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慢病毒介导神经营养因子3基因修饰大鼠嗅鞘细胞的实验研究
1
作者 李海明 张岱男 +5 位作者 蔡瑞艳 刘俊丽 安云英 王晓银 肖萌 金保哲 《神经解剖学杂志》 CAS CSCD 2021年第5期539-544,共6页
目的:探究神经营养因子3(NT-3)基因修饰的嗅鞘细胞(OECs)分泌的NT-3在体内外的活性。方法:取SD大鼠胎鼠嗅球组织,进行原代培养、纯化和鉴定,将纯化后的OECs分为对照组(control)、空病毒感染组(Lenti-NC)以及Lenti-NT-3感染组(Lenti-NT-... 目的:探究神经营养因子3(NT-3)基因修饰的嗅鞘细胞(OECs)分泌的NT-3在体内外的活性。方法:取SD大鼠胎鼠嗅球组织,进行原代培养、纯化和鉴定,将纯化后的OECs分为对照组(control)、空病毒感染组(Lenti-NC)以及Lenti-NT-3感染组(Lenti-NT-3)3组,分别在4~28 d,每隔4 d应用酶联免疫分析方法(ELISA)测细胞培养上清中NT-3的浓度。并将NT-3基因修饰的OECs(NT-3-OECs)注入SD大鼠脑部,2周后进行脑组织石蜡切片p75神经生长因子受体(p75 NGFR)、胶质纤维酸性蛋白(GFAP)免疫荧光检测,运用ELISA方法在4~16 d,每隔4 d测各组大鼠脑组织中NT-3的浓度。结果:纯化后OECs纯度为(92.03±2.17)%;慢病毒对OECs的感染率为(70.69±10.29)%;各时间点Lenti-NT-3组上清中NT-3含量均显著高于Control组与Lenti-NC组(P<0.05);NT-3-OECs移植入大鼠脑内2周后,可见p75 NGFR、GFAP表达阳性的OECs;各时间点Lenti-NT-3组脑组织中NT-3含量均显著高于Control组与Lenti-NC组(P<0.05)。结论:运用慢病毒载体构建的NT-3-OECs可在体内外高表达具有生物学活性的NT-3。 展开更多
关键词 慢病毒 神经营养因子3 嗅鞘细胞 大鼠
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间充质干细胞外泌体在神经系统疾病中的应用 被引量：1
2
作者 任瑞芳 王利江 +4 位作者 孙玉莹 赵君 闫海清 刘玉珍 张平 《神经解剖学杂志》 CAS CSCD 2022年第1期111-114,共4页
外泌体是真核细胞分泌的纳米级脂质双分子层小囊泡,含有母源细胞相似的生物活性物质,是细胞间物质传递和信息交流的载体;近些年间充质干细胞(MSCs)在神经系统疾病的治疗中取得了显著成绩,外泌体的提出为其作用机制的研究提供了一个全新... 外泌体是真核细胞分泌的纳米级脂质双分子层小囊泡,含有母源细胞相似的生物活性物质,是细胞间物质传递和信息交流的载体;近些年间充质干细胞(MSCs)在神经系统疾病的治疗中取得了显著成绩,外泌体的提出为其作用机制的研究提供了一个全新的角度。本文就MSCs外泌体的结构与功能以及在神经系统疾病中的应用作一综述。 展开更多
关键词 间充质干细胞 外泌体 神经疾病 作用机制
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大鼠颈上神经节代谢型谷氨酸受体7,8的表达及慢性间歇性低氧对其的影响 被引量：1
3
作者 魏茜茜 李超红 +2 位作者 赵晨露 赵宝生 刘玉珍 《南方医科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2023年第7期1172-1178,共7页
目的研究大鼠颈上神经节(SCG)组织中III组代谢型谷氨酸受体7和8(mGluR7/8)的表达、定位,以及慢性间歇性低氧(CIH)对mGluR7和mGluR8蛋白表达量的影响。方法选取8周龄雄性SD大鼠30只,免疫组织化学染色检测大鼠SCG组织中mGluR7和mGluR8的... 目的研究大鼠颈上神经节(SCG)组织中III组代谢型谷氨酸受体7和8(mGluR7/8)的表达、定位,以及慢性间歇性低氧(CIH)对mGluR7和mGluR8蛋白表达量的影响。方法选取8周龄雄性SD大鼠30只,免疫组织化学染色检测大鼠SCG组织中mGluR7和mGluR8的表达。免疫荧光共定位染色检测mGluR7和mGluR8的分布。核浆分离蛋白进行Western blot检测mGluR7和mGluR8在细胞浆和细胞核的分布情况。构建6周CIH大鼠模型,CIH组放于低氧小室中:首先向小室内充入100%氮气,使氧浓度分数逐渐降低至6%并维持30 s,然后充入100%氧气,使氧浓度分数回升至21%,作用周期为4 min/次,8 h/d,对照组放于常氧环境中。通过尾动脉血压检测大鼠收缩压、舒张压和平均动脉压的变化。