原核表达载体pET-28a(+),构建重组表达载体pET-28a-PD-1,转化至Rosetta(DE3)大肠杆菌,并对IPTG浓度、诱导温度、诱导时间进行优化,对表达产物进行SDS-PAGE和Western blot分析,应用流式细胞术对所获得重组蛋白的生物学活性进行鉴定。结果显示,成功克隆了鸡PD-1胞外区基因;SDS-PAGE和Western blot分析结果表明,37℃、0.1mmol/L IPTG诱导4h时,PD-1胞外区融合蛋白表达量最高,以包涵体形式存在;流式细胞术分析结果表明,PD-1胞外区重组蛋白具有一定的生物学活性。
关键词
鸡
程序性细胞死亡因子
1
胞外区
克隆
原核表达
生物学活性
Keywords
chicken
PD-1
extracelluar region
clone
prokaryotic expression
biological activity
分类号
S855.3 [农业科学—临床兽医学]
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题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
鸡PD-1胞外区基因的克隆表达及其蛋白生物学活性鉴定
李博文
孙国鹏
王爱国
岳锋
张艳芳
朱艳平
银梅
杨媛
郭东光
王选年
《河南农业科学》
CSCD
北大核心
2014
1
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