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银杏黄酮苷元通过调控DUSP1表达对急性胰腺炎大鼠腺泡细胞炎症因子分泌和凋亡的影响 被引量:2
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作者 杜健磊 王俊苹 刘伟 《郑州大学学报(医学版)》 CAS 北大核心 2021年第2期270-274,共5页
目的:探讨银杏黄酮苷元(GA)对雨蛙素诱导的急性胰腺炎(AP)大鼠腺泡细胞炎症因子分泌和凋亡的影响。方法:采用雨蛙素诱导大鼠胰腺腺泡细胞株AR42J建立AP腺泡细胞模型。①正常培养的AR42J细胞作为空白对照组,AP模型细胞为AP组,以用15、30... 目的:探讨银杏黄酮苷元(GA)对雨蛙素诱导的急性胰腺炎(AP)大鼠腺泡细胞炎症因子分泌和凋亡的影响。方法:采用雨蛙素诱导大鼠胰腺腺泡细胞株AR42J建立AP腺泡细胞模型。①正常培养的AR42J细胞作为空白对照组,AP模型细胞为AP组,以用15、30、60 mg/L GA处理的AP模型细胞作为GA低、中、高浓度组。②将pcDNA、pcDNA-双特异性磷酸酶1(DUSP1)转染至AR42J细胞6 h后,再用100 nmol/L雨蛙素刺激,分别作为AP+pcDNA组、AP+pcDNA-DUSP1组。③将si-NC、si-DUSP1转染至AR42J细胞6 h后,再用100 nmol/L雨蛙素和60 mg/L的GA处理,分别作为AP+GA+si-NC组、AP+GA+si-DUSP1组,另取AP模型细胞作为AP组、用100 nmol/L雨蛙素和60 mg/L的GA处理的细胞作为AP+GA组。ELISA法检测培养上清中炎症因子IL-6、TNF-α水平;Annexin V-FITC/PI双染法检测细胞凋亡;Western blot法检测蛋白表达;qRT-PCR法检测DUSP1 mRNA的表达水平。结果:GA处理后,雨蛙素诱导的AR42J细胞中IL-6、TNF-α水平降低,细胞凋亡率升高,Bcl-2表达水平降低,Bax表达水平升高,DUSP1表达水平升高(P<0.05)。过表达DUSP1可降低雨蛙素诱导的AR42J细胞炎症因子水平,促进细胞凋亡(P<0.05)。干扰DUSP1表达逆转了GA对雨蛙素诱导的AP腺泡细胞炎症因子和凋亡的影响(P<0.05)。结论:GA可通过上调DUSP1表达抑制雨蛙素诱导的AP腺泡细胞炎症反应,促进细胞凋亡。 展开更多
关键词 银杏黄酮苷元 双特异性磷酸酶1 急性胰腺炎 凋亡 大鼠
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大剂量咖啡因对脂多糖诱导的新生大鼠神经细胞活力及PI3K/AKT信号通路蛋白表达的影响 被引量:1
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作者 王俊苹 张剑春 刘伟 《郑州大学学报(医学版)》 CAS 北大核心 2020年第5期672-676,共5页
目的:探讨大剂量咖啡因对脂多糖(LPS)诱导的新生大鼠神经细胞活力和PI3K/AKT信号通路蛋白表达的影响。方法:分离及培养原代大鼠(出生24 h以内)大脑皮层神经细胞。将神经细胞分为空白对照组、LPS组、咖啡因组和咖啡因+LPS组。空白对照组... 目的:探讨大剂量咖啡因对脂多糖(LPS)诱导的新生大鼠神经细胞活力和PI3K/AKT信号通路蛋白表达的影响。方法:分离及培养原代大鼠(出生24 h以内)大脑皮层神经细胞。将神经细胞分为空白对照组、LPS组、咖啡因组和咖啡因+LPS组。空白对照组细胞仅用培养液培养24 h;LPS组和咖啡因组细胞分别用10 mg/L的LPS及5 mmol/L的咖啡因处理24 h;咖啡因+LPS组细胞用5 mmol/L咖啡因和10 mg/L的LPS处理24 h;采用MTT法检测细胞活力,Annexin V-FITC/PI双染法检测细胞凋亡率;Western blot法检测细胞中PCNA、Cleaved Caspase-3、PI3K和磷酸化AKT(p-AKT)蛋白的表达。另取大鼠神经细胞分为两组:咖啡因+LPS组细胞用咖啡因和LPS诱导24 h;咖啡因+LPS+LY294002组细胞用咖啡因、LPS和PI3K/AKT信号通路抑制剂LY294002处理24 h;然后检测两组细胞活力、凋亡率及PCNA、Cleaved Caspase-3、PI3K、p-AKT蛋白的表达。结果:LPS和咖啡因单独作用均可抑制神经细胞存活,诱导凋亡,下调PCNA、PI3K和p-AKT表达,上调Cleaved Caspase-3表达(P<0.05);两者联用具有协同增效的作用(P<0.05)。与咖啡因+LPS组比较,咖啡因+LPS+LY294002组细胞活力降低,凋亡率升高,PCNA、PI3K和p-AKT蛋白表达降低,Cleaved Caspase-3蛋白表达升高(P<0.05)。结论:大剂量咖啡因可通过抑制PI3K/AKT信号通路,增强LPS诱导的新生大鼠神经细胞活力抑制和凋亡促进作用。 展开更多
关键词 大剂量 咖啡因 PI3K/AKT信号通路 新生大鼠 神经细胞
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