Western blot检测CIH对SCG中mGluR7和mGluR8蛋白表达量的影响。结果大鼠SCG表达mGluR7和mGluR8。mGluR7分布于神经元和小荧光(SIF)细胞,上述细胞胞浆和胞核中均染色阳性,而在卫星胶质细胞(SGCs)、神经纤维和血管中不表达;mGluR8定位于神经元和SIF细胞的胞浆中,而在SGCs、神经纤维和血管中不表达。大鼠SCG核浆蛋白检测结果进一步证实mGluR7不仅存在于胞浆也存在于胞核蛋白中,而mGluR8仅存在于胞浆蛋白中。动物实验结果显示,与对照组相比,CIH升高大鼠的收缩压(P<0.0001)、舒张压(P<0.001)和平均动脉压(P<0.0001)。CIH增加mGluR7和mGluR8的蛋白表达量(P<0.05)。结论mGluR7和mGluR8均表达于大鼠SCG,但是细胞定位方式不同,CIH升高大鼠血压并增加mGluR7和mGluR8蛋白在SCG的表达水平。 展开更多
关键词 代谢型谷氨酸受体7 代谢型谷氨酸受体8 颈上神经节 慢性间歇性低氧 高血压
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dbcAMP对NG108-15细胞中谷氨酸转运体及受体表达的影响
4
作者 李超红 刘玉珍 《神经解剖学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2020年第6期597-604,共8页
目的:探讨谷氨酸转运体及其受体在N6,2-0-二丁酰基腺苷3',5'环单磷酸钠盐(dbcAMP)诱导NG108-15细胞分化前后的表达情况。方法:应用1 mmol/L dbcAMP诱导NG108-15细胞分化,免疫荧光染色检测dbcAMP对NG108-15细胞胶质纤维酸性蛋白(... 目的:探讨谷氨酸转运体及其受体在N6,2-0-二丁酰基腺苷3',5'环单磷酸钠盐(dbcAMP)诱导NG108-15细胞分化前后的表达情况。方法:应用1 mmol/L dbcAMP诱导NG108-15细胞分化,免疫荧光染色检测dbcAMP对NG108-15细胞胶质纤维酸性蛋白(GFAP)和巢蛋白(nestin)表达影响,RT-PCR技术检测dbcAMP对NG108-15细胞中囊泡膜谷氨酸转运体(VGluTs)、兴奋性氨基酸转运体(EAATs)、离子型谷氨酸受体(iGluRs)和代谢型谷氨酸受体(mGluRs)mRNA表达的影响。结果:dbcAMP处理72 h后NG108-15细胞GFAP和nestin表达下降;dbcAMP增加NG108-15细胞中EAAT1、VGluT2/3、GluR1、mGluR5的mRNA表达水平,而降低EAAT2/3、GluR3/4/7、mGluR2/7/8的mRNA表达水平。结论:dbcAMP处理可引起NG108-15细胞谷氨酸转运体及其受体表达水平发生改变。 展开更多
关键词 谷氨酸转运体 离子型谷氨酸受体 代谢型谷氨酸受体 NG108-15细胞
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烟雾病易感因素研究进展 被引量：3
5
作者 郭鹏宇 张豪杰 +8 位作者 张增雨 李怡萌 范亚杰 齐金博 卢壮壮 邱艳艳 杨静怡 邢红霞 李超堃 《中国脑血管病杂志》 CAS CSCD 北大核心 2019年第2期101-108,共8页
烟雾病是一种进行性脑血管病,具有种族易感性、家族聚集性特征。烟雾血管表现出内膜增厚,中膜变薄,内弹力板迂曲,伴有淋巴细胞浸润等特征性病理表现,其病因及发病机制尚未完全阐明,目前认为该病与内皮细胞、平滑肌细胞、细胞外基质的异... 烟雾病是一种进行性脑血管病,具有种族易感性、家族聚集性特征。烟雾血管表现出内膜增厚,中膜变薄,内弹力板迂曲,伴有淋巴细胞浸润等特征性病理表现,其病因及发病机制尚未完全阐明,目前认为该病与内皮细胞、平滑肌细胞、细胞外基质的异常代谢和炎性反应相关。作者从遗传因素、机体内环境因素、免疫因素3个层面,阐述内皮细胞易感基因环指蛋白213、平滑肌细胞易感基因、细胞外基质代谢相关基因、血管生成相关因子以及免疫易感基因在烟雾病的发生、发展中所起的作用。 展开更多
关键词 脑底异常血管网病 遗传学 细胞内环境 免疫 发病机制 综述
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运用无胰酶植块法培养大鼠嗅鞘细胞的研究 被引量：1
6
作者 李海明 张岱男 +4 位作者 肖萌 常海刚 尹志杰 安云英 金保哲 《神经解剖学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2020年第2期195-199,共5页
