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基于TLR4/MyD88/NF-κB信号通路探讨黄芪多糖对肺癌小鼠免疫功能的影响及对Th1/Th2的调节作用 被引量:75
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作者 刘艳玲 袁娟 +3 位作者 郭敏 张延锋 陆君君 曹巍 《中国免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2021年第6期676-682,共7页
目的:探讨黄芪多糖(APS)对肺癌小鼠免疫功能的影响及对Th1/Th2的调节作用及机制。方法:选取C57BL/6J野生型(TLR4^(+/+))和TLR4基因敲除(TLR4^(-/-))小鼠各50只,各随机分为5组:模型组、顺铂组(3 mg/kg)、APS高、中、低剂量组(400、200、1... 目的:探讨黄芪多糖(APS)对肺癌小鼠免疫功能的影响及对Th1/Th2的调节作用及机制。方法:选取C57BL/6J野生型(TLR4^(+/+))和TLR4基因敲除(TLR4^(-/-))小鼠各50只,各随机分为5组:模型组、顺铂组(3 mg/kg)、APS高、中、低剂量组(400、200、100 mg/kg),每组10只,皮下注射Lewis肺癌细胞建立小鼠肺癌移植模型。实验结束后测定小鼠体重、肿瘤组织、胸腺组织和脾组织重量,计算各组小鼠肿瘤抑制率、胸腺指数和脾指数。HE染色观察小鼠肿瘤组织病理变化;流式细胞术检测脾淋巴细胞亚群水平。ELISA试剂盒检测脾组织IL-2、IFN-γ、IL-4和IL-10含量。Western blot和qRT-PCR检测肿瘤组织TLR4/MyD88/NF-κB信号通路相关蛋白和mRNA表达水平。结果:与模型组相比,APS以剂量依赖性抑制Lewis肺癌移植瘤生长,提高肺癌小鼠胸腺指数和脾指数,促进肿瘤细胞凋亡,减少血管生成,提高脾组织CD3^(+)T细胞、CD4^(+)T细胞、CD8^(+)T细胞比例和CD4^(+)/CD8^(+)比值,逆转和平衡Th1/Th2漂移,提高肺癌小鼠免疫功能。APS剂量依赖性降低TLR4^(+/+)组小鼠TLR4、MyD88和NF-κB p65蛋白和mRNA表达,增加Th1型细胞因子IL-2和IFN-γ含量,降低Th2型细胞因子IL-4和IL-10含量(P<0.05);与模型组相比,APS高、中、低剂量组TLR4^(-/-)小鼠TLR4、MyD88和NF-κB p65蛋白和mRNA表达及Th1/Th2细胞因子含量差异无统计学意义(P>0.05)。结论:APS具有抗Lewis肺癌作用和免疫调节作用,其机制可能与抑制TLR4/MyD88/NF-κB信号通路活化有关。 展开更多
关键词 肺癌 黄芪多糖 免疫功能 TH细胞 TLR4/MyD88/NF-κB信号通路 小鼠
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全反式维甲酸对人胚肺成纤维细胞增殖及α-SMA表达的影响 被引量:6
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作者 李佳鑫 海广范 +3 位作者 贾岩龙 夏武 陈永凤 刘巨源 《中国病理生理杂志》 CAS CSCD 北大核心 2011年第4期787-790,共4页
目的:研究全反式维甲酸(ATRA)对人胚肺成纤维细胞(HFL-I)增殖与分化的影响。方法:体外培养HFL-I,MTT法检测不同浓度ATRA(0.1μmol/L、1μmol/L、10μmol/L)作用3d对HFL-I增殖能力的影响。5μg/L转化生长因子β_1(TGF-β_1)刺激0h、6h、... 目的:研究全反式维甲酸(ATRA)对人胚肺成纤维细胞(HFL-I)增殖与分化的影响。方法:体外培养HFL-I,MTT法检测不同浓度ATRA(0.1μmol/L、1μmol/L、10μmol/L)作用3d对HFL-I增殖能力的影响。5μg/L转化生长因子β_1(TGF-β_1)刺激0h、6h、12h、24h、48h、72h后,RT-PCR法检测α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)mRNA表达,刺激0d、1d、3d、5d后,Western blotting法检测α-SMA蛋白表达。