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miR-149-3p 通过靶向FOXP3 抑制宫颈癌HeLa细胞的恶性生物学行为 被引量:3
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作者 王慧玲 杨君 +1 位作者 陈瑞香 蔡政 《中国肿瘤生物治疗杂志》 CAS CSCD 北大核心 2018年第7期704-710,共7页
目的:探索miR-149-3p对宫颈癌HeLa细胞增殖、凋亡、侵袭及迁移的影响及其机制。方法:HeLa细胞随机分为5组:未转染(HeLa)组、mimic-scramble组、miR-149 mimic组、FOXP3过表达(pc-FOXP3)组、共转染(mimic+pc-FOXP3)组,Mimicscramble为miR... 目的:探索miR-149-3p对宫颈癌HeLa细胞增殖、凋亡、侵袭及迁移的影响及其机制。方法:HeLa细胞随机分为5组:未转染(HeLa)组、mimic-scramble组、miR-149 mimic组、FOXP3过表达(pc-FOXP3)组、共转染(mimic+pc-FOXP3)组,Mimicscramble为miR-149 mimic的阴性对照随机序列。荧光素酶实验验证miR-149-3p与FOXP3的靶向结合关系。实时定量PCR(q RT-PCR)检测HeLa细胞中miR-149-3p表达及FOXP3的m RNA水平,Western blotting检测FOXP3的蛋白水平。CCK-8检测细胞增殖,流式细胞术分析细胞凋亡,Transwell实验检测细胞侵袭,划痕实验分析细胞迁移。结果:荧光素酶实验显示miR-149-3p可靶向结合FOXP3。与未转染组相比miR-149 mimic组miR-149-3p表达升高、FOXP3 m RNA水平下降(P<0.01),而且miR-149mimic组FOXP3蛋白水平低于未转染组(P<0.01)、pc-FOXP3组FOXP3蛋白水平高于未转染组(P<0.01),与pc-FOXP3组相比mimic+pc-FOXP3组FOXP3蛋白水平降低(P<0.01)。miR-149 mimic组细HeLa胞增殖倍数低于未转染组(P<0.01),pc-FOXP3组细胞增殖倍数高于未转染组(P<0.01),与pc-FOXP3组相比mimic+pc-FOXP3组细胞增殖倍数下降(P<0.01);miR-149 mimic组HeLa细胞凋亡率高于未转染组(P<0.01),pc-FOXP3组细胞凋亡率低于未转染组(P<0.01),与pc-FOXP3组相比mimic+pc-FOXP3组细胞凋亡率上升(P<0.01);miR-149 mimic组每个视野下的侵袭细胞数和划痕愈合率低于未转染组(P<0.01),pc-FOXP3组每个视野下的侵袭细胞数和划痕愈合率高于未转染组(P<0.01),与pc-FOXP3组相比mimic+pc-FOXP3组每个视野下的侵袭细胞数和划痕愈合率下降(P<0.01)。结论:miR-149-3p通过靶向FOXP3抑制宫颈癌HeLa细胞增殖、侵袭和迁移,同时促进细胞凋亡。 展开更多
关键词 miR-149-3p FOXP3基因 宫颈癌 HELA细胞 增殖 凋亡 侵袭 迁移
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紫草素对子宫内膜癌细胞增殖、凋亡和顺铂耐药性的影响 被引量:7
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作者 刘亚楠 王炳先 +1 位作者 路臣桂 杨君 《中成药》 CAS CSCD 北大核心 2021年第8期2219-2224,共6页
目的探讨紫草素调控HNF1A⁃AS1/miR⁃20b⁃5p轴对子宫内膜癌细胞增殖、凋亡和顺铂耐药性的影响。方法将子宫内膜癌细胞HEC⁃1B分为对照组、紫草素低、中、高剂量组、si⁃NC组、si⁃HNF1A⁃AS1组、miR⁃NC组、miR⁃20b⁃5p组、pcDNA⁃NC+紫草素组、p... 目的探讨紫草素调控HNF1A⁃AS1/miR⁃20b⁃5p轴对子宫内膜癌细胞增殖、凋亡和顺铂耐药性的影响。方法将子宫内膜癌细胞HEC⁃1B分为对照组、紫草素低、中、高剂量组、si⁃NC组、si⁃HNF1A⁃AS1组、miR⁃NC组、miR⁃20b⁃5p组、pcDNA⁃NC+紫草素组、pcDNA⁃HNF1A⁃AS1+紫草素组、pcDNA⁃HNF1A⁃AS1+miR⁃NC+紫草素组、pcDNA⁃HNF1A⁃AS1+miR⁃20b⁃5p+紫草素组。CCK⁃8检测细胞存活率和顺铂对HEC⁃1B细胞的半抑制浓度值(IC50);流式细胞术检测凋亡;RT⁃PCR检测HNF1A⁃AS1和miR⁃20b⁃5p的表达;Western blot检测CyclinD1、Cleaved⁃caspase⁃3、MRP1表达。双荧光素酶报告基因实验和RT⁃PCR验证HNF1A⁃AS1对miR⁃20b⁃5p的靶向调控作用。结果低、中、高剂量紫草素处理后HEC⁃1B细胞存活率降低,细胞凋亡率升高(P<0.05,P<0.05),HNF1A⁃AS1、CyclinD1、MRP1表达降低,miR⁃20b⁃5p和Cleaved⁃caspase⁃3表达升高,IC50值降低(P<0.01)。干扰HNF1A⁃AS1表达或过表达miR⁃20b⁃5p后,HEC⁃1B细胞存活率降低,细胞凋亡率升高,CyclinD1、MRP1蛋白表达降低,Cleaved⁃caspase⁃3表达升高,IC50值降低(P<0.01)。HNF1A⁃AS1靶向负调控miR⁃20b⁃5p表达。过表达HNF1A⁃AS1可以逆转紫草素对子宫内膜癌细胞HEC⁃1B细胞增殖、凋亡和顺铂耐药性的影响(P<0.01)。过表达miR⁃20b⁃5p可以逆转pcDNA⁃HNF1A⁃AS1对紫草素处理的子宫内膜癌细胞HEC⁃1B细胞增殖、凋亡和顺铂耐药性的影响(P<0.01)。结论紫草素可抑制子宫内膜癌细胞存活,诱导细胞凋亡,提高其顺铂敏感性,其机制与调控HNF1A⁃AS1/miR⁃20b⁃5p轴有关。 展开更多
关键词 紫草素 子宫内膜癌 HNF1A⁃AS1 miR⁃20b⁃5p 细胞增殖 凋亡 顺铂耐药
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