目的:探讨无胰酶植块法进行大鼠嗅鞘细胞(OECs)培养对OECs形态特征的影响。方法:选用妊娠14d左右的SD雌性大鼠,取出其胎鼠,剥离嗅球,剪碎组织,分别用常规培养法无胰酶植块法分离OECs,用含15%胎牛血清的DMEM/F12完全培养基培养嗅鞘细胞,... 目的:探讨无胰酶植块法进行大鼠嗅鞘细胞(OECs)培养对OECs形态特征的影响。方法:选用妊娠14d左右的SD雌性大鼠,取出其胎鼠,剥离嗅球,剪碎组织,分别用常规培养法无胰酶植块法分离OECs,用含15%胎牛血清的DMEM/F12完全培养基培养嗅鞘细胞,免疫荧光染色检测p75神经生长因子受体(p75 NG-FR)、胶质纤维酸性蛋白(GFAP)的表达,同时测量0ECs轴突的长度。结果:无胰酶消化的OECs克隆团处有大量的OECs向外延伸,分离单个OECs发现与常规培养法相比,其神经细胞轴突显著伸长;常规培养法可获取1.04×10^7个细胞,无胰酶植块法可获取3.09×10^7个细胞。结论:无胰酶植块法可获取大量的OECs,且OECs的轴突较长。 展开更多
关键词 植块法 嗅鞘细胞 大鼠
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溶瘤腺病毒靶向治疗脑胶质瘤的研究现状及进展 被引量：1
7
作者 张俊河 肖云喜 +1 位作者 张洁 秦川 《临床与实验病理学杂志》 CAS 北大核心 2023年第6期717-719,共3页
脑胶质瘤是常见的颅内恶性肿瘤之一,手术治疗及术后放、化疗仍是其主要的治疗手段,因其术后复发率高、放化疗副作用及耐药性等问题,无法达到令人满意的治疗效果。基因治疗作为目前发展迅速的精准治疗措施之一,递送载体是其发挥治疗作用... 脑胶质瘤是常见的颅内恶性肿瘤之一,手术治疗及术后放、化疗仍是其主要的治疗手段,因其术后复发率高、放化疗副作用及耐药性等问题,无法达到令人满意的治疗效果。基因治疗作为目前发展迅速的精准治疗措施之一,递送载体是其发挥治疗作用的关键因素,溶瘤腺病毒因其特异性、高效性及安全性等优势,使其在多种肿瘤的基础研究及临床应用中被作为基因递送的载体。该文主要介绍了溶瘤腺病毒在脑胶质瘤中的研究现状,联合治疗的策略及临床应用最新进展,以期为溶瘤腺病毒在脑胶质瘤的靶向治疗中提供一定的理论依据。 展开更多
关键词 胶质瘤 溶瘤腺病毒 基因治疗 联合治疗 文献综述
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新生大鼠窒息后缺氧脑损伤模型的磁共振影像与病理对照研究
8
作者 谢北辰 闫瑞芳 +3 位作者 任继鹏 牛劲 李海明 杜朝阳 《磁共振成像》 CAS CSCD 北大核心 2023年第7期108-114,共7页
目的探讨常规MRI联合磁敏感加权成像(susceptibility-weighted imaging,SWI)对单纯缺氧法建立新生大鼠窒息后缺氧脑损伤模型病理类型的研究,并从组织学探讨缺氧对皮层及海马的影响。材料与方法将新生7日龄SD(Sprague Dawley)大鼠随机分... 目的探讨常规MRI联合磁敏感加权成像(susceptibility-weighted imaging,SWI)对单纯缺氧法建立新生大鼠窒息后缺氧脑损伤模型病理类型的研究,并从组织学探讨缺氧对皮层及海马的影响。材料与方法将新生7日龄SD(Sprague Dawley)大鼠随机分为窒息组与对照组,窒息组幼鼠置于封闭小室内进行氧浓度为1%的缺氧5 min-氧浓度为21%的复氧3 min循环,累计缺氧30 min;对照组置于相同小室内相同时间。缺氧过程、缺氧后、造模后(1、3、7 d)进行行为学观察,并在扫描后1、3、7 d进行T1WI、T2WI及SWI序列扫描。根据MRI异常信号部位进行苏木素-伊红染色,观察异常信号区病理损伤类型。采用Nissl染色观察幼鼠皮层、海马齿状核(dentate grrus,DG)区、CA1(corn ammonis 1)及CA3(corn ammonis 3)区神经元存活情况;采用免疫组化染色检测凋亡相关蛋白Caspase-3的表达。结果幼鼠在缺氧后1、3、7 d均出现癫痫发作。MRI及SWI显示脑损伤类型包括脑室扩大、脑软化灶形成、脑室及脑实质内出血及微血管扩张。Nissl染色显示皮层、海马DG区神经元在缺氧后1、3、7 d均较对照组减少(P<0.05),CA3区神经元在缺氧后7 d减少(P<0.05)。免疫组织化学染色显示,海马DG区Caspase-3表达在缺氧后1、3、7 d均较对照组增高(P<0.05),皮层表达在缺氧后3、7 d均较对照组增高(P<0.05);海马CA1区、CA3区表达在缺氧后7 d较对照组增高(P<0.05)。结论MRI及SWI提示急性间歇性缺氧早期即可存在脑损伤,缺氧脑损伤可导致癫痫发作。提示临床将MRI及SWI作为有窒息病史且怀疑脑损伤患儿的常规检查,并应尽早进行临床干预。 展开更多
关键词 缺氧 脑损伤 癫痫 新生大鼠 磁敏感加权成像 磁共振成像
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