不同浓度ATRA干预,24h后RT-PCR方法检测α-SMA mRNA表达,3d后用Western blotting方法检测α-SMA蛋白表达。结果:(1)MTT法检测显示不同浓度ATRA以浓度依赖性方式抑制HFL-I细胞的增殖(P<0.05)。(2)5μg/L TGF-β_1诱导后,HFL-I细胞中α-SMA mRNA和蛋白表达均上调(P<0.05)。(3)ATRA以浓度依赖性方式下调TGF-β_1诱导的α-SMA mRNA和蛋白的表达(P<0.05)。结论:ATRA能够抑制HFL-I细胞的增殖和TGF-β_1诱导的分化,该作用可能是通过下调α-SMA mRNA和蛋白的表达实现的。 展开更多
关键词 肺纤维化 肌成纤维细胞 转化生长因子Β 全反式维甲酸
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维甲酸对转化生长因子β1诱导的HFL-I细胞Ⅲ型胶原、STAT3和PIAS3表达的影响 被引量:2
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作者 夏武 杨宇平 +2 位作者 陈永凤 程娜 刘巨源 《中国病理生理杂志》 CAS CSCD 北大核心 2012年第6期1114-1119,共6页
目的:研究全反式维甲酸(ATRA)对转化生长因子β1(TGF-β1)诱导的人胚肺成纤维细胞(HFL-I)中Ⅲ型胶原(collagenⅢ)、信号转导子和转录激活子3(STAT3)和活化STAT3蛋白抑制剂(PIAS3)表达的影响。方法:体外培养HFL-I细胞,5μg/L TGF-β1诱导... 目的:研究全反式维甲酸(ATRA)对转化生长因子β1(TGF-β1)诱导的人胚肺成纤维细胞(HFL-I)中Ⅲ型胶原(collagenⅢ)、信号转导子和转录激活子3(STAT3)和活化STAT3蛋白抑制剂(PIAS3)表达的影响。方法:体外培养HFL-I细胞,5μg/L TGF-β1诱导0 h、6 h、12 h、24 h、48 h和72 h后,RT-PCR法检测colla-genⅢ、STAT3和PIAS3 mRNA表达,诱导0 d、1 d、3 d和5 d后,Western blotting法检测STAT3和p-STAT3蛋白表达。不同浓度维甲酸干预,24 h后用RT-PCR法检测collagenⅢ、STAT3和PIAS3 mRNA表达,3 d后用Westernblotting法检测STAT3和p-STAT3蛋白表达。结果:TGF-β1诱导后,HFL-I细胞中collagenⅢ和STAT3 mRNA表达明显上调,PIAS3 mRNA表达明显下调,STAT3和p-STAT3蛋白表达明显上调(P<0.05)。各浓度ATRA都下调TGF-β1诱导的HFL-I细胞中collagenⅢ、STAT3 mRNA和STAT3、p-STAT3蛋白的表达,上调PIAS3 mR-NA表达(P<0.05)。结论:ATRA可通过抑制TGF-β1诱导的HFL-I细胞collagenⅢ和STAT3表达、上调PIAS3表达而起到抗肺纤维化作用。 展开更多
关键词 转化生长因子Β 全反式维甲酸 胶原Ⅲ型 信号转导子和转录激活子3 活化STAT3蛋白抑制剂
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RNAi沉默STAT3基因对人大细胞肺癌细胞增殖的影响 被引量:2
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作者 夏武 贾岩龙 +3 位作者 朱武凌 程娜 陈永凤 刘巨源 《生物技术通报》 CAS CSCD 北大核心 2012年第6期183-188,共6页
旨在研究RNAi沉默STAT3基因对人大细胞肺癌NCI-H460细胞增殖的影响。针对STAT3基因mRNA设计合成5条短发夹DNA,构建重组SiRNA-ST3质粒(命名为SiRNA-ST3-1,2,3,4,N)。用重组质粒分别转染NCI-H460细胞,RT-PCR法检测转染24 h后STAT3 mRNA的... 旨在研究RNAi沉默STAT3基因对人大细胞肺癌NCI-H460细胞增殖的影响。针对STAT3基因mRNA设计合成5条短发夹DNA,构建重组SiRNA-ST3质粒(命名为SiRNA-ST3-1,2,3,4,N)。用重组质粒分别转染NCI-H460细胞,RT-PCR法检测转染24 h后STAT3 mRNA的表达;Western blotting法检测转染24 h和48 h后STAT3、pSTAT3蛋白表达;MTT法检测转染24 h、48 h、72 h后NCI-H460细胞增殖情况。结果显示,SiRNA-ST3载体构建成功。RT-PCR和Western blotting检测结果表明,NCI-H460细胞转染重组质粒SiRNA-ST3-2和SiRNA-ST3-3后STAT3基因mRNA转录和STAT3、pSTAT3蛋白表达都明显下降(P<0.05)。与未转染组比,SiRNA-ST3-2组和SiRNA-ST3-3组NCI-H460增殖能力24 h、48 h降低明显(P<0.05);与SiRNA-ST3-N组比,SiRNA-ST3-2组和SiRNA-ST3-3组NCI-H460增殖能力48 h降低明显(P<0.05)。由此证实,构建的重组质粒SiRNA-ST3-2、SiRNA-ST3-3能有效靶向沉默STAT3基因,并抑制人大细胞肺癌NCI-H460细胞的增殖能力。 展开更多
关键词 RNA干扰 大细胞肺癌 STAT3 细胞增殖
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全反式维甲酸对HFL-Ⅰ细胞α-平滑肌肌动蛋白、Ⅰ型胶原、热休克蛋白47表达的影响 被引量:1
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作者 刘巨源 李佳鑫 +3 位作者 海广范 陈永凤 夏武 贾岩龙 《中国药理学通报》 CAS CSCD 北大核心 2011年第5期700-704,共5页
目的研究全反式维甲酸(ATRA)对转化生长因子-β1(TGF-β1)诱导的人胚肺成纤维细胞(HFL-Ⅰ)中α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA),Ⅰ型胶原(Collagen-Ⅰ),热休克蛋白47(HSP47)mRNA和蛋白表达的影响。方法体外培养HFL-Ⅰ细胞,MTT法检测不同浓度TGF... 目的研究全反式维甲酸(ATRA)对转化生长因子-β1(TGF-β1)诱导的人胚肺成纤维细胞(HFL-Ⅰ)中α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA),Ⅰ型胶原(Collagen-Ⅰ),热休克蛋白47(HSP47)mRNA和蛋白表达的影响。方法体外培养HFL-Ⅰ细胞,MTT法检测不同浓度TGF-β1和ATRA分别作用3 d对HFL-Ⅰ细胞增殖能力的影响。随后分为6组:对照组、5μg·L-1 TGF-β1组、10μmol·L-1 ATRA组、5μg·L-1TGF-β1+0.1μmol·L-1 ATRA组、5μg·L-1 TGF-β1+1μmol·L-1 ATRA组、5μg·L-1 TGF-β1+10μmol·L-1 AT-RA组,RT-PCR和Western blot方法分别检测各实验组细胞中α-SMA,Collagen-Ⅰ,HSP47 mRNA和蛋白的表达。结果①MTT法检测结果显示不同浓度的TGF-β1可刺激HFL-Ⅰ细胞增殖,呈浓度依赖性(P<0.05);不同浓度的ATRA对HFL-Ⅰ细胞增殖能力均有明显抑制作用,并随药物浓度的增加而增强(P<0.05)。②5μg.L-1 TGF-β1诱导后,HFL-Ⅰ细胞中α-SMA,Collagen-I,HSP47 mRNA和蛋白表达均明显上调(P<0.05)。③ATRA以浓度依赖性方式下调经TGF-β1诱导的HFL-Ⅰ细胞中α-SMA,Collagen-I,HSP47 mR-NA和蛋白的表达(P<0.05)。结论 ATRA能够抑制TGF-β1诱导的HFL-Ⅰ细胞的分化,其作用机制可能与降低Col-lagen-I、HSP47表达有关。 展开更多
关键词 肌成纤维细胞 转化生长因子-β1 全反式维甲酸 Α-平滑肌肌动蛋白 I型胶原 热休克蛋白47
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